血液筛查试剂盒、方法及装置制造方法及图纸

本发明专利技术提供了一种能够检测病毒试剂盒、一种血液筛查方法及其装置。本发明专利技术提供的试剂盒包括以下6对引物中的至少2对：SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2，SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：4，SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：6，SEQ ID NO：7和SEQ ID NO：8，SEQ ID NO：9和SEQ ID NO：10以及SEQ ID NO：11和SEQ ID NO：12。利用本发明专利技术的试剂盒、方法或装置，能够检测出病毒载量较低的样品，而且检测结果准确，另外，检测成本低、耗时短。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物检测领域，特别是用于筛查血液中病毒的试剂盒、血液筛查方法及其装置。
技术介绍
通过血液可以传播乙型肝炎、丙型肝炎、艾滋病和梅毒等多种严重的传染病，为保障临床用血的安全、血液制品的质量、防止供受血之间的交叉感染和采血及血液制品工作者的健康，必须对血源进行严格的病原体筛查。近年来随着生物医学和检验技术的进展，输血及血液制品安全性有了很大的改善，但经血源性传播的病毒性疾病残余风险度依然很高。目前，广泛应用于临床血液筛检的主要是酶联免疫反应技术(ELISA，Enzyme—LinkedImmunosorbnentAssay)。随着单克隆抗体的应用及灵敏度更高的发光平台的建立，其灵敏度和特异性在不断地改进和提高，并在一定程度上减少了血源传播病毒性疾病的概率，但每年仍有少数新发输血后肝炎病例报道。除了受免疫学诊断方法的灵敏度及与生俱来的限制，病毒感染者“窗口期”献血、病毒变异、免疫静默感染以及人工操作错误等危险因素也会导致阳性病毒血样的漏检，且漏检率较高。所说的窗口期，一般指病毒进入人体后，需要经过一段时间人体血液才能出现该病毒的抗体，在此期间抗体检测呈阴性，这段时间即为窗口期。ELISA检测的“窗口期”较长，目前检测HBV、HCV及HIV病毒的平均窗口期分别为：HBV：56天，HCV：70天，HIV：22天。因此ELISA技术“窗口期”漏检是当前影响血液安全性进一步提高的瓶颈。故单纯ELISA检测已不能有效地保障血液安全。近几年来，随着以核酸检测(Nucleicacidtest，NAT)为代表的分子生物学技术在血液筛查方面的应用，输血及血制品安全性有了很大的提高。其灵敏度和特异性均高于免疫学方法，在病毒感染后数天即能检出，可大大缩短“窗口期”。有研究表明核酸检测HBV，HCV，HIV病毒的窗口期较免疫学抗体检测分别提前：9天、25天、14天。而且应用NAT技术筛查献血员，相应的可将献血员传播以上病毒性疾病的概率分别降低42％、72％和50％。虽然NAT技术从理论上不能完全消除感染的“窗口期”，但也可以有效地预防经输血传播病毒性疾病。目前，为寻求一种更适合的NAT技术，各国根据自身需求，正在对各种不同的技术组合进行评估。目前市面上用于临床血筛的NAT技术大都基于定量PCR，其中应用最多最常见的两种NAT技术是PCR-ELISA和荧光-PCR(TaqMan技术)。这些技术虽然大大缩短了窗口期，降低了血源传播病毒性疾病的概率，但由于所单独采用PCR方法本身的缺点，例如对于痕量病原可能不能很好地检出，检测周期也比较长。而且目前国内血源筛查难以一次全面的筛查各种病毒。
技术实现思路
本专利技术一方面提供了一种试剂盒，其包括以下6对引物中的至少2对：SEQIDNO：1和SEQIDNO：2，SEQIDNO：3和SEQIDNO：4，SEQIDNO：5和SEQIDNO：6，SEQIDNO：7和SEQIDNO：8，SEQIDNO：9和SEQIDNO：10以及SEQIDNO：11和SEQIDNO：12。本专利技术的另一方面提供了上述试剂盒在筛查血液中的病毒的用途。利用本专利技术的这一试剂盒可以筛查出或者说能够一次性筛查出的病毒包括HBV、HCV、HIV、TP、CMV和HTLV。本专利技术的再一方面提供了一种血液筛查方法，该方法包括：(1)提取血液血浆中的核酸；(2)利用本专利技术一方面提供的试剂盒包含的引物，扩增(1)中的核酸中的病毒核酸，获得扩增产物；(3)对(2)中的扩增产物进行序列测定，获得病毒测定序列；(4)依据(3)中的病毒测定序列，确定所述血液中的病毒种类。所说的病毒核酸来自以下至少之一的病毒：HBV、HCV、HIV、TP、CMV和HTLV。本专利技术的又一方面，提供了一种血液筛查装置，该装置包括：A.核酸提取单元，用以获取血浆/血清中的核酸；B.扩增单元，与A连接，用于利用本专利技术一方面提供的一试剂盒包含的引物扩增出A中的核酸中的病毒核酸，获得扩增产物；C.序列测定单元，与B连接，用于对B中的扩增产物进行序列测定，获得病毒测定序列；D.病毒种类确定单元，与C连接，用于接收利用来自C的病毒测定序列，确定该血液中的病毒种类。利用本专利技术提供的试剂盒、血液筛查方法或血液筛查装置，能够一次性检测出HBV、HCV、HIV、TP、CMV及HTLV的任意几种或者全部六种。本专利技术提供的这种基于新一代测序技术的用于辅助临床诊断的试剂盒、血源筛查技术或装置，能够在保证筛查检测灵敏度、特异性及稳定性的前提下，还缩短目标病毒检测窗口期，并且提高了检测周期，利用本专利技术的试剂盒、方法或装置检测血液样本，灵敏度是100拷贝的病毒，换算到血浆的话灵敏度大概是1000拷贝/mL，大概比目前市售试剂盒检测灵敏度灵敏一个数量级。附图说明本专利技术的上述和/或附加的方面和优点从结合下面附图对实施方式的描述中将变得明显和容易理解，其中：图1是本专利技术的一个具体实施方式中的血液病毒筛查流程图；图2是本专利技术的一个具体实施方式中的血液筛查装置示意图；图3是本专利技术的一个具体实施方式中的信息分析流程图；图4是本专利技术的一个具体实施方式中的CMV检出结果图。具体实施方式根据本专利技术一个实施方式，提供了一种试剂盒，其包括以下6对引物中的至少2对：SEQIDNO：1和SEQIDNO：2，SEQIDNO：3和SEQIDNO：4，SEQIDNO：5和SEQIDNO：6，SEQIDNO：7和SEQIDNO：8，SEQIDNO：9和SEQIDNO：10以及SEQIDNO：11和SEQIDNO：12。在本专利技术的一个具体实施方式中，提供的试剂盒包括以下6对引物中的至少3对：SEQIDNO：1和SEQIDNO：2，SEQIDNO：3和SEQIDNO：4，SEQIDNO：5和SEQIDNO：6，SEQIDNO：7和SEQIDNO：8，SEQIDNO：9和SEQIDNO：10以及SEQIDNO：11和SEQIDNO：12。在本专利技术的一个具体实施方式中，提供的试剂盒包括以下6对引物中的至少4对：SEQIDNO：1和SEQIDNO：2，SEQIDNO：3和SEQIDNO：4，SEQIDNO：5和SEQIDNO：6，SEQIDNO：7和SEQIDNO：8，SEQIDNO：9和SEQIDNO：10以及SEQIDNO：11和SEQIDNO：12。在本专利技术的一个具体实施方式中，提供的试剂盒包括以下6对引物中的至少5对：SEQIDNO：1和SEQIDNO：2，SEQIDNO：3和SEQIDNO：4，SEQIDNO：5和SEQIDNO：6，SEQIDNO：7和SEQIDNO：8，SEQIDNO：9和SEQIDNO：10以及SEQIDNO：11和SEQIDNO：12。在本专利技术的一个具体实施方式中，提供的试剂盒包括以下6对引物：SEQIDNO：1和SEQIDNO：2，SEQIDNO：3和SEQIDNO：4，SEQIDNO：5和SEQIDNO：6，SEQIDNO：7和SEQIDNO：8，SEQIDNO：9和SEQIDNO：10以及SEQIDN本文档来自技高网...

【技术保护点】
试剂盒，其包括以下6对引物中的至少2对：SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2，SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：4，SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：6，SEQ ID NO：7和SEQ ID NO：8，SEQ ID NO：9和SEQ ID NO：10以及SEQ ID NO：11和SEQ ID NO：12。

【技术特征摘要】
1.试剂盒，其包括以下6对引物中的至少2对：SEQIDNO：1和SEQIDNO：2，SEQ
IDNO：3和SEQIDNO：4，SEQIDNO：5和SEQIDNO：6，SEQIDNO：7和SEQIDNO：
8，SEQIDNO：9和SEQIDNO：10以及SEQIDNO：11和SEQIDNO：12。
2.权利要求1的试剂盒，其包括以下6对引物中的至少3对：SEQIDNO：1和SEQIDNO：
2，SEQIDNO：3和SEQIDNO：4，SEQIDNO：5和SEQIDNO：6，SEQIDNO：7和SEQ
IDNO：8，SEQIDNO：9和SEQIDNO：10以及SEQIDNO：11和SEQIDNO：12。
3.权利要求1的试剂盒，其包括以下6对引物中的至少4对：SEQIDNO：1和SEQIDNO：
2，SEQIDNO：3和SEQIDNO：4，SEQIDNO：5和SEQIDNO：6，SEQIDNO：7和SEQ
IDNO：8，SEQIDNO：9和SEQIDNO：10以及SEQIDNO：11和SEQIDNO：12。
4.权利要求1的试剂盒，其包括以下6对引物中的至少5对：SEQIDNO：1和SEQIDNO：
2，SEQIDNO：3和SEQIDNO：4，SEQIDNO：5和SEQIDNO：6，SEQIDNO：7和SEQ
IDNO：8，SEQIDNO：9和SEQIDNO：10以及SEQIDNO：11和SEQIDNO：12。
5.权利要求1的试剂盒，其包括以下6对引物：SEQIDNO：1和SEQ...

【专利技术属性】
技术研发人员：姚雪，周加利，栗东方，吴红龙，
申请(专利权)人：天津华大基因科技有限公司，深圳华大基因医学有限公司，
类型：发明
国别省市：天津;12