DNASE2作为帕金森症诊断标志物的用途制造技术

本发明专利技术公开了DNASE2基因及其表达产物在制备诊断产品中的应用。该诊断产品可用于帕金森症的诊断。通过检测DNASE2基因及其表达产物的水平可以判断受试者将来患有帕金森症的风险或者确诊帕金森症的状态。本发明专利技术的诊断产品以受试者外周血为检测对象，可实现无创、快速、灵敏和准确的诊断效果。

The use of DNASE2 as a diagnostic marker for Parkinson's disease

The invention discloses the application of the DNASE2 gene and its expression products in the preparation of diagnostic products. The diagnostic product can be used for the diagnosis of Parkinson's disease. By detecting the level of the DNASE2 gene and its expression products, the risk of Parkinson's disease in the future or the state of the diagnosis of Parkinson's disease can be judged. The diagnostic product of the invention takes the peripheral blood of the subjects as the detection object, and can realize the noninvasive, rapid, sensitive and accurate diagnosis effect.

【技术实现步骤摘要】
DNASE2作为帕金森症诊断标志物的用途
本专利技术属于分子诊断领域，涉及一种用于帕金森症诊断的分子标志物，具体涉及血液中的分子标志物-DNASE2基因在制备诊断帕金森症的产品中的应用。
技术介绍
PD是继阿尔兹海默病后的第二大常见的、缓慢发生的、与年龄相关的神经退行性疾病，又名震颤麻搏。病理上中脑黑质多巴胺能神经元(dopaminergicneurons,DNs)选择性丧失、残存神经元中路易小体化(Lewybody,LB)形成和纹状体多巴胺含量明显减少，导致了静止性震颤、肌强直、运动迟缓、姿势步态异常这4个主要的临床症状(BraakH,TrediciKD，etal.StagingofbrainpathologyrelatedtosporadicParkinson,sdisease.NeurobiologyofAging,2003,24(2)：197-211)。在工业化国家，PD患者占总人口的化3％，占60岁以上人口的1％，全世界每年每100000人中新増8-18例PD患者(deLauLM,BretelerMM.Epidemiologyofparkinson’sdisease.TheLancetNeurology,2006,5(6):525-535)。Stephen(KS.Incidenceofparkinson’sDisease:Variationbyage,Gender,andRace/Ethnicity,2003:157,1015-1022)研究了PD发生率与年龄、性别和种族的关系，发现在60岁以上发病率会快速増加，而50岁以下的病例只占4％；男性患者是女性患者的1.9倍；不同种族PD的发生率则是变化的，总的来说白人PD发生率比亚洲人高，黑人则是最低。目前除了SPECT或者PET影像方法具有部分辅助诊断作用外，帕金森病统一评分量表(UnifiedPakinson’sDiseaseRatingScale,UPDRS)和改良的Hoehn和Yahr帕金森病分期量表(H-Y分期)是PD临床诊断和治疗评估的常用方法。一般来说，排除如脑外伤、脑血管疾病、金属中毒等可引起继发性帕金森病的病因，也没有眼外肌麻痹、小脑征、锥体系损害以及肌萎缩等体征下，根据英国脑库的帕金森病诊断标准，患者有少动，再加上静止性震颤、肌强直、姿势步态异常三种症状中的一种，即可诊断为PD。此外，尿和脑脊液中多巴胺及其代谢产物降低，对药物左旋多巴的反应良好也有助于区分PD和其他神经退行性疾病。事实上多巴胺能神经元变性缺失50％-70％以上方出现临床症状，这往往使患者错失了早期诊断、早期治疗的机会，所以极需方便有效的生物标志物能帮助PD早期诊断并提高诊断的正确性。神经退行性疾病，包括帕金森病、阿尔茨海默病、亨廷顿病、和肌萎缩性脊髓侧索硬化症等，它们共同的特征是在中枢神经系统的不同部位有异常蛋白的存储和特发性神经元丢失(RossCA，PoirierMA.Proteinaggregationandneurodegenerativedisease.NatMed，2004,10Suppl：S10-S17)从而导致了运动和认知等功能障碍。神经退行性疾病因为病理改变发生在脑部，脑组织取得都是在死后剖尸所得，所以病理机制研究进展缓慢。总的来说，神经退行性疾病是各种基因和环境共同影响的结果。基因表达调控网络系统在癌症研究领域取得引人注目的进展，在许多肿瘤组织中如肺癌、乳腺癌、胃癌、结直肠癌等，某些基因的表达水平与其来源正常组织存在稳定而明显的差异。不同组织来源的肿瘤，甚至同一组织来源不同分化状态的加瘤，基因表达谱都不尽相同，表明基因表达具有明显的组织特异性和发育阶段特异性。因为神经退行性疾病病理上的直接特征是疾病特异性蛋白质的过量表达，所以推测特异性基因的异常改变了功能蛋白的表达水平，从而引起了疾病。现已越来越多的研究发现特异基因能够成为诊断帕金森的生物标志物，如以下申请号的专利公开的：201510713527.3、201510464905.9、201510463593.X、201510463617.1、201510809837.5。大部分疾病都是多基因调控的疾病，为了提高疾病的诊断准确率，将大量基因联合诊断成为必然，因此需要发掘更多与帕金森病相关的分子比标志物以便临床应用。
技术实现思路
为了弥补现有技术的不足，本专利技术的目的在于提供一种可用于帕金森症早期诊断的分子标志物。相比传统的帕金森症的诊断方法，使用基因标志物来诊断帕金森症的具有及时性、特异性和灵敏性，从而使患者在疾病早期就能知晓疾病风险，针对风险高低，采取相应的预防和治疗措施。为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：本专利技术提供了检测DNASE2基因表达的产品在制备诊断帕金森症的工具中的应用。进一步，上面所提到的检测DNASE2基因表达的产品包括：通过RT-PCR、实时定量PCR、免疫检测、原位杂交、芯片或高通量测序平台检测DNASE2基因表达水平以诊断帕金森症的产品。进一步，所述用RT-PCR诊断帕金森症的产品至少包括一对特异扩增DNASE2基因的引物；所述用实时定量PCR诊断帕金森症的产品至少包括一对特异扩增DNASE2基因的引物；所述用免疫检测诊断帕金森症的产品包括：与DNASE2蛋白特异性结合的抗体；所述用原位杂交诊断帕金森症的产品包括：与DNASE2基因的核酸序列杂交的探针；所述用芯片诊断帕金森症的产品包括：蛋白芯片和基因芯片；其中，蛋白芯片包括与DNASE2蛋白特异性结合的抗体，基因芯片包括与DNASE2基因的核酸序列杂交的探针。在本专利技术的具体实施方案中，所述用实时定量PCR诊断帕金森症的产品至少包括一对特异扩增DNASE2基因的引物的序列如SEQIDNO.1和SEQIDNO.2所示。优选地，所述诊断工具包括芯片、试剂盒、试纸或高通量测序平台。其中，高通量测序平台是一种特殊的诊断工具，检测DNASE2基因表达的产品可以应用于该平台实现对DNASE2基因的表达情况的检测。随着高通量测序技术的发展，对一个人的基因表达谱的构建将成为十分便捷的工作。通过对比疾病患者和正常人群的基因表达谱，容易分析出哪个基因的异常与疾病相关。因此，在高通量测序中获知DNASE2基因的异常与帕金森症相关也属于DNASE2基因的用途，同样在本专利技术的保护范围之内。本专利技术还提供了一种诊断帕金森症的工具，所述诊断工具包括芯片、试剂盒、试纸、或高通量测序平台。其中，所述芯片包括基因芯片、蛋白质芯片；所述基因芯片包括固相载体以及固定在固相载体的寡核苷酸探针，所述寡核苷酸探针包括用于检测DNASE2基因转录水平的针对DNASE2基因的寡核苷酸探针；所述蛋白质芯片包括固相载体以及固定在固相载体的DNASE2蛋白的特异性抗体；所述基因芯片可用于检测包括DNASE2基因在内的多个基因(例如，与帕金森症相关的多个基因)的表达水平。所述蛋白质芯片可用于检测包括DNASE2蛋白在内的多个蛋白质(例如与帕金森症相关的多个蛋白质)的表达水平。通过将多个与帕金森症的标志物同时检测，可大大提高帕金森症诊断的准确率。其中，所述试剂盒包括基因检测试剂盒和蛋白免疫检测试剂盒；所述基因检测试剂盒包括用于检测DNASE2基因转录水平的试剂；所述蛋白免本文档来自技高网...

【技术保护点】
检测DNASE2基因表达的产品在制备诊断帕金森症的工具中的应用。

【技术特征摘要】
1.检测DNASE2基因表达的产品在制备诊断帕金森症的工具中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述产品包括：通过RT-PCR、实时定量PCR、免疫检测、原位杂交、芯片或高通量测序平台检测DNASE2基因表达水平以诊断帕金森症的产品。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述用RT-PCR诊断帕金森症的产品至少包括一对特异扩增DNASE2基因的引物；所述用实时定量PCR诊断帕金森症的产品至少包括一对特异扩增DNASE2基因的引物；所述用免疫检测诊断帕金森症的产品包括：与DNASE2蛋白特异性结合的抗体；所述用原位杂交诊断帕金森症的产品包括：与DNASE2基因的核酸序列杂交的探针；所述用芯片诊断帕金森症的产品包括：蛋白芯片和基因芯片；其中，蛋白芯片包括与DNASE2蛋白特异性结合的抗体，基因芯片包括与DNASE2基因的核酸序列杂交的探针。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述用实时定量PCR诊断帕金森症的产品至少包括的一对特异扩增DNASE2基因的引物如SEQIDNO.1和SEQIDNO.2所示。5.一种用于诊断帕金森症的工具，其特征在于，所述工具能够通过检测样本中DNASE2基因的表达来诊断...

【专利技术属性】
技术研发人员：汪冰怡，肖枫，
申请(专利权)人：北京泱深生物信息技术有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11