人白血病-NOD/SCID小鼠髓外浸润模型及其制备方法技术

本发明专利技术涉及一种人白血病－ＮＯＤ／ＳＣＩＤ小鼠髓外浸润模型的制备方法，包括以下步骤：一、白血病人骨髓单个核细胞制备，二、ＮＯＤ／ＳＣＩＤ小鼠预处理，三、模型建立，四、模型鉴定。本发明专利技术率先采用了尾静脉注射白血病人白血病人骨髓单个核细胞的方式建立人白血病－ＮＯＤ／ＳＣＩＤ小鼠髓外浸润模型的方法，且制备的白血病小鼠髓外浸润模型成功率高，存活时间长，可以为白血病髓外浸润机制研究，白血病药物筛选，基因和分子靶向治疗提供新的动物模型。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种人白血病－ＮＯＤ／ＳＣＩＤ小鼠髓外浸润模型的制备方法，包括以下步骤：　１）白血病人骨髓单个核细胞制备：选取急性白血病人或慢性粒白血病急变病人，常规无菌采集骨髓５ｍｌ，肝素抗凝，加入５ｍｌ淋巴细胞分离液，１８００ｒ／ｍｉｎ水平离心１０ ｍｉｎ，移入超净工作台，吸取中间白色单个核细胞悬浮层，移入另一支离心管中，加入５ｍｌＰＢＳ液，水平离心１０００ｒ／ｍｉｎ，１０ｍｉｎ；倒去上清，再次加入５ｍｌＰＢＳ液，水平离心１０００ｒ／ｍｉｎ，１０ｍｉｎ，弃去上清，０．９％的生理盐水调匀细胞，２％台盼蓝计数活细胞，将活细胞终浓度调至５×１０↑［７］／ｍｌ；　２）ＮＯＤ／ＳＣＩＤ小鼠预处理：ＳＰＦ级ＮＯＤ／ＳＣＩＤ小鼠，５至６周龄，饲养于ＳＰＦ级层流室，标准颗粒饲养，饮水酸化处理，垫料及一切与鼠接触物品均灭菌处理，接种前 将小鼠置于无菌透气木盒中，处罩无菌消毒巾，在↑［１３７］ｃｓ源环境下照射２７０ｃＧｙ，预处理后２４ｈ内接种白血病人单个骨髓核细胞，对小鼠所有操作均在无菌层流室内进行；　３）模型建立：将调整好浓度的白血病人白血病人骨髓单个核细胞尾静脉注射 于预处理后的ＮＯＤ／ＳＣＩＤ小鼠，每只注射剂量为０．２ｍｌ，建议人白血病－ＮＯＤ／ＳＣＩＤ小鼠髓外浸润模型；　４）模型鉴定。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：杨文华，
申请(专利权)人：天津中医药大学第一附属医院，
类型：发明
国别省市：12[中国|天津]