靶向间皮素的嵌合抗原受体及其用途制造技术

本发明专利技术涉及靶向间皮素的嵌合抗原受体及其用途。具体而言，本发明专利技术提供一种多核苷酸序列，选自：(1)含有依次连接的抗间皮素单链抗体的编码序列、人CD8α铰链区的编码序列、人CD8跨膜区的编码序列、人CD28胞内区的编码序列、人41BB胞内区的编码序列、人CD3ζ胞内区的编码序列和任选的EGFR的含胞外结构域III和胞外结构域IV的片段的编码序列的多核苷酸序列；和(2)(1)所述多核苷酸序列的互补序列。本发明专利技术还提供相关的融合蛋白、含所述编码序列的载体，以及所述融合蛋白、编码序列、载体的用途。

Chimeric antigen receptor targeting mesothelin and its use

The present invention relates to a chimeric antigen receptor targeting mesothelin and its use. Specifically, the present invention provides a polynucleotide sequence, selected from the group consisting of: (1) containing sequentially connected anti mesothelin scFv encoding sequence, CD8 sequence, alpha hinge region encoding CD8 transmembrane domain encoding sequence, CD28 cytoplasmic domain encoding sequence, 41BB sequence encoding the intracellular region CD3, zeta intracellular region encoding sequences and optionally EGFR containing the extracellular domain of III and IV extracellular domain fragment encoding sequence of polynucleotide sequences; and (2) (1) the complementary sequence of polynucleotide sequences. The invention also provides the related fusion protein, the carrier containing the encoding sequence, and the use of the fusion protein, the encoding sequence and the carrier.

【技术实现步骤摘要】
靶向间皮素的嵌合抗原受体及其用途
本专利技术属于嵌合抗原受体领域，具体涉及靶向间皮素的嵌合抗原受体及其用途。
技术介绍
胰腺癌是临床上常见的消化系统恶性肿瘤，多见于50岁以上的人群。其发病率有明显的地区差异，近年来发病率呈逐渐上升趋势，在欧美国家已是第4常见的恶性肿瘤，居消化道癌症死因的第2位，仅次于大肠癌。胰腺癌发病隐匿，早期症状无特异性，手术切除率低。在肿瘤发生发展的进程中，很多基因的活化及其产物的表达起到了重要的作用，其内在确切的分子机制尚不完全明确，随着现代影像及内镜技术的飞速发展，对一些症状体征及影像表现较为明显的胰腺癌，明确诊断己没有太大困难，但此时大多己失去最佳手术时机，而对于一些早期患者诊断较难。因此寻求新的治疗手段，对于胰腺癌的治疗是当务之急。在肿瘤的浸润转移过程的研究方面，间皮素(Mesothelin)也是当前研究的热点。1996年Chang等利用宫颈癌HeLa细胞克隆出单克隆抗体识别的抗原，研究发现该抗原存在于正常间皮细胞，故命名为间皮素。肿瘤患者术后生存率低预后差的主要原因与它的浸润转移有关，肿瘤的浸润转移机制研究是目前的热点和难点。间皮素基因编码一种69kD本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种多核苷酸序列，所述多核苷酸序列选自：(1)含有依次连接的抗间皮素单链抗体的编码序列、人CD8α铰链区的编码序列、人CD8跨膜区的编码序列、人CD28胞内区的编码序列、人41BB胞内区的编码序列、人CD3ζ胞内区的编码序列和任选的EGFR的含胞外结构域III和胞外结构域IV的片段的编码序列的多核苷酸序列；和(2)(1)所述多核苷酸序列的互补序列。

【技术特征摘要】
1.一种多核苷酸序列，所述多核苷酸序列选自：(1)含有依次连接的抗间皮素单链抗体的编码序列、人CD8α铰链区的编码序列、人CD8跨膜区的编码序列、人CD28胞内区的编码序列、人41BB胞内区的编码序列、人CD3ζ胞内区的编码序列和任选的EGFR的含胞外结构域III和胞外结构域IV的片段的编码序列的多核苷酸序列；和(2)(1)所述多核苷酸序列的互补序列。2.如权利要求1所述的多核苷酸序列，其特征在于，所述多核苷酸序列在所述抗间皮素单链抗体的编码序列前还含有信号肽的编码序列，优选地，所述信号肽的氨基酸序列如SEQIDNO:2第1-22位氨基酸所示；和/或所述抗间皮素单链抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQIDNO:2第23-128位氨基酸所示；和/或所述抗间皮素单链抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQIDNO:2第141-259位氨基酸所示；和/或所述人CD8α铰链区的氨基酸序列如SEQIDNO:2第260-306位氨基酸所示；和/或所述人CD8跨膜区的氨基酸序列如SEQIDNO:2第307-328位氨基酸所示；和/或所述人CD28胞内区的氨基酸序列如SEQIDNO:2第329-369位氨基酸所示；和/或所述人41BB胞内区的氨基酸序列如SEQIDNO:2第370-417位氨基酸所示；和/或所述人CD3ζ胞内区的氨基酸序列如SEQIDNO:2第418-528位氨基酸所示；和/或所述EGFR的片段含有EGFR的胞外结构域III、胞外结构域IV以及跨膜区，或由EGFR的胞外结构域III、胞外结构域IV以及跨膜区组成；优选地，所述片段含有人EGFR的第310-646位氨基酸序列，或由人EGFR的第310-646位氨基酸序列组成；更优选地，所述片段的氨基酸序列如SEQIDNO:2第577-911位氨基酸所示；优选地，所述多核苷酸序列还含有GM-CSF受体α链信号肽的编码序列，所述GM-CSF受体α链信号肽设置于所述EGFR片段的N端；优选地，所述GM-CSF受体α链信号肽的氨基酸序列如SEQIDNO:2第555-576位氨基酸所示；和优选地，所述多核苷酸序列还含有连接所述GM-CSF受体α链信号肽与所述人CD3ζ胞内区的接头序列的编码序列，优选地所述接头序列的氨基酸序列如SEQIDNO:2第529-554位氨基酸所示。3.如权利要求2所述的多核苷酸序列，其特征在于，在所述抗间皮素单链抗体的编码序列前的所述信号肽的编码序列如SEQIDNO:1第1-66位核苷酸序列所示；和/或所述抗间皮素单链抗体的轻链可变区的编码序列如SEQIDNO:1第67-384位核苷酸序列所示；和/或所述抗间皮素单链抗体的重链可变区的编码序列如SEQIDNO:1第421-777位核苷酸序列所示；和/或所述人CD8α铰链区的编码序列如SEQIDNO:1第778-918位核苷酸序列所示；和/或所述人CD8跨膜区的编码序列如SEQIDNO:1第919-984位核苷酸序列所示；和/或所述人CD28胞内区的编码序列如SEQIDNO:1第985-1107位核苷酸序列所示；和/或所述人41BB胞内区的编码序列如SEQIDNO:1第1108-1251位核苷酸序列所示；和/或所述人CD3ζ胞内区的编码序列如SEQIDNO:1第1252-1584位核苷酸序列所示；和/或连接所述GM-CSF受体α链信号肽与所述人CD3ζ胞内区的所述接头序列的编码序列如SEQIDNO:1第1585-1662位核苷酸序列所示；所述GM-CSF受体α链信号肽的编码序列如SEQIDNO:1第1663-1728位核苷酸序列所示；和/或所述EGFR的片段的编码序列如SEQIDNO:1第1729-2733位核苷酸序列所示；或所述多核苷酸序列编码如SEQIDNO:2第23-528位所示的氨基酸序列，或编码如SEQIDNO:2第23-911位所示的氨基酸序列，或编码如SEQIDNO:2所示的氨基酸序列；或所述多核苷酸序列含有SEQIDNO:1或其第1-1584位所示的核苷酸序列，或由SEQIDNO:1或其第1-1584位所示的核苷酸序列组成。4...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄飞，金涛，王海鹰，何凤，史子啸，
申请(专利权)人：上海恒润达生生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：上海,31