一种诱导小鼠骨髓细胞稳定分化为未成熟树突状细胞的专用培养基及培养方法技术

本发明专利技术属于细胞培养技术领域，公开了一种诱导小鼠骨髓细胞稳定分化为未成熟树突状细胞的培养基及培养方法。所述培养基包括按照比例混合而成的无血清培养基、脂多糖、粒细胞‑巨噬细胞集落刺激因子、白细胞介素‑4、青霉素‑链霉素；使用本发明专利技术DC培养基可稳定地诱导小鼠骨髓细胞高比例定向分化为未成熟树突状细胞，细胞生长状态良好，细胞数量、纯度及生物功能活性稳定，可以满足进一步实验需求，实验结果稳定，且本发明专利技术所述细胞培养基生产成本低，使用方便，具有实际的应用价值。

A special culture medium for inducing bone marrow cells to differentiate into immature dendritic cells and its culture method

The invention belongs to the field of cell culture technology, and discloses a culture medium and a culture method for inducing the stable differentiation of mouse bone marrow cells into immature dendritic cells. The culture medium comprises a serum-free medium, lipopolysaccharide, granulocyte macrophage colony-stimulating factor, interleukin 4, penicillin and streptomycin according to proportion; the invention DC medium can stably induce differentiation of bone marrow cells in mice with high proportion of immature dendritic cells, the cells were in good condition the number of cells, the purity and biological function of activity and stability, can meet the demand for further experiments, experimental results are stable, and the invention of the cell culture medium and low production cost, easy to use, with the actual value of the application.

【技术实现步骤摘要】
一种诱导小鼠骨髓细胞稳定分化为未成熟树突状细胞的专用培养基及培养方法
本专利技术涉及细胞培养领域，更具体地，涉及一种未成熟树突状细胞专用培养基及培养方法。
技术介绍
树突状细胞是一类存在于外周血、皮肤、淋巴器官及胸腺中的抗原提呈细胞(Antigenpresentingcells,APC)，因其细胞膜向外伸出，形成树突状或伪足样突起，故而命名为树突状细胞(dendriticcells，DCs)。它能高效地摄取、加工处理和递呈抗原，并可刺激成熟后活化初始T细胞。未成熟DC细胞具有较强的迁移、摄取和加工抗原的能力，而成熟DC细胞刺激初始T细胞增殖、分化的能力强，处于启动、调控、并维持免疫应答的中心环节。imDC成熟过程的深入研究有助于进一步阐明免疫耐受机制，对于抗肿瘤、风湿免疫免疫、抗排斥等临床和基础研究领域有极为重要的意义。目前实验室imDCs的获取和培养多由研究者采用人外周血或脐血单个核细胞经抗体磁珠包被分离、Ficoll梯度离心纯化后诱导分化而成，采用基础培养基、动物血清及相关细胞因子自行配置培养。但由于临床血标本的限制、DC自身增殖能力不强，加之不同品牌培养基及血清等试剂之间差异较本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种诱导小鼠骨髓细胞稳定分化为未成熟树突状细胞的培养基，其特征在于，该培养基由X‑VIVO 20 90～95v/v%，LPS 1μg/ml，GM‑CSF 20～40ng/ml、IL‑4 10～40ng/ml、青霉素‑链霉素 10

【技术特征摘要】
1.一种诱导小鼠骨髓细胞稳定分化为未成熟树突状细胞的培养基，其特征在于，该培养基由X-VIVO2090～95v/v%，LPS1μg/ml，GM-CSF20～40ng/ml、IL-410～40ng/ml、青霉素-链霉素106U/ml组成，余量为无菌注射用水；其中GM-CSF与IL-4的质量比为4：1。2.根据权利要求1所述的诱导小鼠骨髓细胞稳定分化为未成熟树突状细胞的培养基，其特征在于，该培养基由X-VIVO2095v/v%，LPS1μg/ml，GM-CSF40ng/ml、IL-410ng/ml、青霉素-链霉素106U/ml组成，余量为无菌注射用水。3.利用权利要求1或2所述培养基进行imDCs体外诱导分化的培养方法。4.根据权利要求3所述的培养方法，其特征在于，包括以下步骤：S1.冰浴上收集小鼠骨髓细胞并制...

【专利技术属性】
技术研发人员：马毅，薛志诚，章旭之，邓荣海，吴旭坤，饶佳伟，周晓转，
申请(专利权)人：中山大学附属第一医院，
类型：发明
国别省市：广东,44