本发明专利技术属生物医药技术领域，具体涉及亚甲蓝在百草枯中毒早期对肝损伤保护中的一种治疗方法。主要用于治疗由于误服百草后引起的急性中毒后造成的肝损伤；从形态学特征、生化检测指标等证实，应用亚甲蓝后，能有效减轻百草枯中毒后造成的肝组织形态学损伤，对肝损伤具有很好地保护作用；通过抗氧化作用实现对百草枯诱导的急性肝损伤的保护作用。
【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术属生物医药
，具体涉及。主要用于治疗由于误服百草后引起的急性中毒后造成的肝损伤；从形态学特征、生化检测指标等证实，应用亚甲蓝后，能有效减轻百草枯中毒后造成的肝组织形态学损伤，对肝损伤具有很好地保护作用；通过抗氧化作用实现对百草枯诱导的急性肝损伤的保护作用。【专利说明】
本专利技术公开了，属于生 物医药领域。
技术介绍
百草枯（paraquat，PQ)是广泛使用的除草剂之一，因缺乏有效救治方法，口服病 死率很高。肝脏是百草枯中毒的重要靶器官。在临床救治中，患者常出现黄疸、肝功能异常 甚至肝衰竭等严重症状，百草枯中毒并发肝损害是病情严重、预后不佳的表现。氧化应激在 急性百草枯中毒引起的肝损伤中发挥了重要作用。目前，对于急性百草枯中毒引起的肝损 伤，临床上仍缺乏有效的药物干预。由于传统抗氧化剂的自身缺陷，尚无特效解毒剂。如 超氧化物歧化酶和过氧化物酶因无法穿过生物膜而作用受限。维生素 C因加速羟自由基 (OH ·)的产生，而加重氧化损伤。亚甲蓝（MB)是一个新型抗氧化剂，体外实验发现MB可竞 争性抑制PQ还原，能直接从呼吸链上的烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（还原态）（NADH)、还原性辅 酶II (NADPH)和蛋白结合性载体（FADH2)获取电子，转变为还原型MBH2MB，对氧自由基诱导 的中枢神经系统疾病有重要保护作用。MB还能够减轻PQ诱导的急性肝损伤，为治疗PQ中 毒患者提供新方法。
技术实现思路
： 本专利技术公开了，用于治 疗误服百草枯中毒后早期对肝脏的保护作用。 本专利技术通过以下实验证明亚甲蓝在百草枯中毒早期对肝损伤保护中的一种 治疗方法：将24只清洁级雄性成年大鼠随机分为正常组、亚甲蓝（MB)组、百草枯（PQ) 组和亚甲蓝治疗（PQ+MB)组，每组6只。腹腔内注射PQ 35mg/kg建立大鼠中毒模型， PQ+MB组大鼠于造模2h后给予MB 2mg/kg，NS组大鼠给予等量无菌生理盐水。治疗后 48h收集大鼠血清检测谷丙转氨酶（ALT)、谷草转氨酶（AST)和碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP)，肝脏组织用于病理学分析、血红素加氧酶-I(HO-I)免疫组化、髓过氧 化物酶（myeloperoxidase，ΜΡ0)活性、丙二醛（MDA)含量、超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase, S0D)活性和三磷酸腺苷（Adenosine triphosphate，ATP)含量试剂盒检测。另 取40只大鼠，随机分为NS组、MB组、PQ组和PQ+MB组分析72h死亡率，每组10只。按照上 述分组方法评估72小时内死亡时间和死亡率。 具体实施方法 下面的实例将具体说明本专利技术的操作方法，但不能作为对本专利技术的限定。 PQ组建立大鼠百草枯中毒急性肝损伤模型；PQ+MB组大鼠腹腔注射PQ 35mg/kg， 2h后给予2mg/kg ;NS组大鼠给予0. 5ml等量无菌NS，B组给予0. 5ml等量无菌NS和2mg/ kg。动物造1?和治疗后自由饮食。 MB治疗后48h，将大鼠麻醉、固定，消毒，经胸骨正中纵行剪开胸腔，充分暴露心 脏，14号针头插入心尖搏动最强处连接5ml -次性真空采血管进行心脏采血，血清用于肝 生化指标ALT、AST和ALP检测。然后沿腹正中线剪开腹腔，充分暴露腹部脏器，然后剪下左 侧肝脏于10%甲醛固定HE染色，右侧肝脏剪下用于相关指标MPO活性、MDA含量、SOD活性 和ATP含量检测。 1肝组织病理学观察：将取下的左侧肝叶浸泡于10%中性甲醛溶液中固定48h， 然后梯度脱水，二甲苯透明，石赌包埋，5 μπι切片，经苏木素伊红（hematoxylin eosin, HE) 染液染色光学显微镜下观察肝损伤程度。正常组和MB组肝细胞结构清晰，肝索排列整齐， 中央静脉无明显淤血，未见病理改变。光学显微镜下，百草枯染毒组肝细胞结构紊乱，中央 静脉淤血，窦间隙变窄，肝细胞肿大，红细胞渗出明显。PQ+MB组肝索排列，淤血程度，窦间隙 狭窄，红细胞渗出等较PQ组明显减轻。说明经MB治疗后，从形态学来看，亚甲蓝对肝细胞 具有很好的保护作用。MB有效减轻PQ造成的肝组织形态学损伤，延长大鼠生存时间。 2血清生化指标检测：心脏采血后使用低温离心机3200r/min进行离心5min，取 上清液通过生化分析仪进行生化指标ALT、AST和ALP的分析。与正常组和MB组比较，PQ 组大鼠血清中ALT和ALP明显降低（P〈0. 05)，AST变化不明显，与PQ组比较，通过MB治疗 后PQ+MB组ALT和ALP明显升高（P〈0. 05)，见表1。MB治疗后能够改变上述生化指标变化， 减轻肝病理形态学变化，对PQ诱导的大鼠急性肝损伤发挥保护作用。 表1肝损伤的血清生化指标检测 【权利要求】1. 。2. 根据权利要求1所述的， 其特征在于：亚甲兰应用时间为百草枯急性中毒后0?lh ;用量为2mg/kg ;应用方法为静 脉注射。【文档编号】A61P1/16GK104490892SQ201410724436【公开日】2015年4月8日 申请日期:2014年12月2日 优先权日:2014年12月2日 【专利技术者】范红斌, 庞庆丰, 杜斌, 陈俊良 申请人:江南大学本文档来自技高网...
【技术保护点】
亚甲蓝在百草枯中毒早期对肝损伤保护中的一种治疗方法。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：范红斌，庞庆丰，杜斌，陈俊良，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32
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