检测血清中SPARC蛋白的物质在制备筛查肝细胞癌试剂盒中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种用于检测SPARC蛋白浓度的物质的新用途。本发明专利技术所提供的新用途为用于检测SPARC蛋白浓度的物质在制备筛查或辅助筛查肝细胞癌产品中的应用。实验证明，SPARC蛋白可作为肝细胞癌的肿瘤标志物；在以正常人为筛查对象的情况下进行筛查，判定为HCC患者的灵敏度为82％、特异度为93％，AUC为0.89；在以LC患者为筛查对象的情况下进行筛查，判定为HCC患者的灵敏度为62％、特异度为86％，AUC为0.73；SPARC蛋白可用于诊断AFP阴性肝癌；SPARC蛋白还可与AFP联合用于在正常人或LC患者中筛查或辅助诊断HCC。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物
，尤其涉及检测血清中SPARC蛋白的物质在制备筛查肝细胞癌试剂盒中的应用。
技术介绍
肝细胞癌(hepatocellularcarcinoma,HCC)是常见的恶性肿瘤之一，有较高的发病率和死亡率，每年约650000人死于HCC，且其发病率有增高的趋势。该病多发于东南亚，其中约有50％以上发生于中国。肝细胞癌的发生情况是一个多因素、多阶段的过程，乙型肝炎病毒(hepatitisBvirus,HBV)慢性感染是重要的高危因素，有乙型肝炎背景的肝硬化(livercirrhosis,LC)患者是可能发展为肝癌的高危人群。目前肝细胞癌5年生存率较差，肝细胞癌的早期筛查，尤其是肝硬化患者高危人群中筛查早期肝癌患者，及时采取治疗措施，可提高继发于乙型肝炎病毒感染的肝细胞癌患者的生存率。目前HCC临床诊断与病情监测等仍主要依赖于B超等影像学检查联合血清标志物甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)水平的检测。而AFP作为目前HCC诊断和病情监测一个最主要的生物标志物，其灵敏度仍不理想。所以，寻找灵敏的肝细胞癌血清生物标记物，尤其可应用于AFP阴性的肝癌患者，对于诊断肝细胞癌非常重要。SPARC蛋白是一种糖蛋白，通过与胞外基质和细胞因子相互作用调节细胞生长。SPARC蛋白与肿瘤的发生发展关系密切，有研究表明SPARC蛋白在HCC组织中过表达(LeBail,B.etal.Osteonectin/SPARCisoverexpressedinhumanhepatocellularcarcinoma.JPathol.1999)。然而每种蛋白在外周血和组织中表达水平的关系非常复杂，无法简单地从组织中的表达水平推导出其在外周血中的表达水平，甚至有时候两者的表达水平会完全相反。例如有研究报道livercarboxylesterase1(CES1)蛋白在肝癌患者组织中显著下调，而在肝癌患者血清中该蛋白显著上调(Na,K.,etal.,Humanlivercarboxylesterase1outperformsalpha-fetoproteinasbiomarkertodiscriminatehepatocellularcarcinomafromotherliverdiseasesinKoreanpatients.IntJCancer,2013)。
技术实现思路
本专利技术的一个目的是提供检测血清或血浆中SPARC蛋白浓度的物质的用途。本专利技术提供的检测血清或血浆中SPARC蛋白浓度的物质在制备筛查或辅助诊断肝细胞癌产品中的应用。本专利技术还提供的检测血清或血浆中SPARC蛋白浓度的物质在制备筛查或辅助诊断甲胎蛋白阴性肝细胞癌产品中的应用。在本专利技术的一个实施例中，所述肝细胞癌具体为继发于HBV感染的有肝硬化背景的肝细胞癌。所述SPARC蛋白为人SPARC蛋白。上述应用中，所述检测血清或血浆中SPARC蛋白浓度的物质包括检测血清或血浆中SPARC蛋白浓度所需的试剂和仪器。上述应用中，所述检测血清或血浆中SPARC蛋白浓度所需的试剂包括SPARC蛋白抗体。本专利技术第二个目的是提供检测血清或血浆中SPARC浓度的物质和检测血清或血浆中甲胎蛋白浓度的物质的用途。本专利技术提供了检测血清或血浆中SPARC浓度的物质和检测血清或血浆中甲胎蛋白浓度的物质在制备筛查或辅助诊断肝细胞癌产品中的应用。上述应用中，所述检测血清或血浆中SPARC蛋白浓度的物质包括检测血清或血浆中SPARC蛋白浓度所需的试剂和仪器；或，所述检测血清或血浆中甲胎蛋白浓度的物质包括检测血清或血浆中甲胎蛋白浓度所需的试剂和仪器。在本专利技术的一个实施例中，检测血清或血浆中甲胎蛋白浓度所需的试剂为AFP化学发光法试剂盒，仪器为罗氏全自动电化学发光免疫分析仪。上述应用中，所述检测血清或血浆中SPARC蛋白浓度所需的试剂包括SPARC蛋白抗体。本专利技术第三个目的是提供一种筛查或辅助诊断肝细胞癌产品。本专利技术提供的产品，其包括上述检测血清或血浆中SPARC蛋白浓度的物质。在本专利技术的一个实施例中，所述用于检测SPARC蛋白浓度的物质为SPARC蛋白抗体，具体为ELISA所用SPARC抗体(R&DSystems公司，货号：DSP00)。当然，也可以为其它类型的抗体或是其它可用于检测SPARC蛋白浓度的物质。在本专利技术中，所述产品的筛查或诊断对象是肝硬化(LC)患者或健康人。在本专利技术的一个实施例中，所述肝硬化(LC)患者具体为HBV感染的肝硬化患者。所述检测SPARC蛋白浓度具体可为检测人血清或血浆中的SPARC蛋白浓度。本专利技术第四个目的是提供一种筛查或辅助诊断肝细胞癌产品。本专利技术提供的产品，其包括上述检测血清或血浆中SPARC蛋白浓度的物质和上述检测血清或血浆中甲胎蛋白浓度的物质。上述产品中，所述产品为试剂盒。为了寻找肝细胞癌血清生物标记物，专利技术人对AFP阴性肝癌患者的配对的肿瘤与癌旁组织间隙液进行鉴定，发现SPARC蛋白在肝癌患者肿瘤组织间隙液中显著上调。因为组织间隙液是连接细胞内液和循环体液的接口，该结果提示SPARC蛋白非常有可能从肝癌组织中通过组织间隙液分泌到血液中去。进而检测了该蛋白在临床血清样本中的表达水平，发现其血清浓度在肝癌患者中显著增高，提出SPARC蛋白可作为AFP阴性肝癌患者的血清诊断标志物，且可与AFP联合诊断肝癌。实验证明，血清SPARC蛋白可作为肝细胞癌(HCC)的肿瘤标志物。当以无症状的正常人作为筛查对象时，受试者工作特征曲线(receiveroperatingcharacteristiccurve,ROC)分析结果表明曲线下面积(AreaUnderrocCurve,AUC)达到0.89，灵敏度为82％、特异度为93％；在以LC患者为筛查对象的情况下，AUC＝0.73，灵敏度为62％、特异度为86％。SPARC蛋白用于诊断AFP阴性肝癌患者时，以正常人为筛查对象，AUC＝0.88，灵敏度为78％，特异度为93％；以LC患者为筛查对象，AUC＝0.72，灵敏度为61％，特异度为84％。SPARC蛋白还可与AFP联合用于在LC患者中筛查或辅助诊断HCC。附图说明图1为正常组(N)、肝硬化患者组(LC)和肝癌患者组(HCC)血清中SPARC蛋白水平散点图。图2为正常组(N)、肝硬化患者组(LC)和肝癌患者组(HCC)血清中SPARC蛋白水平的ROC曲线分析结果。图3为正常组(N)、AFP阴性肝硬化患者组(LC)和AFP阴性肝癌患者组(HCC)血清中SAPRC蛋白水平的ROC曲线分析结果。图4为肝硬化患者组(LC)和肝癌患者组(HCC)SPARC与AFP联合诊断的ROC曲线分析结果。具体实施方式下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。下述实施例中所涉及的名词解释：受试者工作特征(receiver(relative)operatingcharacteristic,ROC)曲线反映了灵敏度与特异度间的平衡，ROC曲线下面积是重要的试验准确度指标。分别计算各个试验的ROC曲线下的面积(AUC)进行比较，面积大者，试验的诊断价值大。灵敏度(真阳性率)：实际有病而按试验本文档来自技高网...

【技术保护点】
检测血清或血浆中SPARC蛋白浓度的物质在制备筛查或辅助诊断肝细胞癌产品中的应用。

【技术特征摘要】
1.检测血清或血浆中SPARC蛋白浓度的物质在制备筛查或辅助诊断肝细胞癌产品中的应用。2.检测血清或血浆中SPARC蛋白浓度的物质在制备筛查或辅助诊断甲胎蛋白阴性肝细胞癌产品中的应用。3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于：所述检测血清或血浆中SPARC蛋白浓度的物质包括检测血清或血浆中SPARC蛋白浓度所需的试剂和仪器。4.根据权利要求1-3中任一所述的应用，其特征在于：所述检测血清或血浆中SPARC蛋白浓度所需的试剂包括SPARC蛋白抗体。5.检测血清或血浆中SPARC浓度的物质和检测血清或血浆中甲胎蛋白浓度的物质在制备筛查或辅助诊断肝细胞癌产品中的应用。6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于：所述检测血...

【专利技术属性】
技术研发人员：贺福初，孙薇，张剑，孙龙钦，邢宝才，牟劲松，赵晓航，
申请(专利权)人：北京蛋白质组研究中心，
类型：发明
国别省市：北京;11