靶向人EpCAM的基因工程化淋巴细胞及其制备方法和用途技术

本发明专利技术涉及基因工程领域，具体涉及靶向人EpCAM的基因工程化淋巴细胞及其制备方法和用途。本发明专利技术要解决的技术问题是为肿瘤的免疫治疗提供新的有效手段。本发明专利技术解决技术问题的技术方案首先是提供了一种能够识别人EpCAM的单链抗体；含有该单链抗体的嵌合型抗原受体(CAR)；携带该嵌合抗原受体的载体；以及该嵌合抗原受体修饰的淋巴细胞。本发明专利技术EpCAM靶向嵌合抗原受体修饰的淋巴细胞在特异识别过表达EpCAM的肿瘤细胞后，可以通过细胞因子的释放及细胞毒效应发挥抗肿瘤作用；其在体内可以显著抑制肿瘤的肿瘤形成、肿瘤生长及肺部转移，具有好的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
靶向人EpCAM的基因工程化淋巴细胞及其制备方法和用途
本专利技术涉及基因工程领域，具体涉及靶向人EpCAM的基因工程化淋巴细胞及其制备方法和用途。
技术介绍
在细胞免疫过程中，T淋巴细胞扮演着主要的角色。T细胞所介导的细胞免疫主要是通过T细胞受体(Tcellreceptor，TCR)特异识别细胞表面由主要组织相容性复合物(MHC)所展示的抗原肽，进而激活T细胞胞内信号，对该靶细胞进行特异杀伤。这对及时清除体内病变的细胞以及预防肿瘤的发生起着至关重要的作用。肿瘤能够通过多种途径逃避免疫系统的监视而产生免疫逃逸，使得肿瘤细胞能够在体内生存从而发生肿瘤。但是，在肿瘤病人体内，仍然有少部分免疫细胞能够识别并杀伤肿瘤。该类免疫细胞能够浸润到肿瘤组织中发挥杀伤功能，因此，通常称这类免疫细胞为肿瘤浸润性淋巴细胞(tumorinfiltratinglymphocyte，TIL)。TIL能够表达特异识别肿瘤抗原的TCR,进而可以靶向肿瘤细胞，发挥杀伤活性。目前，国内外已经利用TIL进行临床肿瘤治疗并取得了一定的成效。然而，由于自身的特点，TIL的临床应用有一定的局限性。首先，TIL的分离有一定的难度本文档来自技高网...

【技术保护点】
单链抗体ScFv，该单链抗体能够识别人EpCAM，是通过串联针对EpCAM的抗体轻链、重链可变区而得。

【技术特征摘要】
2016.08.12 CN 20161066294101.单链抗体ScFv，该单链抗体能够识别人EpCAM，是通过串联针对EpCAM的抗体轻链、重链可变区而得。2.根据权利要求1所述的单链抗体，其特征在于：所述单链抗体ScFv的氨基酸序列如SEQIDNO:1所示。3.编码权利要求1或2所述的单链抗体ScFv的基因。4.根据权利要求3所述的基因，其征在于：该编码基因的核苷酸序列如SEQIDNO:2所示。5.一种嵌合型抗原受体，其特征在于：该嵌合型抗原受体是通过氮端到碳端依次联接权利要求1或2任一项所述的抗EpCAM单链抗体、CD8α链的铰链区和跨膜区与CD28胞内段、4-1BB胞内段、CD3ζ链得到的。6.根据权利要求5所述的嵌合型抗原受体，其特征在于：氨基酸序列如SEQIDNO:3所示。7.根据权利要求5所述的嵌合型抗原受体，其特征在于：该嵌合型抗原受体是通过氮端到碳端顺次联接信号肽、权利要求1或2任一项所述的抗EpCAM单链抗体、CD8α链的铰链区和跨膜区与CD28胞内段、4-1BB胞内段、CD3ζ链得到的。8.根据权利要求7所述的嵌合型抗原受体，其特征在于：氨基酸序列如SEQIDNO:4所示。9.编码权利要求5或6所述的嵌合型抗原受体的基因。10.根据权利要求9所的编码基因，其特征在于：具有如SEQIDNO:5所示的核苷酸序列。11.编码权利要求7或8所述的嵌合型抗原受体的基因。12.根据权利要求11所的编码基因，其特征在于：具有如SEQIDNO:6所示的核苷酸序列。13.含有权利要求9...

【专利技术属性】
技术研发人员：魏于全，王永生，王玮，张炳兰，郭福春，
申请(专利权)人：四川大学，
类型：发明
国别省市：四川,51