定性及半定量检测血清或尿液中百草枯的试剂盒及检测方法技术

技术编号:13418025 阅读:182 留言:0更新日期:2016-07-27 15:23
一种定性及半定量检测血清或尿液中百草枯的试剂盒,其组成为:反应管,所述的反应管内装有由聚丙烯筛板固定的硅胶粉;试剂管A,所述的试剂管A内装有试剂A氢氧化钠;试剂管B,所述试剂管B内装有试剂B连二亚硫酸钠;连接管;注射器;蒸馏水;百草枯标准色谱卡;包装盒子及泡沫板;本发明专利技术还涉及应用该试剂盒进行检测的方法。与现有技术相比,本发明专利技术可以实现对血清或尿液中的百草枯的富集,同时消除样品中其他显色物质的干扰;使用时,可以根据实际情况对取样量进行合理选择;通过与标准色谱卡进行比对,可以快速半定量检测出百草枯的含量。本发明专利技术试剂盒灵敏度高,操作方法简便、检测快速、重现性好,所需试剂量极少,便于推广应用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种试剂盒,特别是一种定性及半定量检测血清或尿液中百草枯的试剂盒。本专利技术还涉及应用前述试剂盒进行检测的方法。
技术介绍
百草枯又名对草快,化学名为1,1'-二甲基-4,4'-二氯二吡啶阳离子盐,为有机杂环类接触性脱叶剂及除草剂。人体误服或直接接触百草枯后,其可通过胃肠道、呼吸道及皮肤粘膜吸收,引起致死性的肺纤维化、肝肾功能损伤,致死率高达80%,因此建立一种能够快速准确测定百草枯中毒体液患者体液内百草枯残留量,不仅可以准确的预测哪些患者有希望救治,节省无效,或是可能给患者带来潜在不适的治疗方案,还可以根据血药水平指标,判断患者的存活率,指导临床治疗,同时,也可以对新的治疗方法进行测定与评估。目前,百草枯浓度的检测主要应用于环境卫生、公共卫生和司法鉴定等方面,检测方法多为高度灵敏的分析化学方法,如高效液相色谱法、气相色谱法、薄层色谱法、免疫测定法、毛细管电泳法等。这些方法虽然具有较高的灵敏度,但是仪器昂贵,检测成本高,测定时间长。而百草枯中毒病人起病急,进展快,几乎全部来自于农村,绝大多数在县级或地市级医院就诊,因此上述方法在中小医院检验科不便开展,也不适用于中毒急诊病人。现有技术中,已有部分研究者开发出基于分光光度法的试剂盒用于检测体液中的百草枯。但在实际应用时,此类试剂盒会受到样品本身颜色的影响,灵敏度较低,容易造成较大的误差。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是针对现有技术的不足,提供一种操作简便,灵敏度高,能够快速定性及半定量检测血清或尿液中百草枯的试剂盒。本专利技术所要解决的另一个技术问题是提供了一种应用前述试剂盒定性及半定量检测血清或尿液中百草枯的方法。本专利技术所要解决的技术问题是通过以下的技术方案来实现的。本专利技术是一种定性及半定量检测血清或尿液中百草枯的试剂盒,其特点是,它由以下物品构成:(1)反应管,2个;所述反应管呈两端开口,反应管的下端呈漏斗状;所述反应管内装有由聚丙烯筛板固定的硅胶粉;(2)试剂管A,1个;所述试剂管A内装有试剂A氢氧化钠0.1g;(3)试剂管B,1个;所述试剂管B内装有试剂B连二亚硫酸钠0.1g;(4)连接管,1根;(5)注射器A,规格2mL,1支;(6)注射器B,规格2mL,1支;(7)蒸馏水,1支;(8)百草枯标准色谱卡,1张;(9)包装盒子1个,泡沫板1块,其大小与包装盒子的底面相同,装于盒子中;泡沫板上有不少于上述物品数量的凹槽,上述各物品分别对应放置于这些凹槽中。进一步地,所述的试剂A还可以是0.1g的碳酸钠。进一步地,所述的反应管是由聚丙烯材料制成的透明管。进一步地,所述的硅胶粉的目数为100~200目。进一步地,所述的反应管、试剂管A及试剂管B均设有刻度线。进一步地,所述的连接管为硅胶连接管。进一步地,所述的百草枯标准色谱卡指示的是使用蒸馏水配制的浓度为0.5μg/mL、1.0μg/mL、2.0μg/mL、4.0μg/mL、6.0μg/mL、8.0μg/mL、10.0μg/mL的百草枯标准溶液所对应的色谱。本专利技术还提供了一种定性及半定量检测血清或尿液中百草枯的方法,其特点是:该方法应用了以上技术方案所述的试剂盒;每次检测其中一种样品;其检测步骤如下:(1)配制试剂:用注射器A吸取蒸馏水将试剂管A与试剂管B中的试剂溶解并定容至刻度线;(2)润洗:用注射器A吸取1ml蒸馏水注入反应管中,取下针头,用连接管将该注射器针筒的下端口与反应管的下端口连接,沿远离该注射器针筒下端口的方向拉动该注射器推杆,使蒸馏水通过反应管;(3)注入样品:用注射器B抽取1mL血清或尿液样品,注入反应管中,取下针头,用连接管将该注射器针筒的下端口与反应管的下端口连接,沿远该离注射器针筒下端口的方向拉动该注射器推杆,使样品通过反应管;再按照步骤(2)的操作,使蒸馏水通过反应管,用以去除血清或尿液样品中的废物;(4)反应:用注射器A吸取蒸馏水将注射器B清洗2~3次;用注射器B吸取0.5mL试剂管A中溶液注入反应管中,然后取下该注射器针头,用连接管将该注射器针筒的下端口与反应管的下端口连接,沿远离该注射器针筒下端口的方向拉动该注射器推杆,待反应管中溶液下降至反应管刻度线处,停止拉动,取下该注射器针筒;再次用注射器A吸取蒸馏水将注射器B清洗2~3次;用注射器B吸取0.2mL试剂管B中溶液注入反应管中,静置5分钟,观察结果;(5)检测:若反应管中显蓝色,则说明血清或尿液中含有百草枯,颜色越深含量越高;若反应管中无颜色变化,则样品中不含百草枯或百草枯浓度低于0.5μg/mL,此时可以更换新的反应管,将样品注入量增加至2~20mL,继续重复上述步骤(2)~(4),若反应管中仍然无颜色变化,则表明样品中不含百草枯;(6)比对:将步骤(5)得到的反应管中的颜色与百草枯标准色谱卡进行比对,即可大致判断样品中百草枯的含量。本专利技术所述的百草枯标准色谱卡是应用以上技术方案所述的试剂盒(试剂盒内含有除百草枯标准色谱卡以外的其他物品)制作出来的。在制作过程中,本专利技术的专利技术人经过多次试验,将健康人血清、健康人尿液和蒸馏水配制的相同梯度浓度的百草枯标准溶液所对应的色谱做了对比,发现血清和尿液样品中的其他组分不会对百草枯的含量造成干扰,使用健康人血清和健康人尿液配制的某一浓度的百草枯标准溶液与使用蒸馏水配制的同一浓度的百草枯标准溶液在反应管中呈现的颜色是等同的。因此,选择使用无污染、更容易获得的蒸馏水配制百草枯标准溶液来制作百草枯标准色谱卡。本专利技术所述的百草枯标准色谱卡的制作方法:用蒸馏水配制浓度为0.5μg/mL、1.0μg/mL、2.0μg/mL、4.0μg/mL、6.0μg/mL、8.0μg/mL、10.0μg/mL的百草枯标准溶液;分别准确移取各浓度的百草枯标准溶液1.0mL,用以代替样品,使用以上技术方案所述的试剂盒(试剂盒内含有除百草枯标准色谱卡以外的其他物品),按照上述一种快速定性及半定量检测血清或尿液中百草枯的方法中的步骤(1)~(5),制备不同浓度下的显色管,各管所对应的颜色即为标准色谱;再通过印刷技术将标准色谱制成百草枯标准色谱卡。本专利技术所述的一种定性及半定量检测血清或尿液中百草枯的方法中,若仅需要定性检测血清或尿液中的百草枯,则可以应用以上技术方案所述的试剂盒,按照上述一种定性及半定量检测血清或尿液中百草枯的方法所述的步骤(1)~(5)进行操作即可。与现有技术相比,本专利技术将适量本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种定性及半定量检测血清或尿液中百草枯的试剂盒,其特征在于,它由以下物品构成:(1)反应管,2个;所述反应管呈两端开口,反应管的下端呈漏斗状;所述反应管内装有由聚丙烯筛板固定的硅胶粉;(2)试剂管A,1个;所述试剂管A内装有试剂A氢氧化钠0.1g;(3)试剂管B,1个;所述试剂管B内装有试剂B连二亚硫酸钠0.1g;(4)连接管,1根;(5)注射器A,规格2mL,1支;(6)注射器B,规格2mL,1支;(7)蒸馏水,1支;(8)百草枯标准色谱卡,1张;(9)包装盒子1个,泡沫板1块,其大小与包装盒子的底面相同,装于盒子中 ;泡沫板上有不少于上述物品数量的凹槽,上述各物品分别对应放置于这些凹槽中。

【技术特征摘要】
1.一种定性及半定量检测血清或尿液中百草枯的试剂盒,其特征在于,它由以下物品
构成:
(1)反应管,2个;
所述反应管呈两端开口,反应管的下端呈漏斗状;所述反应管内装有由聚丙烯筛板固
定的硅胶粉;
(2)试剂管A,1个;
所述试剂管A内装有试剂A氢氧化钠0.1g;
(3)试剂管B,1个;
所述试剂管B内装有试剂B连二亚硫酸钠0.1g;
(4)连接管,1根;
(5)注射器A,规格2mL,1支;
(6)注射器B,规格2mL,1支;
(7)蒸馏水,1支;
(8)百草枯标准色谱卡,1张;
(9)包装盒子1个,泡沫板1块,其大小与包装盒子的底面相同,装于盒子中;泡沫板上
有不少于上述物品数量的凹槽,上述各物品分别对应放置于这些凹槽中。
2.根据权利要求1所述的一种定性及半定量检测血清或尿液中百草枯的试剂盒,其特
征在于,所述的试剂A还可以是0.1g的碳酸钠。
3.根据权利要求1所述的一种定性及半定量检测血清或尿液中百草枯的试剂盒,其特
征在于,所述的反应管为是由聚丙烯材料制成的透明管。
4.根据权利要求1所述的一种定性及半定量检测血清或尿液中百草枯的试剂盒,其特
征在于,所述的硅胶粉的目数为100~200目。
5.根据权利要求1所述的一种定性及半定量检测血清或尿液中百草枯的试剂盒,其特
征在于,所述的反应管、试剂管A及试剂管B均设有刻度线。
6.根据权利要求1所述的一种定性及半定量检测血清或尿液中百草枯的试剂盒,其特
征在于,所述的连接管为硅胶连接管。
7.根据权利要求1所述的一种定性及半定量检测血清或尿液中百草枯的试剂盒,其特
征在于,所述的百草枯标准色谱卡指示的是使用蒸馏水配制的浓度为0.5μg/mL、1.0μg/mL、
2.0μg/mL、4.0μg/mL、6.0μg/mL、8.0μg/mL、10....

【专利技术属性】
技术研发人员:沙鸥陈晓兵陈丽李小民马卫兴王苏南
申请(专利权)人:江苏省海洋资源开发研究院连云港
类型:发明
国别省市:江苏;32

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