一种同步检测5种动物源性成分的多重PCR方法及试剂盒技术

本发明专利技术公开了一种同步检测5种动物源性成分的多重PCR方法，该方法包括如下步骤：提取待检动物组织的DNA，并对其进行多重PCR扩增；对多重PCR的产物进行凝胶电泳分析，根据PCR产物条带大小和有无判定样品中是否含有5种动物源性成分。本发明专利技术的同步鉴定五种动物源性成分的PCR方法具有操作简单、特异性强、灵敏度高、节约成本和检测时间等优点，较常规PCR可实现对五种动物源性成分的同时检测，为有效鉴别肉制品的真假提供技术支撑。

【技术实现步骤摘要】
一种同步检测5种动物源性成分的多重PCR方法及试剂盒
本专利技术涉及肉制品分子生物学鉴定
，具体的说涉及一种同步检测5种动物源性成分的多重PCR方法及试剂盒。
技术介绍
由于掺假产品中使用大量调味剂及调色剂，仅从产品的色泽和气味上，通过传统感官判断很难对食品中是否添加其他动物源性成分进行判断。为了严格进行食品安全监管，严厉打击食品中肉类产品掺假售假等违法行为，开发食品中动物源性成分来源鉴别和追溯技术显得尤为重要。动物源性成分的检测是一种重要的识别掺假的手段，有利于维护消费者利益，保障人民生命安全，避免假冒伪劣食品的出现，为打击此类违法行为提供技术支撑，也有利于肉类产业的健康发展。同时，鉴别动物源性成分对于解决某些因食品问题引起的民族矛盾和纠纷都十分重要。因此，建立快速、准确的食品中动物源性成分检测方法已经成为摆在科研工作者面前的重大课题。
技术实现思路
本专利技术的目的首先在于提供一种同步检测5种动物源性成分的多重PCR方法及试剂盒，该方法包括如下步骤：(1)提取待检动物组织的DNA，并对其进行多重PCR扩增，PCR反应体系为：5×PCRBuffer10μL，dNTPMix0.2m本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种同步检测5种动物源性成分的多重PCR方法，其特征在于该方法包括如下步骤(1)提取待检动物组织的DNA，并对其进行多重PCR扩增，PCR反应体系为：5×PCR Buffer 10μL，dNTP Mix 0.2mmol/L，Taq DNA聚合酶2.5U，MgCl2 2mmol/L，引物配比为牛：羊：鸡：猪：鸭＝2:1:1:1:0.5，用dd H2O补足体系至50μL。最终反应体系中牛、羊、鸡、猪和鸭的正、反引物浓度分别为1mmol/L，0.5mmol/L，0.5mmol/L，0.5mmol/L和0.25mmol/L。多重PCR反应程序如下：94℃预变性5min；94℃变性40s，55℃退火30...

【技术特征摘要】
1.一种同步检测5种动物源性成分的多重PCR方法，其特征在于该方法包括如下步骤(1)提取待检动物组织的DNA，并对其进行多重PCR扩增，PCR反应体系为：5×PCRBuffer10μL，dNTPMix0.2mmol/L，TaqDNA聚合酶2.5U，MgCl22mmol/L，引物配比为牛：羊：鸡：猪：鸭＝2:1:1:1:0.5，用ddH2O补足体系至50μL。最终反应体系中牛、羊、鸡、猪和鸭的正、反引物浓度分别为1mmol/L，0.5mmol/L，0.5mmol/L，0.5mmol/L和0.25mmol/L。多重PCR反应程序如下：94℃预变性5min；94℃变性40s，55℃退火30s，72℃延伸1min，35个循环；72℃延伸5min；(2)对多重PCR的产物进行凝胶电泳分析，根据PCR产物条带大小和有无判定样品中是否含有5种动物源性成分，其中牛、羊、鸡、猪和鸭扩增后所获目的条带大小分别为：493bp、302bp、400bp、277bp、239bp；其中所述的引物为：牛：上游引物：SEQNO.15′-tagcaattgccatagtccacc-3′下游引物：SEQNO.25′-taggatgaggagaaagtataggaca-3′；羊：上游引物：SEQNO.35′-cgccatagttcacctactcttc-3′下游引物：SEQNO.45′-ttactaggactaggattgagaggat-3′；鸡：上游引物：SEQNO.55′-cttccttcacatcggacgag-3′下游引物：SEQNO.65′-gggtgagtatgagagttaagcc-3′；猪：上游引物：SEQ...

【专利技术属性】
技术研发人员：周昌艳，赵志勇，索玉娟，赵晓燕，白冰，顾徐俊，陈磊，李晓贝，
申请(专利权)人：上海市农业科学院，上海科立特农产品检测技术服务有限公司，
类型：发明
国别省市：上海,31