用于治疗、诊断和预后血液系统恶性肿瘤的方法技术方案

本发明专利技术涉及用于预防和/或治疗血液系统恶性肿瘤的5‑羟色胺受体(5‑HTR)抑制剂，其选自1型5‑HTR抑制剂和2型5‑HTR抑制剂。另外，本发明专利技术涉及基于检测1型5‑HTR和/或2型5‑HTR的表达，用于识别或分离来自血液系统恶性肿瘤的恶性肿瘤细胞、或用于诊断血液系统恶性肿瘤的体外方法。而且，本发明专利技术涉及基于测定1型5‑HTR和/或2型5‑HTR的水平，用于测定预后、用于监测疗法效果或为遭受血液系统恶性肿瘤的对象设计定制疗法的体外方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及治疗、诊断和预后方法的领域。
技术介绍
血液系统或造血系统恶性肿瘤是血液或骨髓的癌症，包括白血病和淋巴瘤。白血病的特征在于血细胞的不受控制的积累，其可以分为四种类型：急性淋巴细胞性白血病(ALL)、急性髓细胞性白血病(AML)、慢性淋巴细胞性白血病(CLL)和慢性髓细胞性白血病(CML)。急性髓性白血病(AML)，还被称为非淋巴性、成髓细胞性、粒细胞性或髓细胞性白血病，影响包括粒细胞和单核细胞在内的各种白细胞。急性白血病是一种快速进展的疾病，其导致不成熟的、无功能的细胞在骨髓和血液中积累；骨髓常常停止产生足够的传播至肝脏、脾脏、淋巴结、中枢神经系统、肾脏和生殖腺的正常红细胞、白细胞和血小板以及白血病细胞。结果，AML患者可以显露AML的一种或多种症状，比如，例如贫血、疲劳、类流感症状、骨痛、食欲不振、体重减轻、容易擦伤、出血和易于感染。在全世界，每年有多于1/25万的成年人被诊断为患有急性髓性白血病(AML)。尽管在过去30年期间对AML的治疗取得了相当大的进展，但是2/3的青少年和90％的老年人仍然死于该疾病。来自患有血液系统恶性肿瘤的患者并且尤其是患有AML的患者的经历表明全身血浆/血清细胞因子分布型(cytokineprofile)可以用做患者的诊断工具和用于患者的预后二者。但是，细胞因子/趋化因子由多种不同的细胞释放并且在多种不同的生物过程中涉及；改变的水平可以因此主要反映生物过程的强度和性质，并且细胞因子/趋化因子分析的最佳临床应用可能因此需要与器官特异性生物标记结合。趋化因子水平还被临床程序、治疗干扰和患者的一般状态改变(ReikvamH.等，Toxins(Basel).Feb2013；5(2)：336-362)。因此，新型诊断和预后方法对于建立血液系统恶性肿瘤的最佳评估和管理是必需的。AML的当前治疗方法可以包括化学疗法、放射疗法、免疫疗法、输血和骨髓移植。早期治疗主要依靠阿糖胞苷(ara-C)与蒽环类抗生素结合，其在将近40年前被开发并且一直是全球治疗标准，或者可选地，3到8种药物比如例如阿糖胞苷、道诺霉素(daunorubicin)、伊达比星(idarubicin)、巯鸟嘌呤、米托蒽醌(mitoxantrone)、依托泊甙和氨甲喋呤的组合。虽然当前的化学疗法可以导致完全缓解，但是白血病——尤其是AML——的长期无病生存率是低的。可选的治疗方法涉及开发低毒的和更有效的疗法。多种新型化学治疗剂已经在AML中被评估，包括拓扑异构酶I抑制剂比如拓扑替康(topotecan)和喜树碱(campothecin)，含铂药剂(卡铂)和新型抗代谢物，包括吉西他滨(gemcitabine)、曲沙他滨(troxcitabine)和氯法拉滨(clofarabine)(SmithM，等，CriticalReviewsinOncology/Hematology.2004；50(3)：197-222)。所有这些药剂对白血病母细胞(blast)具有活性但是其应用仍有待调查。使用环孢霉素A或PSC833阻断MDR-1没有证明是有益的并且可能增加毒性或者迫使剂量降低，并且从而降低整体化疗暴露(LarsonRA.等，Leukemia2003；17：488-91)。由于化学疗法还通常杀死正常细胞，因此接受化学疗法的患者通常经历副作用，比如，例如恶心、疲劳和更高的感染风险。因此，存在对用于治疗血液系统恶性肿瘤——包括白血病——的具有降低毒性的有效疗法的明确和未满足的需要。
技术实现思路
在第一方面，本专利技术涉及用于预防和/或治疗血液系统恶性肿瘤的5-羟色胺受体(5-HTR)抑制剂，其选自1型5-HTR抑制剂和2型5-HTR抑制剂。在第二方面，本专利技术涉及用于在选自骨髓、血液和淋巴结的样本中识别来自血液系统恶性肿瘤的恶性肿瘤细胞的体外方法，所述方法包括在所述细胞中检测1型5-HTR和/或2型5-HTR的表达。在第三方面，本专利技术涉及用于诊断对象中的血液系统恶性肿瘤的体外方法，其包括通过本专利技术的方法识别恶性肿瘤细胞。在第四方面，本专利技术涉及用于在选自骨髓、血液和淋巴结的样本中分离来自血液系统恶性肿瘤的恶性肿瘤细胞的体外方法，所述方法包括在所述细胞中检测1型5-HTR和/或2型5-HTR的表达和分离表达所述5-HTR的所述细胞。在第五方面，本专利技术涉及用于测定遭受血液系统恶性肿瘤的对象的预后的体外方法，其包括：(a)测定来自所述对象的选自骨髓、血液和淋巴结的样本的细胞中1型5-HTR和/或2型5-HTR的表达水平，和(b)将所述水平与参比值进行比较其中1型5-HTR和/或2型5-HTR的表达水平相对于参比值的降低表明对象示出了良好预后，或者其中1型5-HTR和/或2型5-HTR的表达水平相对于参比值的增加表明对象示出了不良预后。在第六方面，本专利技术涉及用于监测遭受血液系统恶性肿瘤和用疗法治疗的对象中所述疗法的效果的体外方法，其包括：a)测定来自所述对象的选自骨髓、血液和淋巴结的样本的细胞中1型5-HTR和/或2型5-HTR的表达水平，和b)将所述水平与更早时间点处来自所述对象的样本的细胞中1型5-HTR和/或2型5-HTR的表达水平进行比较其中1型5-HTR和/或2型5-HTR的表达水平相对于更早时间点处来自所述对象的样本中测定的水平的降低表明疗法是有效的，或者其中1型5-HTR和/或2型5-HTR的表达水平相对于更早时间点处来自所述对象的样本中测定的水平的增加表明疗法是无效的。在第七方面，本专利技术涉及用于为诊断患有血液系统恶性肿瘤的对象设计定制疗法的体外方法，其包括：a)测定来自所述对象的选自骨髓、血液和淋巴结的样本中表达1型5-HTR和/或2型5-HTR的细胞的水平b)将所述水平与参比值进行比较其中表达1型5-HTR和/或2型5-HTR的细胞的水平相对于参比值的增加表明对象要用1型5-HTR抑制剂和/或2型5-HTR抑制剂治疗。附图说明图1.阿扑吗啡治疗降低AML细胞活力。在完全RPMI培养基中每mL106个HL-60、KG-1、MonoMac-1和Kasumi-1细胞用0.1、1和10μM阿扑吗啡治疗72h。细胞在37℃和5％CO2下培育。细胞用7-氨基放线菌素D(7-AAD，CAS号7240-37-1)和Hoechst33342(CAS号23491-52-3)染色并通过流式细胞术分析。核细胞(nuclearcell)通过Hoechst正染色鉴定，而死细胞通过7-AAD正染色排除。细胞数目通过容量计数(volumetriccount)计算。A.代表了来自每个AML细胞系的平均值(符号)和来自6个不同的生物复制的标准偏差(误差线)。B.代表了与四种不同的AML细胞系对应的平均值。*p＜0.05。图2.1型和2型5HTR拮抗剂诱导AML细胞系的细胞死亡。将每mL106个HL-60、KG-1、MonoMac-1和Kasumi-1AML细胞系用0.1、1和10μM的阿扑吗啡、甲硫替平(Methiothepin)、安哌齐持(Amperozide)或GR113808在37℃和5％CO2下培育。核细胞通过Hoechst正染色鉴定，而死细胞通过7-AAD正染色排除。细胞数目通过容量计数计算。A.本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于预防和/或治疗血液系统恶性肿瘤的5‑羟色胺受体(5‑HTR)抑制剂，其选自1型5‑HTR抑制剂和2型5‑HTR抑制剂。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.06.27 EP 14382249.21.一种用于预防和/或治疗血液系统恶性肿瘤的5-羟色胺受体(5-HTR)抑制剂，其选自1型5-HTR抑制剂和2型5-HTR抑制剂。2.根据权利要求1使用的5-HTR抑制剂，其中所述抑制剂选自阿扑吗啡、甲硫替平、安哌奇特和其药学上可接受的盐。3.根据权利要求1或2中任一项使用的5-HTR抑制剂，其中所述抑制剂是1型5-HTR抑制剂。4.根据权利要求1-3中任一项使用的5-HTR抑制剂，其中所述血液系统恶性肿瘤是白血病。5.根据权利要求4使用的5-HTR抑制剂，其中所述白血病是急性髓性白血病(AML)。6.一种用于识别选自骨髓、血液和淋巴结的样本中来自血液系统恶性肿瘤的恶性肿瘤细胞的体外方法，所述方法包括检测所述细胞中1型5-HTR和/或2型5-HTR的表达。7.一种用于诊断对象中血液系统恶性肿瘤的体外方法，其包括通过根据权利要求6所述的方法识别恶性肿瘤细胞。8.一种用于分离选自骨髓、血液和淋巴结的样本中来自血液系统恶性肿瘤的恶性肿瘤细胞的体外方法，所述方法包括检测所述细胞中1型5-HTR和/或2型5-HTR的表达和分离表达所述5-HTR的所述细胞。9.根据权利要求6-8中任一项所述的方法，其中所述1型5-HTR是5-HTR1A和所述2型5-HTR是5-HTR2C。10.根据权利要求6-9中任一项所述的方法，其中所述血液系统恶性肿瘤是白血病。11.根据权利要求10所述的方法，其中所述白血病是急性髓性白血病。12.根据权利要求6-11所述的方法，其中所述血液样本是外周血。13.根据权利要求6-12中任一项所述的方法，其中表达所述1型5-HTR和/或2型5-HTR的细胞通过免疫细胞化学来检测。14.一种用于测定遭受血液系统恶性肿瘤的对象的预后的体外方法，其包括：(a)测定来自所述对象的选自骨髓、血液和淋巴结的样本的细胞中1型5-HTR和/或2型5-HTR的表达水平，和(b)将所述水平与参比值进行比较其中1型5-HTR和/或2型5-HTR的表达水平相对于所述参比值的降低表明对象展示良好预后，或者其中1型5-HTR和/或2型5-HTR的表达水平相对于所述参比值的增加表明对象展示不良预后。15.一种用于监测遭受血液系统恶性肿瘤和用疗法治疗的对象中所述疗法的效果的体外方法，其包括：a)测定来自所述对象的选自骨髓、血液和淋巴结的样本的细胞中1型5-HTR和/或2型5-HTR的表达水平，和b)将所述水平与更早时间点处来自所述对象的样本的细胞中1型5-HTR和/或2型5-HTR的表达水平进行比较，其中1型5-HTR和/或2型5-HTR的表达水平相对于更早时间点处来自所述对象的样本中测定的水平的降低表明所述疗法是有效的，或者其中1型5-HTR和/或2型5-HTR的表达水平相对于更早时间点处来自所...

【专利技术属性】
技术研发人员：R·穆尼奥斯里苏埃尼奥，
申请(专利权)人：约瑟卡雷拉斯白血球过多症研究所，
类型：发明
国别省市：西班牙;ES