京尼平类似物、制备方法及其应用技术

本发明专利技术涉及药物化学领域，具体涉及一类京尼平类似物(I)及其药用盐、制备方法和含有他们的药物组合物，药效学试验证明本发明专利技术的化合物可以用于预防和治疗老年痴呆等神经退行性疾病。

【技术实现步骤摘要】
京尼平类似物、制备方法及其应用
本专利技术涉及药物化学领域，具体涉及一类京尼平类似物及其药用盐、制备方法和含有他们的药物组合物，用于预防和治疗老年痴呆等神经退行性疾病。
技术介绍
阿尔兹海默病(Alzheimers'disease,AD)，又称老年性痴呆，是一种伴有认知、行为和功能失常的进行性神经变性疾病，是老年人最常见的一种大脑退行性变性病。目前临床上用于治疗AD的药物主要为两种类型：一类是乙酰胆碱酯酶(AchE)抑制剂如多奈哌齐、利凡斯的明和加兰他敏(参见PepeuG,GiovanniniMG.Cholinesteraseinhibitorsandbeyond[J].Curr.Alzheimer.Res.2009,6(2):86-96)，另一类是N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDAR)拮抗剂如美金刚(参见HellwegR,WirthY,JanetzkyW,etal.EfficacyofmemantineindelayingclinicalworseninginAlzheimer'sdisease(AD):responderanalysesofnineclinicaltrialswithpatientswithmoderatetosevereAD[J].Int.J.Geriatr.Psych.2012,27(6):651-656.)。由于阿尔兹海默病的病因复杂，机制还不完全清楚，目前临床上使用的药物只能部分改善症状，而不是延缓或停止神经变性的进展。因此，进一步和寻找有效的治疗药物仍是科研人员面临的挑战。天然产物具有结构丰富，生物活性多样的特点，是先导化合物的重要来源。栀子作为传统中药，很早就被用于益智开窍、缓解老年痴呆症等(参见李欢,潘林梅,朱华旭.黄连解毒汤对老年痴呆症的药效学研究综述[J].现代中药研究与实践,2010,24(4):86-89)。京尼平是栀子的主要药效成分，属环烯醚萜类化合物。现代药理研究表明，京尼平及其糖苷具有抗炎、抗血小板聚集，抗癌、降血糖、增强和改善学习能力等作用(参见RyotaA,YosukeH,TakeshiY.Genipinattenuateslipopolysaccharide-inducedpersistentchangesofemotionalbehaviorsandneuralactivationinthehypothalamicparaventricularnucleusandthecentralamygdalanucleus[J].EurJPharmacol,2014,741(15):1-7；Q.S.Wang,J.S.Tiana,Y.L.Cui,etal.Genipinisactiveviamodulatingmonoaminergictransmissionandlevelsofbrain-derivedneurotrophicfactor(BDNF)inratmodelofdepression[J].Neuroscience,2014,275(5):365-373)。但京尼平血药浓度低、结构不稳定，易与甘氨酸结合而生成栀子蓝，会导致肝肾毒性的产生，从而影响了其实际应用(参见HouYC,TsaiSY,LaiPY,etal.Metabolismandpharmacokineticsofgenipinandgeniposideinrats[J].Food.Chem.Toxicol.,2008,46(8):2764-2769；KawataY,HattoriM,AkaoT,etal.Formationofnitrogen-containingmetabolitesfromgeniposideandgardenosidebyhumanintestinalbacteria[J].Planta.Med.,1991,57(6):536-542.)。通过1位的结构修饰，会提高化合物的稳定性，例如1-异丙氧基京尼平。
技术实现思路
本专利技术以京尼平为先导化合物，将10位醇羟基以芳基亚甲基哌嗪基取代，设计并合成了一系列京尼平衍生物。活性筛选发现，本专利技术化合物具有显著的乙酰胆碱酯酶抑制作用，优于阳性对照药多奈哌齐、京尼平和1-异丙氧基京尼平，具有一定的药用前景。本专利技术化合物结构式如下：其中X代表CH或N；Y代表CH或N；R1代表CH3或i-Pr；R2为任意取代的H、C1～C6的烷基、卤素、甲氧基、三氟甲基或硝基。本专利技术优选如下任一结构的化合物：本专利技术还公开了化合物的制备方法，以化合物YH15为例，制备方法包括：其他化合物可选用对应的原料用类似方法制备得到。本专利技术化合物药学上可接受的盐具有与化合物同样的药效学活性。本专利技术还公开了一种药物组合物，其中含有本专利技术的化合物或其药用盐和药学上可接受载体。所述药物组合物可以是普通片剂或胶囊、缓释片剂胶囊、控释片剂或胶囊、口服液、注射剂等制剂学上常规的制剂形式。一般地，本专利技术的化合物用于治疗时，人用剂量范围为1mg～1000mg/天。也可根据剂型的不同和疾病严重程度，使用剂量超出该范围。下面是本专利技术部分化合物药效学试验和结果：实验一体外AChE抑制实验：采用Ellman分光光度法在体外考察京尼平类似物对大鼠纹状体内乙酰胆碱酶的抑制作用，同时用空白组，京尼平、多奈哌齐为阳性对照组进行实验。配置0.05mol/L磷酸缓冲液pH为7.2，底物硫代乙酰胆碱的浓度为5mmol/L，显色剂5,5-二硫双硝基苯甲酸(DTNB)的浓度为1mmol/L，京尼平类似物以PBS溶剂溶解，按1:2进行一系列倍倍稀释(浓度分别为2.00×10-5,1.00×10-5,5.00×10-6,2.50×10-6,1.25×10-6,6.25×10-7,3.13×10-7,1.56×10-7,7.81×10-8,3.91×10-8,1.95×10-8,9.77×10-9mol/L)，用以筛选活性。如果有活性，可根据系列浓度的活性抑制作用确定IC50值。在96孔板中用移液枪分别加入100μL的待测化合物和20μL酶，轻摇混匀后在37℃恒温烘箱中孵育10分钟，取出后再分别加入40μL硫代乙酰胆碱底物，然后将其放于37℃恒温烘箱中继续孵育20分钟，而后加入40μL显色剂DTNB，轻摇混匀；用酶标仪于412nm下测其各吸光度。然后以抑制率I(I＝[1-(A测-A空)/(A标-A空)]×100％)对抑制剂浓度C作图，进行S型曲线线性拟合，求出IC50值。本专利技术化合物对乙酰胆碱酯酶的抑制活性见表1。表1京尼平类似物对乙酰胆碱酯酶抑制活性体外AChE抑制活性实验表明，本专利技术化合物均有一定的体外抑制乙酰胆碱酯酶的活性，优于京尼平和1-异丙氧基京尼平，化合物YH12的活性强于阳性对照药多奈哌齐。实验二对Aβ1-42诱导的PC12细胞损伤的保护作用取对数生长期PC12(低中分化型)细胞以10000个/孔接种于96孔培养板，培养24h后，移弃原培养液并更换低血清培养液，加神经生长因子(NGF，终浓度为50μg/L)，继续孵育约96h备用。于上述96孔板中加入Amyloidβ-protein(1-42)致PC12细胞损伤，Amyloidβ-protein终浓度为25μg/ml，约30min后，加本文档来自技高网...

【技术保护点】
通式(I)的化合物或其药学上可接受的盐：

【技术特征摘要】
1.通式(I)的化合物或其药学上可接受的盐：其中X代表CH或N；Y代表CH或N；R1代表CH3或i-Pr；R2为任意取代的H、C1～C6的烷基、卤素、甲氧基、三氟甲基或硝基。2.权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐，是下列任一结构的化合物：3.权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐，其中所述的药学上可接受的盐是通式(I)化合物的盐酸盐、硫酸盐、磷...

【专利技术属性】
技术研发人员：李家明，何广卫，黄伟军，马晓东，王杰，王玉骏，张艳春，储昭兴，许勤龙，莫佳佳，
申请(专利权)人：安徽中医药大学，合肥医工医药有限公司，
类型：发明
国别省市：安徽,34