桑葚花色苷在缓解自噬介导的肝细胞脂质沉积中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种桑葚花色苷在缓解自噬介导的肝细胞脂质沉积中的应用：用于制备治疗或预防非酒精性脂肪肝的药物、食品；具体而言，通过降低油酸诱导的HepG2细胞脂质沉积，从而制备预防和治疗非酒精性脂肪肝保健食品和药物。桑葚花色苷的主要成分为矢车菊素‑3‑葡萄糖苷。

Mulberry anthocyanins in alleviating liver cell autophagy mediated lipid deposition in

The present invention discloses a kind of mulberry anthocyanins in alleviating liver cell autophagy mediated lipid deposition in the preparation of a medicament, for the treatment or prevention of nonalcoholic fatty liver food; specifically, by reducing the lipid deposition in HepG2 cells induced by oleic acid, and preparation of the prevention and treatment of nonalcoholic fatty liver health the food and drug. The main ingredients of mulberry anthocyanins cyanidin glucoside 3.

【技术实现步骤摘要】
桑葚花色苷在缓解自噬介导的肝细胞脂质沉积中的应用
本专利技术涉及医药领域，具体涉及一种桑葚花色苷，主要成分为矢车菊素-3-葡萄糖苷，在制备预防和治疗非酒精性脂肪肝保健食品和药物中的应用；同时涉及降低油酸诱导的HepG2细胞脂质沉积在防治非酒精性脂肪肝中的应用。
技术介绍
随着现代社会经济的高速发展，人民的生活水平显著提高，肥胖(obesity)及其并发症的发病率和死亡率呈逐年上升的趋势。据世界卫生组织在2011年3月报道表明，2008年全球有超过15亿成年人处于超重水平，其中至少5亿是肥胖。预计到2030年，美国42％的人口将存在肥胖问题。将超出美国现在人口3000万。与此相关的医疗成本增加将达近5500亿美元。而在国内据2010年发表的研究报告称，中国目前肥胖人口达3.25亿人，增幅超过美国、英国和澳大利亚。7岁以下儿童中有近五分之一超重，7％是肥胖儿童，比例远超欧洲国家。这个数字在未来20年还可能增加一倍。超重和肥胖引起的常见并发症有高血压、糖尿病、冠心病、脑卒中等。由此可见，肥胖已成为全球普遍的健康问题，预防和治疗肥胖症已经成为21世纪的首要健康问题。如何预防与治疗肥胖及其相关并发症的发生以引起全世界学者的关注。当前预防和治疗肥胖症的手段主要包括：⑴控制总热能摄入量；⑵运动法；⑶手术疗法：腹部抽脂肪，胃部分切除；⑷药物疗法，如食物(能量)摄入抑制剂：抑制食欲、增加饱腹感；胃肠道脂肪吸收抑制剂：通过外周组织产热而增加能耗的物质刺激脂肪代谢，减少甘油三酯合成的物质；⑸非药物疗法：针刺疗法、耳穴贴压法、针灸疗法、指针减肥法、推拿按摩法。其中以药物治疗为主要有效的治疗手段。目前临床上应用的众多减肥药中，以Orlistat(Orl)和Sibutramine(Sib)效果最好，但二者有明显的心血管系统方面的副作用。迄今为止，人类还没有开发出一种十分满意的减肥降脂药品。其它减肥降脂方法也大都存在降低机体免疫力、易反弹等缺点。面对全球愈发严重的肥胖症及其由肥胖引起的代谢性疾病的发病率的升高，探寻安全、有效的新的预防和治疗策略，对于干预肥胖相关的健康疾患，降低肥胖症发病率具有极其重要的意义。近年由于功能食品研究热潮的兴起，越来越多的学者感兴趣于具有减肥功能的天然产物的开发与研究，以期望找到安全有效的食源性的天然减肥功能因子。而对肥胖发生诱因及其对相关因子对肥胖发生的诱导调控机制的研究成果的积累将为减肥功能因子开发提供有力的依据与筛选平台。桑葚花色苷是天然存在于桑葚中的一类花色苷物质。成熟桑葚含有丰富的花色苷化合物，主要为矢车菊-3-糖苷，是花色苷较为廉价的来源。目前国内外关于桑葚花色苷抗氧化活性物质的功效的研究较多而其干预肥胖发生的效果和调控机制未见报道。结合实验室前期工作的进展结果和大量的文献调研我们发现肥胖的两个显著特征是过度氧化应激和低度炎症水平上升，其中过度氧化应激损伤和抗氧化功能减弱亦可促进炎症反应，而具有良好抗氧化活性的桑葚花色苷极有可能通过下调氧化应激反应水平来防治肥胖的发生。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是提供一种桑葚花色苷在缓解自噬介导的肝细胞脂质沉积中的应用。为了解决上述技术问题，本专利技术提供一种桑葚花色苷在缓解自噬介导的肝细胞脂质沉积中的应用：用于制备治疗或预防非酒精性脂肪肝的药物、食品。作为本专利技术的桑葚花色苷在缓解自噬介导的肝细胞脂质沉积中的应用的改进：通过降低油酸诱导的HepG2细胞脂质沉积，从而制备预防和治疗非酒精性脂肪肝保健食品和药物。作为本专利技术的桑葚花色苷在缓解自噬介导的肝细胞脂质沉积中的应用的进一步改进：桑葚花色苷的主要成分为矢车菊素-3-葡萄糖苷。本专利技术提供了一种桑葚花色苷(MACN)在制备预防和治疗非酒精性脂肪肝保健食品和药物中的应用；同时涉及降低油酸诱导的HepG2细胞脂质沉积在防治非酒精性脂肪肝中的应用。具体涉及为所用桑葚花色苷(MACN)主要成分为矢车菊素-3-葡萄糖苷，其能够降低油酸(OA)诱导的HepG2细胞脂质沉积。因此，桑葚花色苷(MACN)可在制备预防和治疗非酒精性脂肪肝保健食品和药物中得以应用。本专利技术采用HepG2细胞(人肝癌细胞)进行实验，通过噻唑蓝(MTT)法测定桑葚花色苷(MACN)处理对HepG2细胞增殖活性的影响，并采用油酸(OA)诱导24h构建细胞脂质沉积模型同时加以桑葚花色苷(MACN)干预24h，裂解细胞后测定细胞内甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)含量变化，探讨桑葚花色苷(MACN)对细胞脂质沉积的影响。具体
技术实现思路
如下：(1)桑葚花色苷(MACN)为实验室提取，为天然功能因子，研究证明无任何毒副作用；(2)桑葚花色苷(MACN)对HepG2细胞的作用：将培养的HepG2细胞接种于96孔板，随机分组，即空白对照组、5、10、20、40、80、160、320、640、1280ug/mL桑葚花色苷组(MACN)，每组重复8孔，置于37℃、5％CO2培养箱中共同孵育24h，以MTT法检测细胞存活率。(3)桑葚花色苷(MACN)对油酸(OA)诱导的HepG2细胞转氨酶活性的影响：将培养的HepG2细胞接种于6孔板中，随机分为9组，即Con(DMEM高糖培养基常规培养细胞)、OA组(油酸终浓度0.5mM)、Lov组(油酸终浓度0.5mM+10uM洛伐他汀)、桑葚花色苷(MACN)处理组(油酸终浓度0.5mM+终浓度5ug/mL，10ug/mL,50ug/mL,100ug/mL，200ug/mL,300ug/mL桑葚花色苷)，每组重复三次，各组细胞继续培养24h后收获细胞，超声破碎后取细胞裂解液，测定细胞内谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)含量。(4)桑葚花色苷(MACN)对油酸(OA)诱导的HepG2细胞脂质沉积的影响：将培养的HepG2细胞接种于6孔板中，随机分为6组，即Con(DMEM高糖培养基常规培养细胞)、OA组(油酸终浓度0.5mM)、Lov组(油酸终浓度0.5mM+10uM洛伐他汀)、桑葚花色苷(MACN)处理组(油酸终浓度0.5mM+终浓度100ug/mL，200ug/mL,300ug/mL桑葚花色苷)，每组重复三次，各组细胞继续培养24h后收获细胞，超声破碎后取细胞裂解液，测定细胞内甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)含量。(5)桑葚花色苷(MACN)对油酸(OA)诱导的HepG2细胞自噬的影响：将培养的HepG2细胞接种于6孔板中，随机分为2组，OA组(油酸终浓度0.5mM)和桑葚花色苷(MACN)处理组(油酸终浓度0.5mM+终浓度300ug/mL桑葚花色苷)，每组重复三次，各组细胞继续培养24h后收获细胞，透射电镜观察各组细胞内自噬体和脂滴情况。本专利技术同现有技术相比，具有以下技术优势：1.桑葚花色(MACN)苷为天然功能因子，研究证实无任何毒副作用。2.本专利技术表明，当桑葚花色苷(MACN)浓度为5、10、20、40、80、160、320、640、1280ug/mL时，HepG2细胞增殖活力与正常对照组相比在桑葚花色苷浓度(MACN)为0-640ug/mL内没有显著差异，说明桑葚花色苷(MACN)浓度在0-640ug/mL内为安全浓度。3.本专利技术表明，当桑葚花色苷(MA本文档来自技高网...

【技术保护点】
桑葚花色苷在缓解自噬介导的肝细胞脂质沉积中的应用，其特征是：用于制备治疗或预防非酒精性脂肪肝的药物、食品。

【技术特征摘要】
1.桑葚花色苷在缓解自噬介导的肝细胞脂质沉积中的应用，其特征是：用于制备治疗或预防非酒精性脂肪肝的药物、食品。2.根据权利要求1所述的桑葚花色苷在缓解自噬介导的肝细胞脂质沉积中的应用，其特征是：通过降低油酸诱导...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑晓冬，楚强，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：浙江,33