用于扩增雌性乌龟雌激素受体α基因的RT‑PCR引物和方法技术

本发明专利技术公开一种用于扩增雌性乌龟雌激素受体α基因的RT‑PCR引物和方法，所述RT‑PCR引物包括SEQ ID No：1和SEQ ID No：2所示的引物对。方法包括：1)提取待扩增样品的总RNA；2)将提取的总RNA反转录成cDNA；3)采用RT‑PCR引物对cDNA进行扩增；RT‑PCR引物为上述RT‑PCR引物。本发明专利技术通过设计一组RT‑PCR引物，将待扩增样品的总RNA进行提取，再进行反转录，得到cDNA，对该cDNA用RT‑PCR引物扩增，在节约成本的前提下，即可大量地快速、准确地扩增得到雌性乌龟输卵管中的雌激素受体α基因，有效实现了对雌性乌龟雌激素受体α基因的大规模和更为直观的研究。

For the RT PCR primers and amplified the female turtle estrogen receptor alpha gene

The invention discloses a method for RT PCR primers and amplified the female turtle estrogen receptor alpha gene, the RT PCR primers including SEQ ID and SEQ No:1 ID shown by No:2 primer pairs. The method includes: 1) total RNA extracted amplified samples; 2) the extraction of total RNA reverse transcription into cDNA; 3) using RT PCR primers on cDNA were amplified; RT PCR primers for the RT PCR primer. The present invention through the design of a group of RT PCR primers, total RNA will be amplified samples were extracted, and then reverse transcription, cDNA, the cDNA RT PCR primers, under the premise of saving cost, a lot can be quickly and accurately amplified the female turtle fallopian tube in estrogen receptor alpha the effective realization of the gene, estrogen receptor alpha gene and female tortoise mass is more intuitive to study.

【技术实现步骤摘要】
用于扩增雌性乌龟雌激素受体α基因的RT-PCR引物和方法
本专利技术涉及分子生物学研究领域，具体地，涉及用于扩增雌性乌龟雌激素受体α基因的RT-PCR引物和方法。
技术介绍
乌龟(Chinemysreevesii)隶属于爬行纲、龟鳖目、淡水龟科、乌龟属。乌龟有较高的药用和营养价值，深受人们的喜爱。近几十年来，人为经济活动不断加剧，龟类赖以生存的生态环境受到严重破坏，加之对野生乌龟的过度捕捞、生境破坏、化学污染以及河流建坝导致其生活水域的片断化、岛屿化，已经使野生乌龟的数量急剧下降，野生物种有面临灭绝的危险。可见，对乌龟的野生种群保护已经迫在眉睫。随着野生种群日益稀少，乌龟的人工养殖规模却在不断扩大；自上世纪80年代以来，随着科学研究和养殖技术的不断发展，我国乌龟养殖得到了空前的发展，养殖产量居世界之首。而在乌龟育种的过程中，雌性乌龟输卵管激素的变化影响了雌雄交配后雄性乌龟的精子在雌性乌龟输卵管中的储存，为精子能够在雌性输卵管中储存提供了有利条件。因此，研究雌性乌龟输卵管激素水平的变化，可以更好的了解乌龟在养殖过程中遇到的繁殖与交配问题。而以往的报道中未曾有过关于雌性乌龟雌激素受体α基本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于扩增雌性乌龟雌激素受体α基因的RT‑PCR引物，其特征在于，所述RT‑PCR引物包括SEQ ID No：1和SEQ ID No：2所示的引物对。

【技术特征摘要】
1.一种用于扩增雌性乌龟雌激素受体α基因的RT-PCR引物，其特征在于，所述RT-PCR引物包括SEQIDNo：1和SEQIDNo：2所示的引物对。2.一种利用RT-PCR引物扩增雌性乌龟雌激素受体α基因的方法，其特征在于，所述方法包括：1)提取待扩增样品的总RNA；2)将步骤1)中提取的总RNA反转录成cDNA；3)采用RT-PCR引物对步骤2)中反转录的cDNA进行扩增；其中，所述RT-PCR引物为权利要求1中所述的RT-PCR引物。3.根据权利要求2所述的方法，其中，所述扩增过程为普通PCR扩增，且以12.5μL的PCR扩增体系为基准，每条引物的浓度分别为0.01-0.03pmol/L，cDNA模板的用量为30-80ng。4.根据权利要求2所述的方法，其中，所述扩增过程为RT-PCR扩增，且以20μL的RT-PCR扩增体系为基准，每条引物的浓度分别为0.0...

【专利技术属性】
技术研发人员：卜兴江，陆文康，何可欣，王湘林，
申请(专利权)人：安徽师范大学，
类型：发明
国别省市：安徽,34