一种含α‑葡萄糖苷酶基因的重组大肠杆菌及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种含α‑葡萄糖苷酶基因的重组大肠杆菌及其应用，所述重组大肠杆菌是将SEQ ID NO.1所示α‑葡萄糖苷酶基因转入大肠杆菌宿主细胞获得的。本发明专利技术所述生产L‑薄荷醇‑α‑糖苷的含α‑葡萄糖苷酶基因的重组大肠杆菌，能够在胞内高效合成α‑葡萄糖苷酶，以L‑薄荷醇为底物，麦芽糖为辅助底物，高效催化L‑薄荷醇的糖基化反应，反应10‑24小时，可得到大于10％的L‑薄荷醇‑α‑糖苷转化醪液，平均生产强度大于5g·L

Recombinant Escherichia coli containing a alpha glucosidase gene and its application

The invention discloses a recombinant Escherichia coli containing alpha glucosidase gene and its application, the recombinant Escherichia coli is SEQ ID NO.1 shown alpha glucosidase gene into Escherichia coli host cells obtained. Recombinant Escherichia coli containing alpha glucosidase gene of the present invention is the production of L alpha menthol glycosides, capable of intracellular efficient synthesis of alpha glucosidase, with L menthol as substrate, maltose as auxiliary substrate, glycosylation, catalytic reaction of 10 L menthol, 24 hours, can be greater than 10% L alpha menthol glycosides transform mash, the average production strength of more than 5g - L

【技术实现步骤摘要】
一种含α-葡萄糖苷酶基因的重组大肠杆菌及其应用(一)
本专利技术涉及一种含α-葡萄糖苷酶基因的重组大肠杆菌及其生产L-薄荷醇-α-糖苷的应用。(二)
技术介绍
L-薄荷醇为无色透明针状晶体；相对分子质量为156.4，熔点44℃，沸点216.4℃；微溶于水，溶于环己烷、乙醇和苯等常规有机溶剂，其结构式如图1所示。L-薄荷醇具有新鲜、轻快、扩散性的气味和独特的香味，被大量应用于香烟、化妆品、牙膏、漱口液、口香糖、甜食等。此外，L-薄荷醇能刺激皮肤上的冷感器但不导致实际温度变化，发挥局部止痒、止痛、舒张血管、轻微局部麻醉及促进药物渗透的作用，因而亦可用于药物涂擦和局部麻醉等。所以，L-薄荷醇在医药卫生、食品工业和日用精细化工品等方面具有广泛的用途。近年来，国内市场对薄荷醇的需要持续增长，改性L-薄荷醇品质，提高其使用效果，具有重要的经济价值和社会效益。在实际应用中，L-薄荷醇存在一些缺点，包括遇热不稳定；随着时间的推移，其香味和清凉作用会渐渐消失；水中溶解性差，需要用乙醇等有机溶剂溶解后使用。糖基化是针对许多活性小分子物质常用的改性方法，显著提高水溶性的同时增加其稳定性。对于L-薄荷醇的糖本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种含α‑葡萄糖苷酶基因的重组大肠杆菌，其特征在于所述重组大肠杆菌是将SEQ ID NO.1所示α‑葡萄糖苷酶基因转入大肠杆菌宿主细胞获得的。

【技术特征摘要】
1.一种含α-葡萄糖苷酶基因的重组大肠杆菌，其特征在于所述重组大肠杆菌是将SEQIDNO.1所示α-葡萄糖苷酶基因转入大肠杆菌宿主细胞获得的。2.如权利要求1所述含α-葡萄糖苷酶基因的重组大肠杆菌，其特征在于所述α-葡萄糖苷酶基因编码蛋白的氨基酸序列为SEQIDNO.2所示。3.一种权利要求1所述含α-葡萄糖苷酶基因的重组大肠杆菌在制备L-薄荷醇-α-糖苷中的应用。4.如权利要求3所述的应用，其特征在于所述的应用以含α-葡萄糖苷酶基因的重组大肠杆菌经发酵培养获得的发酵液为催化剂，以L-薄荷醇为底物，以麦芽糖为辅助底物，在25-40℃的条件下进行反应，获得含L-薄荷醇-α-糖苷的反应液，将反应液分离纯化获得L-薄荷醇-α-糖苷。5.如权利要求4所述的应用，其特征在于所述发酵液中湿菌体含量为5～100g/L，底物终浓度为5～100g/L发酵液，所述麦芽糖终浓度为300～500g/L发酵液。6.如权利要求4所述的应用，其特征在于所述辅助底物起始投料量为300-400g/L发酵液，反应开始10-12h后补加辅助底物0-100g/L发酵液，继续反应14h，获得L-薄荷醇-α-糖苷转化液。7.如权利要求3所述的应用，其特征在于所述的应用以含α-葡萄糖苷酶基因的重组大肠杆菌经发酵培养获得的发酵液离心收集的湿菌体为催化剂，以L-薄荷醇为底物，以麦芽糖为辅助底物，以pH8.0、10mM硼酸缓冲液...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱林江，陈小龙，范永仙，陆跃乐，陈路易，
申请(专利权)人：浙江工业大学，
类型：发明
国别省市：浙江,33