一种木瓜蛋白肽的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种木瓜蛋白肽的制备方法，本方法采用复合蛋白酶对木瓜蛋白粉进行酶解反应，得到所述木瓜蛋白肽；所述复合蛋白酶由胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶按照5U：1‑2U：0.5‑1U的比例混合而成。本发明专利技术制备得到的木瓜蛋白肽纯度高，其TCA酸溶性蛋白含量超过80％，分子量分布小于10000的占85％以上，游离氨基酸占5‑7％。本发明专利技术制备木瓜蛋白肽的工艺简易，投资少，见效快，回报率高、投入回报周期短，生产制备的木瓜蛋白肽酸溶性蛋白含量、游离氨基酸、分子量分布等质量参数变化小，适宜于工业化生产。

【技术实现步骤摘要】
一种木瓜蛋白肽的制备方法
本专利技术涉及生物提取
，尤其涉及一种木瓜蛋白肽的制备方法。
技术介绍
肽是蛋白质的水解产物，即蛋白质的结构片段。两个氨基酸通过肽键连接成二肽，三个氨基酸通过肽键连接成三肽，而多个氨基酸通过肽键连接成多肽。一般把2-10个氨基酸残基组成的肽，称之为寡肽。因为肽的分子相对蛋白质的分子小得多，但生物活性非常高，少量的肽就能发挥重要的作用，所以被称为活性肽。活性肽中不同的氨基酸排序，决定了它们有不同的功能，它们通过多种代谢和生理调节，可以起到促进免疫、抗自由基、激素调节、抗菌、抗病毒、降血压、降血脂等作用。木瓜(学名:Chaenomelessinensis(Thouin)Koehne):蔷薇科木瓜属，其果皮光滑美观，果肉厚实细致、香气浓郁、汁水丰多、甜美可口、营养丰富，有“百益之果”、“水果之皇”、“万寿瓜”之雅称，是岭南四大名果之一。木瓜富含17种以上蛋白质及氨基酸，如糖分、有机酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、皂甙、黄酮类、脂肪酶。木瓜还含有木瓜蛋白酶、番木瓜碱、膳食纤维以及多种维生素，并含有钙、铁等物质。半个中等大小的木瓜足供成人整天所需的维生素C，木瓜在中国素有“万寿果”之称，顾名思义，多吃可延年益寿。目前还未见有木瓜蛋白肽制备方法的报道。
技术实现思路
本专利技术的目的在于：针对上述存在的问题，提供一种木瓜蛋白肽的制备方法。为了实现上述专利技术目的，本专利技术采用的技术方案如下：一种木瓜蛋白肽的制备方法，采用复合蛋白酶对木瓜蛋白粉进行酶解反应，得到所述木瓜蛋白肽；所述复合蛋白酶由胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶按照5U：1-2U：0.5-1U的比例混合而成。较佳地，所述木瓜蛋白肽的制备方法的具体步骤为：(1)在木瓜蛋白粉中加入水，混合均匀后形成蛋白浆，所述木瓜蛋白粉与水的质量比为1：9-12；(2)往蛋白浆中加入复合蛋白酶，控制溶液的温度为50-55℃，用NaOH溶液或冰醋酸调节溶液的pH为6.2-6.5，酶解的时间为4-5h，得到酶解液；(3)将所得酶解液加热至85-95℃，维持20-25min，使酶灭活后，进行冷藏沉降处理，然后过滤，得到滤液；(4)将所得滤液进行浓缩干燥后，即得所述木瓜蛋白肽。较佳地，酶解每克木瓜蛋白粉所需复合蛋白酶6000-7000U。较佳地，所述木瓜蛋白肽的制备方法的具体步骤为：(1)在木瓜蛋白粉中加入水，混合均匀后形成蛋白浆，所述木瓜蛋白粉与水的质量比为1：11；(2)往蛋白浆中加入复合蛋白酶，控制溶液的温度为52℃，用NaOH溶液或冰醋酸调节溶液的pH为6.3，酶解的时间为4.5h，得到酶解液；所述酶解每克木瓜蛋白粉所需复合蛋白酶6500U；(3)将所得酶解液加热至90℃，维持22min，使酶灭活后，进行冷藏沉降处理，然后过滤，得到滤液；(4)将所得滤液进行浓缩干燥后，即得所述木瓜蛋白肽。较佳地，在步骤(3)，所述冷藏沉降处理为先在10-15℃的条件下处理1-2h，再在2-5℃的条件下处理5-20h。较佳地，在步骤(3)，所述过滤为用孔径为100-200nm的膜进行过滤。较佳地，在步骤(4)，所述的干燥方法为喷雾干燥或冷冻干燥。综上所述，由于采用了上述技术方案，本专利技术的有益效果是：(1)本专利技术制备得到的木瓜蛋白肽纯度高，其TCA酸溶性蛋白含量超过80％，分子量分布小于10000的占85％以上，游离氨基酸占5-7％。(2)本专利技术制备木瓜蛋白肽的工艺简易，投资少，见效快，回报率高、投入回报周期短，生产制备的木瓜蛋白肽酸溶性蛋白含量、游离氨基酸、分子量分布等质量参数变化小，适宜于工业化生产。具体实施方式为使本专利技术的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下举出优选实施例，对本专利技术进一步详细说明。然而，需要说明的是，说明书中列出的许多细节仅仅是为了使读者对本专利技术的一个或多个方面有一个透彻的理解，即便没有这些特定的细节也可以实现本专利技术的这些方面。本实施例的木瓜蛋白粉购自上海中邦斯瑞生物科技有限公司，其蛋白含量为90％。实施例1一种木瓜蛋白肽的制备方法，由以下步骤组成：(1)在木瓜蛋白粉中加入水，混合均匀后形成蛋白浆，所述木瓜蛋白粉与水的质量比为1：9；(2)往蛋白浆中加入复合蛋白酶，控制溶液的温度为50℃，用NaOH溶液或冰醋酸调节溶液的pH为6.5，酶解的时间为4h，得到酶解液；复合蛋白酶由胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶按照5U：1U：1U的比例混合而成；酶解每克木瓜蛋白粉所需复合蛋白酶6000U；(3)将所得酶解液加热至85℃，维持25min，使酶灭活后，进行冷藏沉降处理，然后用孔径为100nm的膜进行过滤，得到滤液；所述冷藏沉降处理为先在10℃的条件下处理1h，再在2℃的条件下处理5h；(4)将所得滤液进行浓缩，并进行喷雾干燥后，即得所述木瓜蛋白肽。本实施例制备得到的木瓜蛋白肽纯度高，其TCA酸溶性蛋白含量为82％，分子量分布小于10000的占86％，游离氨基酸占5.5％。实施例2一种木瓜蛋白肽的制备方法，由以下步骤组成：(1)在木瓜蛋白粉中加入水，混合均匀后形成蛋白浆，所述木瓜蛋白粉与水的质量比为1：12；(2)往蛋白浆中加入复合蛋白酶，控制溶液的温度为55℃，用NaOH溶液或冰醋酸调节溶液的pH为6.2，酶解的时间为5h，得到酶解液；复合蛋白酶由胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶按照5U：2U：0.5U的比例混合而成；酶解每克木瓜蛋白粉所需复合蛋白酶7000U；(3)将所得酶解液加热至95℃，维持20min，使酶灭活后，进行冷藏沉降处理，然后用孔径为200nm的膜进行过滤，得到滤液；所述冷藏沉降处理为先在15℃的条件下处理2h，再在5℃的条件下处理20h；(4)将所得滤液进行浓缩，并进行冷却干燥后，即得所述木瓜蛋白肽。本实施例制备得到的木瓜蛋白肽纯度高，其TCA酸溶性蛋白含量为85％，分子量分布小于10000的占88％，游离氨基酸占7％。实施例3一种木瓜蛋白肽的制备方法，由以下步骤组成：(1)在木瓜蛋白粉中加入水，混合均匀后形成蛋白浆，所述木瓜蛋白粉与水的质量比为1：11；(2)往蛋白浆中加入复合蛋白酶，控制溶液的温度为52℃，用NaOH溶液或冰醋酸调节溶液的pH为6.3，酶解的时间为4.5h，得到酶解液；复合蛋白酶由胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶按照5U：1.5U：0.8U的比例混合而成；酶解每克木瓜蛋白粉所需复合蛋白酶6500U；(3)将所得酶解液加热至90℃，维持22min，使酶灭活后，进行冷藏沉降处理，然后用孔径为100nm的膜进行过滤，得到滤液；所述冷藏沉降处理为先在10℃的条件下处理1h，再在5℃的条件下处理20h；(4)将所得滤液进行浓缩，并进行冷却干燥后，即得所述木瓜蛋白肽。本实施例制备得到的木瓜蛋白肽纯度高，其TCA酸溶性蛋白含量为85％，分子量分布小于10000的占88％，游离氨基酸占7％。对比实施例1本实施例的其它工艺方法与实施例1一致，不同之处在于：在步骤(5)，将复合蛋白酶替换成单一的木瓜蛋白酶进行酶解；酶解每克木瓜蛋白粉所需木瓜蛋白酶6000U。将对比实施例1制备得到的木瓜蛋白肽样品进行检测分析，其TCA酸溶性蛋白含量为75％，分子量分布小于10000的占80％，游离氨基酸占4％。对比实施例2本实施例的其它工艺方法与实施例本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种木瓜蛋白肽的制备方法，其特征在于：采用复合蛋白酶对木瓜蛋白粉进行酶解反应，得到所述木瓜蛋白肽；所述复合蛋白酶由胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶按照5U：1‑2U：0.5‑1U的比例混合而成。

【技术特征摘要】
1.一种木瓜蛋白肽的制备方法，其特征在于：采用复合蛋白酶对木瓜蛋白粉进行酶解反应，得到所述木瓜蛋白肽；所述复合蛋白酶由胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶按照5U：1-2U：0.5-1U的比例混合而成。2.根据权利要求1所述的木瓜蛋白肽的制备方法，其特征在于：所述制备方法的具体步骤为：(1)在木瓜蛋白粉中加入水，混合均匀后形成蛋白浆，所述木瓜蛋白粉与水的质量比为1：9-12；(2)往蛋白浆中加入复合蛋白酶，控制溶液的温度为50-55℃，用NaOH溶液或冰醋酸调节溶液的pH为6.2-6.5，酶解的时间为4-5h，得到酶解液；(3)将所得酶解液加热至85-95℃，维持20-25min，使酶灭活后，进行冷藏沉降处理，然后过滤，得到滤液；(4)将所得滤液进行浓缩干燥后，即得所述木瓜蛋白肽。3.根据权利要求1或2所述的木瓜蛋白肽的制备方法，其特征在于：酶解每克木瓜蛋白粉所需复合蛋白酶6000-7000U。4.根据权利要求1或2所述的木瓜蛋白肽的制备方法，...

【专利技术属性】
技术研发人员：郝之奎，潘万贵，林海波，徐峰，管月清，魏春，高影，王笑丽，廖祥儒，
申请(专利权)人：郝之奎，台州职业技术学院，
类型：发明
国别省市：浙江,33