单胺氧化酶活性测定方法及单胺氧化酶诊断试剂盒技术

本发明专利技术涉及单胺氧化酶活性的测定方法及其诊断试剂盒。利用单胺氧化酶水解苄胺、对苯甲胺－β－偶氮萘酚、丁基胺、戊基胺、β－苯乙基胺、酪胺等胺类化合物产生氨，再偶联谷氨酸脱氢酶反应，将还原型辅酶反应成氧化型辅酶，通过测定主波长３４０ｎｍ处吸光度的下降速度定量反映出样品中单胺氧化酶的活性大小。该方法特异性高，不受内、外源物质的污染，测试结果精确、准确性好。将诊断试剂盒制成双剂或三剂可减少各成分的交叉影响，保持试剂的稳定性，便于长期储存。该方法在普通紫外／可见光分析仪或者半自动／全自动生化分析仪上便可快速检测，不需要特殊或额外仪器，测试成本低廉，便于行业内推广应用。（*该技术在2024年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及酶法测定单胺氧化酶活性的方法，以及应用该方法配制而成的单胺氧化酶诊断试剂盒，属于医学检验测定

技术介绍
现有技术中，测定单胺氧化酶(MAO)活性的方法主要有荧光法、免疫抑制法和化学分光光度法。荧光法是以β-苯乙胺作为底物来检测单胺氧化酶，其依据是β-苯乙胺在10～100mg时反应速度最大，高于苄胺和5-羟色胺的反应速度。免疫学方法则利用单胺氧化酶抗体与单胺氧化酶发生反应，测定反应后形成的单胺氧化酶同工酶，目前应用较多的单克隆抗体有MAO-A3C9、MAO-A4F10、MAO-A7B10、MAO-A7E10和MAO-B1C2等。相对而言，化学分光光度法应有更为普遍。可以用单胺氧化酶催化胺类释放出的过氧化氢(H2O2)去氧化10-N-甲基氨基甲酰基-3，7-二甲氨基-10-氢-吩噻嗪(MCDP)等发色剂进行测定，也可以应用苄胺(Benzylamine)、对苯甲胺-β-偶氮萘酚、丁基胺(butylamine)、戊基胺(amylamine)、β-苯乙基胺(b-phenylethylamine)、酪胺(tyramine，又称“3-对羟基苯乙胺”，3-parahdro本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种测定单胺氧化酶活性的方法，包括以下步骤：①将待测样品与含有胺类化合物、２－酮戊二酸酯、谷氨酸脱氢酶和还原型辅酶的试剂混匀，使之发生以下反应，胺类化合物＋２水＋氧＊相应醛类产物＋铵离子＋过氧化氢＋２ＯＨ↑［－］铵离 子＋２－酮戊二酸酯＋还原型辅酶＊谷氨酸＋氧化型辅酶＋水②将反应混合物置于紫外／可见光分析仪或者半自动／全自动生化分析仪下，检测主波长３４０ｎｍ的吸光度的下降速度，测算出样品中单胺氧化酶的活性大小。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王尔中，
申请(专利权)人：苏州艾杰生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：32[中国|江苏]