一种乳腺癌易感基因BRCA1和BRCA2全基因捕获引物、试剂盒及其方法技术

本发明专利技术提供了一种用于HER‑2基因拷贝数扩增检测的核苷酸序列、试剂盒及其应用，包含扩增BRCA1(Gene ID:672)基因全长的8对PCR扩增引物；扩增BRCA2(Gene ID:675)基因全长的8对PCR扩增引物，扩增捕获的DNA可用于后续的高通量测序分析。相比于探针靶向捕获技术和多重PCR技术，该方法操作简单，成本低，测序数据均一性好，较少的测序数据量即可达到99％以上的覆盖度，有助于为乳腺癌易感基因相关的遗传性肿瘤风险评估或用药以及数据库的建立提供基因检测技术支持。

A full gene capture primer, kit and method for BRCA1 and BRCA2 gene of breast cancer

The invention provides a 2 gene copy number detection of nucleotide sequence, kit and application for HER, including amplification of BRCA1 (Gene ID:672) amplified 8 pairs of primers of PCR gene amplification; BRCA2 (Gene ID:675) amplified 8 pairs of primers of PCR gene amplification, DNA analysis can be used to capture high throughput sequencing follow-up. Compared to the probe target capture technology and multi PCR technology, this method has the advantages of simple operation, low cost, good uniformity of sequencing data, the sequencing data less coverage can reach more than 99%, providing technical support to help build genetic testing for breast cancer susceptibility gene related to hereditary cancer risk assessment or treatment and database.

【技术实现步骤摘要】
一种乳腺癌易感基因BRCA1和BRCA2全基因捕获引物、试剂盒及其方法
本专利技术属于基因检测
，具体涉及一种乳腺癌易感基因BRCA1和BRCA2全基因捕获引物、试剂盒及其应用。
技术介绍
BRCA1和BRCA2均属于抑癌基因，是乳腺癌和卵巢癌易感相关的两个基因，主要参与DNA损伤修复。BRCA1和BRCA2与同源重组、DNA损伤修复、胚胎生长、转录调控有关。BRCA1和BRCA2基因突变是大多数常染色体显性家族遗传性乳腺癌、卵巢癌发病的原因，尤其是BRCA2基因突变和男性乳腺癌关系更为密切。BRCA基因突变携带者的乳腺终生患癌危险度显著升高，且易早年发病。乳腺癌是妇女最常见的恶性肿瘤，2007年全球有130万乳腺癌新发患者，超过46万的患者死于乳腺癌。中国近年乳腺癌发病率高居女性恶性肿瘤的首位，并以3％以上的速度逐年递增，估计全国每年有4万多妇女死于此病。其发病机制主要归纳为遗传易感性、内分泌失调、通过哺乳传染病毒颗粒等。约5％的乳腺癌是由基因突变引起，其中肿瘤抑制基因BRCA1和BRCA2与乳腺癌发病的关系较为密切，BRCA1突变者40岁前发生乳腺癌概率高达19％。BRCA本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种扩增乳腺癌易感基因BRCA1和BRCA2全基因的引物，其特征在于，包括以下核酸序列：(1)扩增BRCA1基因全长的引物对，其核苷酸序列SEQ ID NO.：1～16所示；(2)扩增BRCA2基因全长的引物对，其核苷酸序列SEQ ID NO.：17～32所示；上述引物在一次检测中共同使用。

【技术特征摘要】
1.一种扩增乳腺癌易感基因BRCA1和BRCA2全基因的引物，其特征在于，包括以下核酸序列：(1)扩增BRCA1基因全长的引物对，其核苷酸序列SEQIDNO.：1～16所示；(2)扩增BRCA2基因全长的引物对，其核苷酸序列SEQIDNO.：17～32所示；上述引物在一次检测中共同使用。2.一种乳腺癌易感基因BRCA1和BRCA2全基因捕获试剂盒，其特征在于，包含权利要求1所述的扩增乳腺癌易感基因BRCA1和BRCA2全基因的引物，PCR扩增的缓冲液，酶，dNTP。3.一种乳腺癌易感基因BRCA1和BRCA2全基因捕获的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)提取人外周血基因组DNA；(2)以提取的人外周血基因组DNA为模板、权利要求1中的引物、PCR扩增缓冲液，酶，dNTP，进行捕获BRCA1全基因的8个PCR扩增反应和捕获BRCA2全基因的8个扩增反应；(3)采用1％的琼脂糖凝胶进行电泳检测，判定PCR扩增是否成功。4.根据权利要求3所述的乳腺癌易感基因B...

【专利技术属性】
技术研发人员：任绪义，张锋，周韵，王裕舟，赵铃铃，
申请(专利权)人：杭州迪安医学检验中心有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江,33