一种牛蒡根总黄酮的提取方法技术

本发明专利技术方案涉及一种牛蒡根总黄酮的提取方法，包括粉碎干燥：取牛蒡根药材粉碎成8目，并干燥保存；乙醇提取：将干燥后的牛蒡根与乙醇溶液以1g:12～24ml的料液比，在50～70℃的温度下回流提取三次，每次3.5～4.5小时，得到提取液；过滤浓缩：将步骤二得到的提取液过滤并合并滤液，使用旋转蒸发器对滤液进行蒸发浓缩，得到浓缩液；石油醚萃取：使用石油醚对浓缩液脱脂处理，得到脱脂浓缩液后干燥，形成粗提物。本方案实现完成了提取分离工艺研究，并有了初步的药理试验结果，同时对一些关键有效成分的分离纯化工艺也有了一定的研究思路和初步探索试验结果。

A method for extracting total flavonoids from burdock root

Extraction method of the invention relates to a method of total flavonoids of burdock root, including crushing and drying: Burdock Root crushing into 8 mesh, and dry; ethanol extraction: the dried burdock root and ethanol solution with 1g:12 ~ 24ml solid-liquid ratio at a temperature of 50~70 DEG C reflux extraction three times. Every 3.5 to 4.5 hours, get the extract; filtration concentration: filtration extract obtained from the step two and with the filtrate, the filtrate was evaporated and concentrated using a rotary evaporator to obtain concentrated liquid; petroleum ether extraction: for the treatment of concentrated liquid using petroleum ether degreasing, degreasing to concentrate after drying, the formation of crude extract. The scheme has completed the research of extraction and separation process, and has preliminary pharmacological test results. At the same time, it also has some research ideas and preliminary exploration results for the separation and purification process of some key effective components.

【技术实现步骤摘要】
一种牛蒡根总黄酮的提取方法
本专利技术属于植物中药提取
，具体涉及一种利用植物牛蒡根颗粒提取化学总黄酮的提取方法。
技术介绍
牛蒡（ArctiumLappaL.）原产我国,为菊科牛蒡属二年生草本植物。牛蒡根是牛蒡的肉质直根,归肺经；心经。主治：祛风热，消肿毒。治风毒面肿，头晕，咽喉热肿，齿痛，咳嗽，消渴，痈疽疮疥。近几年，牛蒡根的药用价值在欧美，日本等地区愈来愈受重视，研究发现牛蒡根中富含蛋白质、碳水化合物、多酚类、牛蒡酸、多炔类物质及多糖类物质等,具有抗菌，抗突变，抗癌，抗氧化，肝保护，清除重金属离子等多种生理功能。本方案基于对牛蒡根中药成分的分析，优选牛蒡根中总多酮提取的最佳工艺条件，为进一步开发功能性食品及功能性中药及价值提供依据。
技术实现思路
本专利技术的目的在于基于对牛蒡根成份的研究，提出一种牛蒡根总黄酮的提取方法，并实现对其纯化处理。本专利技术方案提出一种牛蒡根总黄酮的提取方法，包括以下步骤：步骤一、粉碎干燥：取牛蒡根药材粉碎成8目，并干燥保存；步骤二、乙醇提取：将干燥后的牛蒡根与乙醇溶液以1g:12～24ml的料液比，在50～70℃的温度下回流提取三次，每次3.5～4.5小时，得到提取液；步骤三、过滤浓缩：将步骤二得到的提取液过滤并合并滤液，使用旋转蒸发器对滤液进行蒸发浓缩，得到浓缩液；步骤四、石油醚萃取：使用石油醚对浓缩液脱脂处理，得到脱脂浓缩液后干燥，形成粗提物。进一步的方案，步骤五、分离纯化：将步骤四制备的粗提物制备成0.01g/mL的牛蒡根总黄酮水溶液，将大孔树脂置于牛蒡根总黄酮水溶液中，且放入恒温振荡器中静态吸附1-4h，得到初步纯化的牛蒡根总黄酮。进一步的方案，所述步骤五还包括：向吸附后的牛蒡根总黄酮水溶液中加入15%～60%乙醇作为洗脱剂，洗脱速度为1.25～2.75BV/h，洗脱后收集洗脱液。进一步的方案，所述步骤五之后还包括步骤六：步骤六、冷冻干燥：充分搅拌粗提物，以防止粗提物表面变硬，待粗提物体积基本不变时，进行冷冻干燥形成浸膏干粉。进一步的方案，所述恒温振荡器保持20℃恒温。进一步的方案，所述洗脱速度为1.25～2.75BV/h。进一步的方案，所述S4中的干燥装置为烘箱，进行步骤S4时烘箱内温度为75～85℃鼓风干燥。进一步的方案，所述S5中乙醇浓度为50%。本方案的有益效果体现在：1、本方案提出牛蒡根提取总黄酮的提取方法充分利用了植物成份实现中药化学成分提取。本方案实现完成了提取分离工艺研究，并有了初步的药理试验结果，同时对一些关键有效成分的分离纯化工艺也有了一定的研究思路和初步探索试验结果，本方案首先通过扩大试验研究完善小试研究工艺,验证小试研究的重复性和可靠性。2、本方案实现总多酮提取后进行了纯化处理，大孔吸附树脂将牛蒡根总黄酮提取物进行一次纯化后，在进行二次纯化保证提取纯度；3、以乙醇作为提取溶剂提取牛蒡根中黄酮类物质，便于工业应用，观察乙醇浓度，提取时间和料液比这三个主要影响提取率的因素做正交试验选取相对平均的提取工艺，以芦丁为标准品，应用亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠显色，溶液在510nm处测定吸收度计算出每组提取含量，从而确定最佳提取工艺，可以作为工业生产工艺的参考。附图说明图1为本专利技术方案总多酮的提取的步骤流程图；图2为本专利技术总多酮的提取的技术路线框图。具体实施方式为了使本专利技术的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图及具体实施方式，对本专利技术进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施方式仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。如图1图2所示，本专利技术方案提出一种牛蒡根总黄酮的提取方法，包括以下步骤：步骤一、S1、粉碎干燥：取牛蒡根药材粉碎成8目，并干燥保存；步骤二、S2、乙醇提取：将干燥后的牛蒡根与乙醇溶液以1g:12～24ml的料液比，在50～70℃的温度下回流提取三次，每次3.5～4.5小时，得到提取液；步骤三、S3、过滤浓缩：将步骤二得到的提取液过滤并合并滤液，使用旋转蒸发器对滤液进行蒸发浓缩，得到浓缩液；步骤四、S3、石油醚萃取：使用石油醚对浓缩液脱脂处理，得到脱脂浓缩液后干燥，形成粗提物。进一步的方案，步骤五、分离纯化：将步骤四制备的粗提物制备成0.01g/mL的牛蒡根总黄酮水溶液，将大孔树脂置于牛蒡根总黄酮水溶液中，且放入恒温振荡器中静态吸附1～4h，得到初步纯化的牛蒡根总黄酮。进一步的方案，所述步骤五还包括：向吸附后的牛蒡根总黄酮水溶液中加入15%～60%乙醇作为洗脱剂，洗脱速度为1.25～-2.75BV/h，洗脱后收集洗脱液。进一步的方案，所述步骤五之后还包括步骤六：步骤六、冷冻干燥：充分搅拌粗提物，以防止粗提物表面变硬，待粗提物体积基本不变时，进行冷冻干燥形成浸膏干粉。进一步的方案，所述恒温振荡器保持20℃恒温。进一步的方案，所述洗脱速度为1.25～2.75BV/h。进一步的方案，所述S4中的干燥装置为烘箱，进行步骤S4时烘箱内温度为75～85℃鼓风干燥。进一步的方案，所述S5中乙醇浓度为50%。具体的下面结合案例对本方案进行详细阐述：取原药材20.0g粉碎，粒度8目，干燥保存备用，分两组，每组回流提取三次，合并滤液，抽滤。滤液转移至旋蒸中蒸发浓缩回收乙醇至无醇味，用石油醚萃取，冷藏备用。间隔一定时间搅拌，防止稠膏表面变硬影响蒸发效果，稠膏体积基本不变时进行冷冻干燥，干燥后称重，放入干燥器中备用。取约10.0mg浸膏干粉，加30%乙醇溶解定容至50mL容量瓶，吸取1mL、2.5mL、5mL至具塞比色管中。每组按照标准品的处理方法处理。以及之前所取的干浸膏粉末的质量和总干浸膏质量之间的比例求出每组所提取的黄酮总质量。准确称取过8目筛干燥的牛蒡根20.0g，用60%的乙醇按料液比1:18（m:v）在60℃下浸提4小时，每组回流提取三次，合并滤液，抽滤。滤液转移至旋蒸中蒸发浓缩回收乙醇至无醇味，根据最后蒸发出的药液量，使最后药液量控制在10mL左右。石油醚萃取，得牛蒡根粗粉。冷藏备用。大孔树脂动态吸附与洗脱过程中，涉及到的相关物理量计算主要有吸附量、吸附率，计算公式如下所示。每克吸附量=(C0V0-C1V1)/W吸附率=(C0V0-C1V1)/C0V0×100%解吸率(P)=C2V2/(C0V0-C1V1)×100%式中C0:上样质量浓度(mg/mL);C1:吸附后剩余液的质量浓度(mg/mL);C2为解吸液的质量浓度;V0:上样的体积(mL);V1:吸附后剩余溶液体积(mL);V2为解吸液体积(mL);W:树脂质量(g)。准确称取抽滤过的4种新鲜树脂D101、AB-8、LS-46D、NKA-9各4.0g于500mL的三角锥形瓶中，分别加入400mL10mg/mL的牛蒡根总黄酮水溶液，放入恒温振荡器中静态吸附，设置温度25℃，振荡频率100rpm，振摇4h。分别测定0.5h、1.0h、1.5h、2h、2.5h、3h、3.5h、4h时样品液的黄酮的含量。吸附结束后，减压过滤除去残留液，分别向锥形瓶中各加入50mL30%的乙醇，放入恒温振荡器中静态解吸，振摇4h，进行黄酮的解析，测定含量。对静态吸附平衡液和解吸液总黄酮浓度进行测定，计算吸附率、解析率，比较筛选出理想树脂。树脂预处理：将新购置的大孔吸附树脂先用蒸馏水浸泡以去除水溶性本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种牛蒡根总黄酮的提取方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤一、粉碎干燥：取牛蒡根药材粉碎成8目，并干燥保存；步骤二、乙醇提取：将干燥后的牛蒡根与乙醇溶液以1g:12～24ml的料液比，在50～70℃的温度下回流提取三次，每次3.5～4.5小时，得到提取液；步骤三、过滤浓缩：将步骤二得到的提取液过滤并合并滤液，使用旋转蒸发器对滤液进行蒸发浓缩，得到浓缩液；步骤四、石油醚萃取：使用石油醚对浓缩液脱脂处理，得到脱脂浓缩液后干燥，形成粗提物。

【技术特征摘要】
1.一种牛蒡根总黄酮的提取方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤一、粉碎干燥：取牛蒡根药材粉碎成8目，并干燥保存；步骤二、乙醇提取：将干燥后的牛蒡根与乙醇溶液以1g:12～24ml的料液比，在50～70℃的温度下回流提取三次，每次3.5～4.5小时，得到提取液；步骤三、过滤浓缩：将步骤二得到的提取液过滤并合并滤液，使用旋转蒸发器对滤液进行蒸发浓缩，得到浓缩液；步骤四、石油醚萃取：使用石油醚对浓缩液脱脂处理，得到脱脂浓缩液后干燥，形成粗提物。2.如权利要求1所述的一种牛蒡根总黄酮的提取方法，其特征在于，还包括：步骤五、分离纯化：将步骤四制备的粗提物制备成0.01g/mL的牛蒡根总黄酮水溶液，将大孔树脂置于牛蒡根总黄酮水溶液中，且放入恒温振荡器中静态吸附1-4h，得到初步纯化的牛蒡根总黄酮。3.如权利要求2所述的一种牛蒡根总黄酮的提取方法，其特征在于，所述步...

【专利技术属性】
技术研发人员：李瑾，王露，王媚，赵鹏，赵维莉，
申请(专利权)人：陕西中医药大学，西安高德威尔生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：陕西,61