The invention discloses a preparation method of in vitro semi mature dendritic cells, bone marrow cells were collected for specific suspension, cracking, centrifugation, cells were resuspended in RPMI? 1640 complete medium, adding 10-20 g/L? RmGM-CSF, 2.5-10 g/L and 1-5mg/L rmIL-4?? Jagged-1/Fc, incubation, collection of loose stickers the cells, cells with complete medium heavy suspension, adding dose of rmGM-CSF, rmIL-4 and Jagged-1/Fc, from loose adherent cells, the 6-8d with half dose rmGM-CSF and rmIL-4 dose of Jagged-1/Fc, the 10-12d harvest loose adherent cells, namely semi-mature DCsJagged-1?. This cell, treated only with Jagged-1/Fc, can reduce the ability of allogeneic lymphocyte immune responses to induce immune tolerance.
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物学和医学
，特别涉及一种半成熟树突状细胞的制备方法。
技术介绍
树突状细胞(DCs)是构成机体细胞免疫的两大核心之一，不同树突状细胞亚型指导不同效应性T细胞的分化，从而决定着机体免疫系统在识别外来抗原中行使免疫应答抑或免疫耐受两种截然不同的功能。大量研究已证明不成熟树突状细胞(iDCs)，完全成熟树突状细胞(mDCs)和半成熟树突状细胞(semi-mature DCs)在介导机体免疫系统行使免疫耐受还是免疫应答中起着完全不同的决定性作用。从解决组织、器官移植排斥和治疗自身免疫性疾病的目的出发，人们正在不懈地努力以寻找具有诱导机体免疫耐受的半成熟树突状细胞。因此，其理论意义和临床应用价值显而易见。最新报道，采用不同方法制备的半成熟树突状细胞具有不同的特性，因而有充分理由推测它们所诱导机体免疫耐受的效果及其机制也不同。迄今为止，已报道有3种不同特性的半成熟树突状细胞，即 semi-mature DCs1"0, semi-matureDCs1"5 和 semi-mature DCstnf-α及其制备方法。Sato K等通过分离人的外周血单个核细...
【技术保护点】
１．一种半成熟树突状细胞的体外制备方法，其特征在于包括以下步骤：（１）冰浴上收集小鼠骨髓细胞悬液，离心弃上清；（２）将步骤（１）离心得到的细胞重悬于ＰＢＳ中，加入细胞悬液体积１５－２０倍的红细胞裂解液，３７．０℃避光作用８－１０ｍｉｎ，然后离心；（３）将步骤（２）离心得到的细胞重悬于含１０％胎牛血清的ＲＰＭＩ １６４０完全培养基中；（４）在步骤（３）得到的细胞悬液中加入１０－２０μｇ／Ｌ重组小鼠粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子ｒｍＧＭ－ＣＳＦ、２．５－１０μｇ／Ｌ重组小鼠白细胞介素４ｒｍＩＬ－４和１－５ｍｇ／Ｌ重组嵌合蛋白Ｊａｇｇｅｄ－１／Ｆｃ；（５）置于培养箱中孵育；（６）隔...
【技术特征摘要】
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