用于核酸合成和扩增的组合物、 方法和试剂盒技术
Compositions, methods and kits for the synthesis and amplification of nucleic acids
The invention relates to a composition, method and kit for the synthesis of nucleic acid molecules. More specifically, provides compositions, methods and kits for amplification of nucleic acid molecules in a single step RT PCR method, which comprises one or more reagents for enhanced tolerance to PCR inhibitor.
【技术实现步骤摘要】
用于核酸合成和扩增的组合物、方法和试剂盒本申请是201180037898.4的分案申请。相关申请的交叉参考:本申请根据35U.S.C.§119(e)要求2010年6月21日提交的美国临时专利申请号61/357,021和2011年3月25日提交的美国临时专利申请号61/467,852的优先权的利益，将所述美国临时专利申请通过引用整体并入本文。领域:本公开内容涉及用于合成核酸的组合物、方法和试剂盒。更具体地，提供了用于在单步RT-PCR法中扩增核酸分子的组合物、方法和试剂盒，其包括一种或多种用于增强对PCR抑制剂的耐受性的试剂。背景:核酸的检测、分析、转录和扩增是现代分子生物学中最重要的方法中的一些方法。此类方法用于核酸分析的应用在基因表达的研究、感染性试剂或遗传疾病的诊断、cDNA的产生和逆转录病毒的分析等等应用中特别重要。逆转录RNA，随后通过聚合酶链式反应(PCR)进行cDNA扩增，通常称为RT-PCR或RNA-PCR，已被广泛用于检测和定量核酸靶并且对于病毒基因分析特别重要。致癌病毒及其在癌症的病理发生中的作用的研究可在癌症的诊断和治疗中具有重要意义。然而，致癌...
【技术保护点】
用于RT‑PCR的组合物，其包含：至少一种热稳定性DNA聚合酶，至少一种热稳定性逆转录酶(RT)，和鱼胶，其中相对于不含任何PCR抑制剂阻断剂的组合物，所述鱼胶增强对一种或多种PCR抑制剂的耐受性并且降低Ct；其中所述PCR抑制剂选自血色素、腐殖酸和肝素。
【技术特征摘要】
2010.06.21 US 61/357,021;2011.03.25 US 61/467,8521.用于RT-PCR的组合物，其包含：至少一种热稳定性DNA聚合酶，至少一种热稳定性逆转录酶(RT)，和鱼胶，其中相对于不含任何PCR抑制剂阻断剂的组合物，所述鱼胶增强对一种或多种PCR抑制剂的耐受性并且降低Ct；其中所述PCR抑制剂选自血色素、腐殖酸和肝素。2.权利要求1的组合物，其中所述热稳定性逆转录酶为M-MLV逆转录酶或其突变体、变体或衍生物。3.权利要求2的组合物，其中所述MMLVRT包含选自Y64、R116、D124、H126、Y133、K152、Q190、T197、H204、V223、M289、T306和F309的一个或多个突变。4.权利要求1的组合物，其中所述热稳定性DNA聚合酶为TaqDNA聚合酶或其突变体、变体或衍生物。5.权利要求1的组合物，其中所述组合物在-20℃为液体或凝胶。6.权利要求1的组合物，其中所述组合物在-20℃不为固体。7.权利要求1的组合物，其中所述组合物在-20℃不冻结。8.权利要求1的组合物，其中当贮存于-20℃时，所述组合物在使用之前不需要解冻。9.权利要求1的组合物，还包含一种或多种核苷酸(dNTP)。10.权利要求9的组合物，其中所述核苷酸选自dTTP、dATP、dCTP、dGTP或dUTP。11.权利要求9的组合物，其中所述核苷酸的每一种的浓度为约0.5mM至5mM。12.权利要求1的组合物，还...
【专利技术属性】
技术研发人员：C·胡，J·伯克曼，P·严，
申请(专利权)人：生命技术公司，
类型：发明
国别省市：美国,US
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