HIV抗性基因制造技术

本发明专利技术涉及参与对感染免疫抗性的基因及其应用。尤其是涉及参与对ＨＩＶ感染的抗性并且在感染个体中延缓疾病发展的基因。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及抗性基因及其使用。尤其是，本专利技术涉及参与对感染免疫抗性的基因。
技术介绍
有可能使用标志基因诊断某种疾病的易感性(predisposition)是本领域所熟知的。例如，癌基因或肿瘤抑制基因被广泛认为显示着某种癌症的易感性，在考虑到突变的癌基因和缺失的肿瘤抑制基因和某些癌症之间的关联时尤其如此。另外，已经鉴定的基因(例如BRCA基因)用来预示患癌症高风险(例如乳腺癌)。还已知一些个体对感染具有高易感性或抗性，尤其是病毒感染。预测疾病易感性对拥有易感基因的人有益，可以使他们避免与已知的病因试剂、化学试剂或病毒的非必需性的接触，并采用已知的和开发的预防方法。它还可以用于设计针对病毒疾病的疫苗和用于基因治疗。另外，预测疾病发展的速度可以有机会进行个体化的、更有效的治疗管理。 另外，开发针对主要的病毒疾病(例如人免疫缺陷病毒(HIV)感染)的有效的疫苗是一个紧迫的事情，会对全球社会经济发生影响。HIV是获得性免疫缺陷综合征(AIDS)的病原体。开发这种疫苗的一个关键是理解抗HIV感染的天然抗性的机制。在这方面，一些HIV-1感染患者未出现临床恶化，一些明显抗性组人群尽管多次和重复暴露于这种病毒但是没有出现可检测的HIV-1基因组，它们是开发HIV感染的预防和治疗方法中值得注意的两个现象。一些宿主基因已经和可能的HIV感染抗性相关联，或延缓或加速HIV血清转化后发生AIDS。这些宿主基因包括编码趋化因子受体和细胞因子、作为天然杀伤细胞受体的杀伤免疫球蛋白样受体(KIRs)、和那些在主要组织相容性复合物(MHC)内的基因。 具有天然抗性的一些个体带有一种被称为CCR5Δ32的突变的HIV共受体基因，不过，这种突变是隐性的，并且赋予抵抗HIV进入细胞的抗性的同合子性(homozygosity)很罕见。因此，上述突变不能解释大多数的表现出对HIV感染的自发性抗性的个体。在目前的表现出对HIV感染具有天然抗性的人群中存在一个独特的人群，被称为HIV暴露血清阴性(ESN)或HIV-1暴露但是不感染个体(EUI)，这些个体多次和重复暴露于HIV中但是没有产生和HIV反应的血清IgG抗体。EUI尽管在外周血单核细胞(PBMC)中未出现可检测的血浆HIV-1RNA和HIV-1cDNA，但是表现出强HIV-1抗原特异性T淋巴细胞应答并产生HIV-1反应性粘膜IgA。在这些ESN/EUI个体的尿道或阴道分泌物中检测出HIV抗原特异性T淋巴细胞应答和HIV反应的粘膜IgA抗体表明，他们曾经暴露于HIV中，但是这种暴露没有导致感染。到目前为止将ESN/EUI状态和以前公布的遗传多态性进行关联的尝试还没有成功。从EUI中分离出的粘膜IgA表现出的HIV-1中和活性暗示，HIV-1中和抗体的快速产生和类型转换(class switch)有可能促成针对HIV感染的免疫抗性。在非人灵长类动物中进行的被动转移和疫苗诱导的活性免疫实验也揭示了针对HIV-1相关猴免疫缺陷病毒(SIV)或HIV-1和SIV致病性嵌合体的中和抗体的保护作用。但是，还没有确定在人体中产生的各种HIV特异性免疫应答所提供的保护的程度，并且现在也不知道免疫或遗传与可能的抗HIV感染的保护作用的共联。 最近表明，APOBEC3G，属于载脂蛋白BmRNA编辑酶(mRNA-editingenzyme)催化的多肽样(APOBEC)家族胞嘧啶核苷脱氨酶的一种细胞酶，具有广谱的抗逆转录病毒活性。因此，HIV穿透进入靶细胞并开始逆转录病毒基因组RNA进入DNA时，APOBEC3G诱导负链cDNA中的胞嘧啶转化为尿嘧啶，导致逆转录酶失败，并导致整合的前病毒基因组中大量的G到A的突变，显著降低病毒的适应性。HIV Vif蛋白通过在细胞质中与APOBEC3G形成复合物，阻止它被包装到病毒颗粒中，从而抵消APOBEC3G的活性，从而在新产生的病毒颗粒进入靶细胞时防止编辑突变。和Vif的相互作用通过泛素蛋白酶体通路刺激APOBEC3G降解，并促进病毒复制。这解释了Vif促进HIV复制并且使子代病毒颗粒的感染力增强10-100倍的生物特性。已经观察到在允许Vif删除型HIV复制的细胞系内不表达APOBEC3G，这进一步加强了Vif-APOBEC相互作用在确定HIV传染性中的重要性。 在更近期，第二个DNA编辑酶，APOBEC3F，被发现参与人细胞对HIV感染的抵抗。APOBEC3F也被包装进入HIV病毒中并通过特异性结合Vif蛋白来抑制病毒的感染力。APOBEC3G和APOBEC3F在非允许人类细胞系中共表达，在细胞中形成异二聚体。重要的是，APOBEC3F的抗病毒活性对Vif具有部分抗性，导致更显著的5′GA-到-5′AA的偏向性，因此更强地损伤HIV复制。但是，还不知道APOBEC3G和APOBEC3F对免疫细胞的直接效果，并且在上述ESN/EUI中还没有观察到这些DNA诱变剂蛋白的表达的可能的差别和暴露HIV后出现更强和/或更早免疫应答之间具有相关性。 在小鼠模型中，一些遗传因子控制着对Friend小鼠白血病病毒(FV)的抵抗力，并且动物的有效保护和生存需要复杂的免疫应答，包括B、T和NK细胞应答。见下表1。 表1在靶细胞中影响FV复制的宿主基因座位(gene loci)和对FV抗原的免疫应答 通过研究在小鼠和来自于EUI个体的DNA样品的Rfv3座位(所述研究是征得了EUI个体的同意的)，专利技术人发现，在人第22号染色体的区域内的小随体座位(microsatellite10ci)中，EUI具有独特并罕见的等位基因，所述区域与含有逆转录病毒抗性基因Rfv3的小鼠15号染色体的区域同线。在国际专利申请WO 2004/035825中专利技术人描述了在欧洲人(在意大利)中的ESN/EUI与HIV感染的抗性相关的特定的基因型或多态性。 本专利技术人现在已经鉴定和建立了HIV感染天然获得型免疫抵抗力(被称为ESN或EUI体质)相关的基因及其调控元件。此处所述结果暗示，现在专利技术人确定的基因及其调控元件是允许一些人在暴露于HIV中时产生免疫应答的遗传因子。这些因子中的一些组合在一起有可能和这样一个事实发生联系，所述事实是一些个体和大多数人相反，发展为AIDS的时间要长得多。 因此，本专利技术人鉴定了一些和感染尤其是病毒感染并且更具体地说是HIV感染的免疫抗性有关的基因及其调控元件。 确定这些和感染免疫抗性有关的基因及其调控元件能够建立一系列新型治疗模型和疫苗策略和诊断模型。 本专利技术人已经确定，位于人第22号染色体的下述区域的一个或多个基因及其基因产物(这些基因编码的多肽或所述多肽的片段)可用于治疗或预防感染，所述区域同线(syntenic)于小鼠第15号染色体D15Mit68座位和D15Mit107座位之间的区域。 在这方面，已经显示出，这些基因是表2所列出的小鼠基因的同源物或正向同源物(orthologue)，这些小鼠基因在不能对FV感染产生快速抗体应答的A/WySn种系小鼠和感染后14天产生FV中和抗体(B10.AxA/WySn)F1小鼠中的表达水平显著不同。本专利技术现在已经确定，这些人类基因是选自表2的小鼠基因的同源物或正向同源物，包括不过并非独占性地包括Q8CCA5(本文档来自技高网...

【技术保护点】
分离的核酸序列，其编码位于人２２号染色体Ｄ２２Ｓ２７７座位和Ｄ２２Ｓ４２３座位之间的区域的基因，或者其功能性片段。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：宫泽正顯，入江新司，M克莱里奇，
申请(专利权)人：免疫诊疗有限公司，财团法人大阪产业振兴机构，凸版印刷株式会社，
类型：发明
国别省市：GB[英国]