活性多肽‑类人胶原蛋白‑CH制造技术

本发明专利技术公开了一种活性多肽‑类人胶原蛋白‑CH，其包括以下步骤：步骤一，配制0.1M MES(2‑吗啉乙磺酸)，0.5M NaCL(氯化钠)，pH5.5的缓冲溶液100ml，加入胶原蛋白200mg，再加入一定浓度的EDC∶NHS＝4∶1，保持温度在10℃，反应1.5小时；步骤二，将步骤一所得反应液使用层析法，过G25凝胶，收集蛋白洗脱峰；步骤三，配置0.1M PBS(硫化铅)，0.15M NaCL(氯化钠)，pH 7.2的缓冲溶液100ml等。本发明专利技术增强皮肤的屏障功能，减少皮肤内部水分的蒸发，同时抵抗紫外线、灰尘、雾霾等外界因素对皮肤的损坏。

The activity of human like collagen polypeptide CH

The present invention discloses a polypeptide human like collagen CH, which comprises the following steps: A, the preparation of 0.1M MES (2, 0.5M morpholine ethyl sulfonic acid) NaCL (sodium chloride), 100ml buffer solution pH5.5, adding collagen 200mg, adding a certain concentration of EDC: NHS = 4: 1, keep the temperature at 10 degrees, 1.5 hours reaction; step two, the steps of a reaction liquid chromatography, G25 gel, collecting protein elution peak; step three, the configuration of 0.1M PBS (Liu Huaqian), 0.15M NaCL (sodium chloride), pH 7.2 buffer solution 100ml. The invention strengthens the barrier function of the skin, reduces the evaporation of the internal moisture of the skin, and resists the external factors such as ultraviolet, dust, haze and other skin damage.

【技术实现步骤摘要】
活性多肽-类人胶原蛋白-CH
本专利技术涉及一种化妆品，特别是涉及一种活性多肽-类人胶原蛋白-CH。
技术介绍
透明质酸又称糖醛酸、玻尿酸、琉璃糖碳基酸，是一种酸性粘多糖。1934年美国哥伦比亚大学眼科教授Mayer等首先从牛眼玻璃体中分离出该物质。透明质酸是皮肤和其他组织中广泛存在的天然生物分子，被国际上称为理想的保湿因子。存在于结缔组织如关节、玻璃体、滑液、脐带、软骨、皮肤、鸡冠之中，以满足一些重要功能如韧性、支持结构以及细胞的代谢调节。皮肤中的透明质酸占据了身体总透明质酸的50％，真皮中的透明质酸含量显著高于表皮层，透明质酸与皮肤的关系非常紧密，在化妆品中的运用也越来越广泛，尤其特殊的保水作用，是目前发现的自然界中保湿性最好的物质，被称为理想的天然保湿因子。人类皮肤成熟和老化过程也随着透明质酸的含量和新陈代谢而变化。它可以改善皮肤营养代谢，使皮肤柔嫩、光滑、去皱、增加弹性、防止衰老，在保湿的同时又是良好的透皮吸收促进剂。与其他营养成分配合使用，可以起到促进营养吸收的更理想效果。透明质酸分子中含有大量的羧基和羟基，在水溶液中形成分子内和分子间的氢键，这使其具有强大的保水作用，可结合自身400倍以上的水；大分子透明质酸对细胞移动、增殖、分化及吞噬功能有抑制作用，小分子透明质酸则有促进作用。在较高浓度时，由于其分子间作用形成的复杂的三维网状结构，水溶液又具有显著的粘弹性。透明质酸因原料来源及制造技术的差别，对效果也有明显的影响。纯度、分子量、3D立体结构都会直接影响透明质酸的吸水效果。大分子透明质酸(分子量范围180万～220万)可在皮肤表面形成一层透气的薄膜，使皮肤光滑湿润，并可阻隔外来细菌、灰尘、紫外线的侵入，保护皮肤免受侵害。中分子透明质酸(分子量范围100万～180万)可以紧致肌肤，长久保湿。小分子透明质酸(分子量范围40万～100万)能渗入真皮，具有轻微扩张毛细血管，增加血液循环、改善中间代谢、促进皮肤营养吸收作用，具有较强的消皱功能，可增加皮肤弹性，延缓皮肤衰老。衡量一个好的护肤品是以含有三种不同分子量的透明质酸成分为衡量标准的，只含有单一分子量透明质酸成分的护肤品作用有限，并不能发挥透明质酸的最佳护肤功效。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是提供一种活性多肽-类人胶原蛋白-CH，其通过化妆品添加的方式，由透明质酸钠通过交联反应得到的超高分子量聚合物，能在皮肤表面形成特殊的一种三维立体网状结构，均匀的覆盖在皮肤表面，形成一种透气的保护膜，增强皮肤的屏障功能，减少皮肤内部水分的蒸发，同时抵抗紫外线，灰尘，雾霾等外界因素对皮肤的损坏。本专利技术是通过下述技术方案来解决上述技术问题的：一种活性多肽-类人胶原蛋白-CH，其包括以下步骤：步骤一，配制0.1MMES(2-吗啉乙磺酸)，0.5MNaCL(氯化钠)，pH5.5的缓冲溶液100ml，加入胶原蛋白200mg，再加入一定浓度的EDC∶NHS＝4∶1，保持温度在10℃，反应1.5小时；步骤二，将步骤一所得反应液使用层析法，过G25凝胶，收集蛋白洗脱峰；步骤三，配置0.1MPBS(硫化铅)，0.15MNaCL(氯化钠)，pH7.2的缓冲溶液100ml，加入步骤二浓缩所得的活化蛋白，反应体系蛋白浓度达到10mg/ml，加入一定百分比的透明质酸钠，保持温度在18℃，反应4-6小时；步骤四，测定反应所得的产品理化指数。优选地，所述步骤一包括以下步骤：步骤十一，将蛋白在偶联到透明质酸钠上先进行活化，本次实验采用的活化剂为EDC((1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐)；步骤十二，水溶性的碳二亚胺盐酸盐来修饰蛋白分子的羧基集团，目前已经是一种最普遍的标准方法，它可以在将温和的条件下进行；步骤十三，反应中需要常加入NHS-MAG3(巯基乙酰基三甘氨酸N-羟基琥珀酰亚胺酯)使这种中间体变得稳定，同时提高产率，减少副反应的发生；步骤十四，选用的蛋白为胶原蛋白。为了保持蛋白的活性，反应需在pH4-6的缓冲溶液中进行。优选地，所述步骤二包括以下步骤：步骤二十五，将步骤一所得反应液使用层析法，过G25凝胶，收集蛋白洗脱峰。优选地，所述步骤三包括以下步骤：步骤三十一，将配置的0.1MPBS(硫化铅)，0.15MNaCL(氯化钠)，pH7.2的缓冲溶液100ml，加入到反应溶液使用层析法得到的蛋白洗脱峰中。本专利技术的积极进步效果在于：本专利技术通过化妆品添加的方式，由透明质酸钠通过交联反应得到的超高分子量聚合物，能在皮肤表面形成特殊的一种三维立体网状结构，均匀的覆盖在皮肤表面，形成一种透气的保护膜，增强皮肤的屏障功能，减少皮肤内部水分的蒸发，同时抵抗紫外线，灰尘，雾霾等外界因素对皮肤的损坏。具体实施方式下面给出本专利技术较佳实施例，以详细说明本专利技术的技术方案。本专利技术活性多肽-类人胶原蛋白-CH包括以下步骤：步骤一，配制0.1MMES(2-吗啉乙磺酸)，0.5MNaCL(氯化钠)，pH5.5的缓冲溶液100ml，加入胶原蛋白200mg，再加入一定浓度的EDC∶NHS＝4∶1，保持温度在10℃，反应1.5小时；步骤二，将步骤一所得反应液使用层析法，过G25凝胶，收集蛋白洗脱峰；步骤三，配置0.1MPBS(硫化铅)，0.15MNaCL(氯化钠)，pH7.2的缓冲溶液100ml，加入步骤二浓缩所得的活化蛋白，反应体系蛋白浓度达到10mg/ml，加入一定百分比的透明质酸钠，保持温度在18℃，反应4-6小时；步骤四，测定反应所得的产品理化指数。所述步骤一包括以下步骤：步骤十一，将蛋白在偶联到透明质酸钠上先进行活化，本次实验采用的活化剂为EDC((1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐)；步骤十二，水溶性的碳二亚胺盐酸盐来修饰蛋白分子的羧基集团，目前已经是一种最普遍的标准方法，它可以在将温和的条件下进行；步骤十三，反应中需要常加入NHS-MAG3(巯基乙酰基三甘氨酸N-羟基琥珀酰亚胺酯)使这种中间体变得稳定，同时提高产率，减少副反应的发生；步骤十四，选用的蛋白为胶原蛋白。为了保持蛋白的活性，反应需在pH4-6的缓冲溶液中进行。所述步骤二包括以下步骤：步骤二十五，将步骤一所得反应液使用层析法，过G25凝胶，收集蛋白洗脱峰。所述步骤三包括以下步骤：步骤三十一，将配置的0.1MPBS(硫化铅)，0.15MNaCL(氯化钠)，pH7.2的缓冲溶液100ml，加入到反应溶液使用层析法得到的蛋白洗脱峰中。综上所述，本专利技术通过化妆品添加的方式，由透明质酸钠通过交联反应得到的超高分子量聚合物，能在皮肤表面形成特殊的一种三维立体网状结构，均匀的覆盖在皮肤表面，形成一种透气的保护膜，增强皮肤的屏障功能，减少皮肤内部水分的蒸发，同时抵抗紫外线，灰尘，雾霾等外界因素对皮肤的损坏。以上所述的具体实施例，对本专利技术的解决的技术问题、技术方案和有益效果进行了进一步详细说明，所应理解的是，以上所述仅为本专利技术的具体实施例而已，并不用于限制本专利技术，凡在本专利技术的精神和原则之内，所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本专利技术的保护范围之内。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种活性多肽‑类人胶原蛋白‑CH，其特征在于，其包括以下步骤：步骤一，配制0.1M MES，0.5M NaCL，pH5.5的缓冲溶液100ml，加入胶原蛋白200mg，再加入一定浓度的EDC∶NHS＝4∶1，保持温度在10℃，反应1.5小时；步骤二，将步骤一所得反应液使用层析法，过G25凝胶，收集蛋白洗脱峰；步骤三，配置0.1M PBS，0.15M NaCL，pH 7.2的缓冲溶液100ml，加入步骤二浓缩所得的活化蛋白，反应体系蛋白浓度达到10mg/ml，加入一定百分比的透明质酸钠，保持温度在18℃，反应4‑6小时；步骤四，测定反应所得的产品理化指数。

【技术特征摘要】
1.一种活性多肽-类人胶原蛋白-CH，其特征在于，其包括以下步骤：步骤一，配制0.1MMES，0.5MNaCL，pH5.5的缓冲溶液100ml，加入胶原蛋白200mg，再加入一定浓度的EDC∶NHS＝4∶1，保持温度在10℃，反应1.5小时；步骤二，将步骤一所得反应液使用层析法，过G25凝胶，收集蛋白洗脱峰；步骤三，配置0.1MPBS，0.15MNaCL，pH7.2的缓冲溶液100ml，加入步骤二浓缩所得的活化蛋白，反应体系蛋白浓度达到10mg/ml，加入一定百分比的透明质酸钠，保持温度在18℃，反应4-6小时；步骤四，测定反应所得的产品理化指数。2.如权利要求1所述的活性多肽-类人胶原蛋白-CH，其特征在于，所述步骤一包括以下步骤：步骤十一，将蛋白在偶联到透明质酸钠上先进行活化，本次实验采...

【专利技术属性】
技术研发人员：不公告发明人，
申请(专利权)人：广州艾玫格生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44