一种抗前列腺癌干细胞抗原单链抗体融合蛋白的制备方法技术

本发明专利技术涉及单链抗体制作技术领域，尤其是一种抗前列腺癌干细胞抗原单链抗体融合蛋白的制备方法，具体涉及到分泌抗前列腺癌干细胞PSCA单链抗体的原核表达载体的构建、表达及应用，所述的抗前列腺癌干细胞抗原特异单链抗体‑碱性磷酸酶融合蛋白PaFv，形式为scFv‑AP，使用方便不需要添加酶标二抗，它即具有抗体的特异性结合抗原、又具有酶活性直接使底物显色的功能，而且此产品结构稳定，可用工程菌发酵生产。

【技术实现步骤摘要】
一种抗前列腺癌干细胞抗原单链抗体融合蛋白的制备方法
本专利技术涉及单链抗体制作
，尤其是一种抗前列腺癌干细胞抗原单链抗体融合蛋白的制备方法，具体是一种分泌抗前列腺癌干细胞PSCA单链抗体的原核表达载体的构建、表达及应用，所述的抗前列腺癌干细胞抗原特异单链抗体-碱性磷酸酶融合蛋白PaFv，形式为scFv-AP，使用方便不需要添加酶标二抗，它即具有抗体的特异性结合抗原、又具有酶活性直接使底物显色的功能，而且此产品结构稳定，可用工程菌发酵生产。
技术介绍
前列腺癌是目前全球发病率较高的新发恶性肿瘤，其发病率居第二位，患病现象具有明显的地理以及种族差异，在欧美等发达国家中则是位于第一位，在亚非等发展中国家，其发病率虽然低于欧美国家，但是近年来的调查表明，随着平均年龄的增加以及生活方式的改变，主要是饮食结构的改变，前列腺癌在发展中国家的发病率也呈现迅速上升的趋势。在我国，前列腺癌在泌尿生殖系统恶性肿瘤的患病率已经从第三位跃居首位，成为危害我国男性健康的重要疾病。随着分子生物学研究的迅速发展，对大多数肿瘤的发生和发展，在分子水平和细胞水平的变化上，人们有了更深的认识前列腺癌的持续和扩散依赖本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种抗前列腺癌干细胞抗原单链抗体融合蛋白的制备方法，其特征在于：根据大肠杆菌的密码子偏爱性进行碱基优化，合成抗PSCA的单链抗体基因PaFv；构建重组表达载体pDAP2/S‑PaFv，转入至大肠杆菌XL1‑Blue中，获得PaFv‑XL1菌种；蛋白的原核表达，His标签分离纯化目的蛋白，制备12％分离胶点样进行SDS‑PAGE，Western Blot鉴定目的蛋白，并用ELISA检测PaFv单链抗体活性。

【技术特征摘要】
1.一种抗前列腺癌干细胞抗原单链抗体融合蛋白的制备方法，其特征在于：根据大肠杆菌的密码子偏爱性进行碱基优化，合成抗PSCA的单链抗体基因PaFv；构建重组表达载体pDAP2/S-PaFv，转入至大肠杆菌XL1-Blue中，获得PaFv-XL1菌种；蛋白的原核表达，His标签分...

【专利技术属性】
技术研发人员：胡祖权，夏雪，曾柱，
申请(专利权)人：贵州医科大学，
类型：发明
国别省市：贵州,52