一种树突状细胞的高效促成熟方法及其用途技术

本发明专利技术提供一种树突状细胞的高效促成熟方法及其用途。具体而言，本发明专利技术提供一种用于刺激树突状细胞的组合物，该组合物含有poly(I:C)、R848、IFN‑γ和ATP中的至少2种、至少3种或全部4种。本发明专利技术还提供含该组合物的培养液，及使用该组合物刺激树突状细胞或使用该培养液培养树突状细胞的方法。通过本发明专利技术获得的成熟DC，能高水平表达CD80、CD86及CD83表面分子标记，同时能够高水平分泌的IL‑12，有助于提高DC更有效地诱导肿瘤特异性T细胞的活化，从而提高癌症治疗效果。

【技术实现步骤摘要】
一种树突状细胞的高效促成熟方法及其用途
本专利技术属于细胞生物学、肿瘤免疫学领域，涉及一种人类树突状细胞的高效促成熟方法及其用途。
技术介绍
树突状细胞(Dendriticcells,DC)是目前被广泛认可的抗原递呈功能最强的专职抗原递呈细胞(antigenpresentingcell，APC)。通过识别肿瘤细胞的抗原，增强肿瘤细胞的免疫原性而有效避免免疫逃逸。DC通过受体配体的方式摄取外源性抗原，加工处理后，可分别与抗原表面表达的MHC限制性分子结合，分化为成熟DC，同时刺激初始T细胞方向特异性的活化为CD8+T细胞或CD4+T细胞，成熟DC具有很强的诱导初始T细胞活化，进而激活免疫应答的功能，是固有免疫中巨噬细胞和适应性免疫中B细胞功能的100～1000倍。此外，DC还可以激活体液免疫应答，通过不同的方式刺激B细胞活化、增殖发挥免疫效应。目前应用于肿瘤的免疫细胞治疗有：免疫检查点单抗治疗，包括CTLA-4单抗与PD-1/PDL1单抗、DC-CIK/CTL细胞治疗与CAR-T细胞治疗。CTL通过细胞表面的TCR识别抗原表面的MHC-I类分子而结合特异性抗原，发挥短期内持久的，快速高本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于刺激树突状细胞的组合物，该组合物含有poly(I:C)、R848、IFN‑γ和ATP中的至少2种、至少3种或全部4种。

【技术特征摘要】
1.一种用于刺激树突状细胞的组合物，该组合物含有poly(I:C)、R848、IFN-γ和ATP中的至少2种、至少3种或全部4种。2.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述组合物含有：(1)poly(I:C)和R848中的任一种或全部2种；和(2)IFN-γ和ATP中的任一种或全部2种；优选地，所述组合物含有poly(I:C)和任选的R848，以及IFN-γ和任选的ATP；或者优选地，所述组合物含有R848和任选的poly(I:C)，以及IFN-γ和任选的ATP；或者优选地，所述组合物含有poly(I:C)、R848和IFN-γ和任选的ATP；或者优选地，所述组合物含有poly(I:C)、IFN-γ、ATP和任选的R848。3.如权利要求1或2所述的组合物，其特征在于，当含有时，所述组合物中poly(I:C)的含量足以使其工作浓度在1-200μg/ml的范围内，例如1-150μg/ml，1-120μg/ml，1-100μg/ml，1-80μg/ml，1-50μg/ml，5-50μg/ml，10-50μg/ml，15-40μg/ml，或20-40μg/ml；当含有时，所述组合物中R848的含量足以使其工作浓度在0.1-50μg/ml的范围内，例如0.1-30μg/ml，0.1-20μg/ml，0.1-10μg/ml，1-30μg/ml，1-20μg/ml，1-10μg/ml或3-8μg/ml；当含有时，所述组合物中IFN-γ的含量足以使其工作浓度在1-1000IU/ml的范围内，例如1-600IU/ml，1-500IU/ml，1-300IU/ml，10-300IU/ml，30-300IU/ml，50-200IU/ml，50-150IU/ml或80-120IU/ml；当含有时，所述组合物中ATP的含量足以使其工作浓度在0.1-10mM的范围内，例如0.1-8mM，0.1-5mM，0.1-3mM或0.5-3mM。4.如权利要求1－3中任一项所述的组合物，其特征在于，所述组合物含有：(1)poly(I:C)，其含量应足以使其工作浓度在1-80μg/ml的范围内，优选10-50μg/ml，更优选15-40μg/ml；(2)IFN-γ，其含量应足以使其工作浓度在10-300IU/ml的范围内，优选50-150IU/ml，更优选80-120IU/ml；(3)任选的R848，当含有时，其含量应足以使其工作浓度在0.1-10μg/ml的范围内，优选1-10μg/ml，更优选3-8μg/ml；以及(4)任选的ATP，当含有时，其含量应足以使其工作浓度在0.1-5mM的范围内，优选0.5-2mM，更优选0.5-1.5mM；或所述组合物含有：(1)poly(I:C)，其含量应足以使其工作浓度在1-80μg/ml的范围内，优选10-50μg/ml，更优选15-40μg/ml；(2)IFN-γ，其含量应足以使其工作浓度在10-300IU/ml的范围内，优选50-150IU/ml，更优选80-120IU/ml；(3)R848，其含量应足以使其工作浓度在0.1-10μg/ml的范围内，优选1-10μg/ml，更优选3-8μg/ml；以及(4)任选的ATP，当含有时，其含量应足以使其工作浓度在0.1-5mM的范围内，优选0.5-2mM，更优选0.5-1.5mM；或所述组合物含有：(1)poly(I:C)，其含量应足以使其工作浓度在1-80μg/ml的范围内，优选10-50μg/ml，更优选15-40μg/ml；(2)IFN-γ，其含量应足以使其工作浓度在10-300IU/ml的范围内，优选50-150IU/ml，更优选80-120IU/ml；(3)ATP，其含量应足以使其工作浓度在0.1-5mM的范围内，优选0.5-2mM，更优选0.5-1.5mM；以及(4)任选的R848，当含有时，其含量应足以使其工作浓度在0.1-10μg/ml的范围内，优选1-10μg/ml，更优选3-8μg/ml；或所述组合物含有：(1)R848，其含量应足以使其工作浓度在0.1-10μg/ml的范围内，优选1-10μg/ml，更优选3-8μg/ml；(2)IFN-γ，其含量应足以使其工作浓度在10-300IU/ml的范围内，优选50-150IU/ml，更优选80-120IU/ml；(3)任选的poly(I:C)，当含有时，其含量应足以使其工作浓度在1-80μg/ml的范围内，优选10-50μg/ml，更优选15-40μg/ml；和(4)任选的ATP，当含有时，其含量应足以使其工作浓度在0.1-5mM的范...

【专利技术属性】
技术研发人员：钱其军，金华君，马宜东，王颖，孙艳，李林芳，操跃，程静波，黄柳柳，
申请(专利权)人：上海细胞治疗研究院，上海细胞治疗工程技术研究中心集团有限公司，
类型：发明
国别省市：上海,31