一种动态调控3‑羟基丙酸合成的工程菌构建方法技术
To construct a dynamic regulation of 3 hydroxy propionic acid synthesis method of engineering bacteria
The invention relates to a dynamic regulation of 3 hydroxy propionic acid (3HP) to construct engineering bacteria synthesis method, which is characterized in that the transcription factor FapR of Bacillus subtilis which is based on the characteristics and malonyl CoA response, the ACC based 3HP synthesis pathway in synthesis of malonyl CoA and malonic acid conversion CoA MCR 3HP is a mono gene set in the promoter according to the transcription of the two genes of malonic acid mono CoA dynamic concentration regulation, regulation of 3HP synthesis of engineering bacteria by malonyl CoA concentration dynamics, solve the malonyl CoA on cell toxicity of 3HP synthesis, the problem of low efficiency and provide technical support for large-scale production of 3HP.
【技术实现步骤摘要】
一种动态调控3-羟基丙酸合成的工程菌构建方法
本专利技术设计一种动态调控3-羟基丙酸(3-Hydroxypropionicacid,3HP)合成的工程菌构建方法，具体涉及了基因工程
技术介绍
随着石油储量的枯竭和环境的恶化，世界各国都在致力于各种可再生能源的研究和开发。3HP是美国能源部提出的可再生生物质中12种增值平台化合物之一。3HP分子含有两个具有不同性质的官能团-羟基和羧基，使其成为许多光学活性物质的前体，如丙烯酸，1,3-丙二醇，3-羟基丙醛和丙二酸等。该化合物在化工行业的应用亦是多样化的，它用作聚合物涂料，金属润滑剂和纺织品抗静电剂等。此外，3HP是用在环化或聚合反应中生产丙内酯、聚酯和低聚物的初始材料，其中由3HP的自缩合产生的聚合物聚3HP酯具有良好的生物相容性和生物降解性，并可用于制造手术产品和药物释放材料。传统的3HP生产一般通过化学方法合成，如β-溴丙酸水解法、2-氰基乙醇酸碱法、3-羟基丙醛氧化法和利用丙烯酸及β-羟基腈合成法等。然而，化学合成3HP具有耗能大、成本高、分离度低、对环境污染大等问题，在商业化生产上不具有可行性。3H...
【技术保护点】
一种动态促进3‑羟基丙酸(3HP)高产的工程菌Escherichia coli 3HP‑0，其保藏编号为CGMCC No.14224。
【技术特征摘要】
1.一种动态促进3-羟基丙酸(3HP)高产的工程菌Escherichiacoli3HP-0，其保藏编号为CGMCCNo.14224。2.一种动态促进3HP高产的工程菌株，实验证明具有提高3HP产量的能力。3.一种动态促进3HP高产的工程菌株，具有缓解丙二酸单酰CoA对菌体毒害的作用。4.权利要求2所述的动态调控3HP合成的工程菌，其特征在于能根据中间产物丙二酸单酰CoA浓度，同时具有动态调控丙二酸单酰CoA合成的乙酰CoA羧化酶基因(acc)和3HP转化为3HP的丙二酸单酰CoA还原酶基因(mcr)的转录的速率，调控丙二酸单酰CoA合成和转化，缓解丙二酸单酰CoA浓度过高对菌体的毒害，同时提高3HP产量。5.权利要求2所述的动态调控3HP合成的工程菌，含有大肠杆菌的accDABC基因和lacI基因，橙色绿屈挠菌的mcr基因，含有枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)的转录因子FapR和受FapR调控的启动子控制器(PFR1)基因序列。6.一种动态调控3HP合成的工程菌构建方法，其特征在于该方法按照以下步骤进行：1)纯化扩增出大肠杆菌中的accDA基因和accB...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘长莉，李玉花，徐启江，刘曦，王宏伟，常乐，
申请(专利权)人：东北林业大学，
类型：发明
国别省市：黑龙江,23
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