一种肺癌的筛查试剂盒制造技术

本发明专利技术公开了一种肺癌的筛查试剂盒，它包括任选的用于检测血液中甲状腺刺激激素表达水平的试剂。本发明专利技术还公开了检测血液中甲状腺刺激激素表达水平的试剂在制备肺癌筛查用试剂中的用途。本发明专利技术试剂盒通过检测甲状腺刺激激素的表达水平，能有效判断待检人群患肺癌的风险，可用于临床肺癌的辅助诊断，为患者采取相关的治疗措施或者决策提供有效的依据，临床应用前景良好。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种肺癌的筛查试剂盒。
技术介绍
肺癌是发病率和死亡率增长最快，对人群健康和生命威胁最大的恶性肿瘤之一。近50年来许多国家都报道肺癌的发病率和死亡率均明显增高，男性肺癌发病率和死亡率均占所有恶性肿瘤的第一位，女性发病率占第二位，死亡率占第二位。非小细胞型肺癌是肺癌中的一类，其约占所有肺癌的80％，约75％的患者发现时已处于中晚期，5年生存率很低。因此，对肺癌进行早期、快速诊断非常重要。目前，肺癌的诊断大都依赖于活体检测肺部组织，但是此种检测方法的操作复杂，对患者的肺损伤极大，而且有可能导致肺癌扩散，存在极大的风险。寻找更为简便、创伤小、副作用小的检测方法亟待解决。甲状腺刺激激素(Thyroid-stimulatinghormone，TSH)，又名促甲状腺激素，是腺垂体分泌的促进甲状腺的生长和机能的激素。人类的TSH为一种糖蛋白，含211个氨基酸，糖类约占整个分子的15％。整个分子由两条肽链——α链和β链组成。TSH全面促进甲状腺的机能，稍早出现的是促进甲状腺激素的释放，稍晚出的为促进T4、T3的合成，包括加强碘泵活性，增强过氧化物酶活性，促进甲状腺球蛋白合成及酪氨酸碘化等各个环节。现有文献(薛荣梅等，肺癌患者血清甲状腺激素的变化及临床意义，现代肿瘤医学2015年4月第23卷第8期)报道，采用用放射免疫分析法检测人血浆中TSH的含量与健康人无显著差异，无法区分肺癌患者和健康人。
技术实现思路
为了解决上述问题，本专利技术提供了一种创伤小、副作用小、便于使用的肺癌检测试剂盒。本专利技术提供了肺癌的筛查试剂盒，它包括用于检测血液中甲状腺刺激激素表达水平的试剂；所述检测血液中甲状腺刺激激素表达水平的试剂是ELISA检测用试剂。本专利技术还提供了检测血液中甲状腺刺激激素表达水平的试剂在制备肺癌筛查用试剂中的用途；所述检测血液中甲状腺刺激激素表达水平的试剂是ELISA检测用试剂。与
技术介绍
的启示相反，本专利技术采用ELISA检测方法检测血液中的甲状腺刺激激素表达水平时，发现其在肺癌患者与正常健康人群中的表达有显著差异。本专利技术试剂盒通过检测甲状腺刺激激素的表达水平，可以判断待检人群患肺癌的风险：若甲状腺刺激激素的表达水平高，则患肺癌的风险高，若甲状腺刺激激素的表达水平低，则患肺癌的风险低，可用于临床肺癌的辅助诊断，本专利技术试剂盒仅仅只需采集待检样本的血液，就可以筛查其患肺癌的风险，创伤小、副作用小、使用方便，临床应用前景良好。显然，根据本专利技术的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本专利技术上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。以下通过实施例形式的具体实施方式，对本专利技术的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本专利技术上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本专利技术上述内容所实现的技术均属于本专利技术的范围。附图说明图1肺癌患者/健康对照血浆检测结果图2TSH敏感度及特异性分析具体实施方式实施例1甲状腺刺激激素的表达水平与肺癌的关系一、实验方法1、样本临床资料选取肺癌患者207例，健康对照90例，其临床资料如下：2、血液中甲状腺刺激激素(TSH)表达水平的检测方法2.1血液分离抽取临床患者及健康对照血液，EDTA抗凝后离心(1200rpm，10min)，将上清吸取后进行第二次离心(3000rpm，15min)，吸取上清分装后-80度保存；2.2ELISA检测TSHELISA试剂盒(HumanTSHELISAKit,Catalog#:ELH-TSH)检测步骤：(1)标准品、检测标本100μl/孔加到96孔板中，用样品稀释液为空白对照，封板后室温孵育2.5小时；(2)弃上清液，加入300μlWashbuffer洗涤3次，吸水纸上将残余液体拍干；(3)加入100μl/孔生物素标记抗体，封板后室温孵育1小时；(4)重复步骤(2)；(5)弃上清液，加入350μlWashbuffer洗涤3次，吸水纸上将残余液体拍干；(6)加入100μl/孔链霉抗生素蛋白溶液，封板后室温孵育45分钟；；(7)重复步骤(2)；(8)加入100μl/孔显色底物，封板后37℃避光孵育30分钟；(9)加入50μl/孔终止液后在酶标仪上450nm波长读板。2.3结果统计(1)样本浓度：酶标仪根据标准品浓度及吸光值，自动算出各样品浓度；(2)差异性分析：采用SPSS17.0对实验组(肺癌患者)和对照组(健康体检人群)进行统计分析，表明TSH在肺癌患者中浓度明显下降，结果具统计学意义(P<0.0001)(图1)；(3)ROC分析：采用SPSS17.0对实验组(肺癌患者)和对照组(健康体检人群)进行分析，TSH的最佳cut-off值为<299pg/ml，AUC为70.0％，与健康对照组相比，TSH诊断特异性为61.8％，敏感度为63.8％(图2)；(4)图片制作：用GraphPadPrism5.0软件完成。3、血浆中甲状腺刺激激素的表达水平与肺癌的相关性检测结果如下表1和图1～2：表1血浆中甲状腺刺激激素与肺癌的相关性甲状腺刺激激素的表达平均水平健康对照287.1pg/ml肺癌患者452.6pg/ml经过统计学分析，二者的差异显著(p<0.0001,ANOVA)。由表1和图1可以看出，与健康人群相比，肺癌患者的血液中TSH表达水平明显升高，且差异极显著(P<0.0001)；由图2可以看出，TSH最佳cut-off值为<299pg/ml，AUC为70.0％，与健康对照组相比，TSH的诊断特异性为61.8％，敏感度为63.8％。由以上结果可以看出，采用本专利技术试剂检测检测血浆中的甲状腺刺激激素的表达水平时，与健康人群相比，肺癌患者的甲状腺刺激激素表达水平显著降低(p<0.0001)，说明肺癌与血液中甲状腺刺激激素的表达水平呈负相关，血液中甲状腺刺激激素的低表达会显著提高患肺癌的可能性。因此，可以通过检测待检人群血液中甲状腺刺激激素的表达水平，将肺癌的易感人群筛查出来。实施例2本专利技术检测血液甲状腺刺激激素的试剂盒的组成及其使用方法一、ELISA检测试剂盒1、试剂盒的组成检测试剂盒(50人份)：组分体积捕获抗体(Captureantibody)5ml(4.0ug/ml)甲状腺刺激激素标准品(TSHstandard)2ml本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种肺癌的筛查试剂盒，其特征在于：它包括用于检测血液中甲状腺刺激激素表达水平的试剂；所述检测血液中甲状腺刺激激素表达水平的试剂是ELISA检测用试剂。

【技术特征摘要】
1.一种肺癌的筛查试剂盒，其特征在于：它包括用于检测血液中甲状腺刺激激素表达
水平的试剂；所述检测血液中甲状腺刺激激素表达水平的试剂是ELISA检测用试剂。...

【专利技术属性】
技术研发人员：唐怀蓉，黄燕，雷亚莉，蒋贤雯，唐靖汶，李为民，刘伦旭，张立，刘丹，王业，
申请(专利权)人：四川大学华西医院，
类型：发明
国别省市：四川;51