表皮生长因子受体Ⅲ型突变体的ELISA检测试剂盒制造技术

本发明专利技术公开了一种表皮生长因子受体Ⅲ型突变体的ELISA检测试剂盒，其关键是应用基因工程技术获取抗EGFRvⅢ的单链抗体并与生物素抗原、亲和素‑HRP和显色液等组成试剂盒的主要组成部分。应用竞争法建立了对细胞、血清或者组织培养物中EGFRvⅢ的检测方法，具有强特异性、高灵敏度、高准确性等优点。该试剂盒可以供一般科研或临床上筛查肿瘤使用。

ELISA kit for detection of epidermal growth factor receptor type III mutants

The invention discloses a ELISA kit for the detection of epidermal growth factor receptor type, the key is to obtain the anti EGFRv antibody of the genetic engineering technology and biotin avidin antigen, HRP and color liquid mainly composed of kit parts. The application of competition law established the detection method in EGFRv III training on serum or tissue cells, with high specificity and high sensitivity, high accuracy, etc.. The kit can be used for general scientific research or clinical screening of tumor.

【技术实现步骤摘要】
表皮生长因子受体Ⅲ型突变体的ELISA检测试剂盒
本专利技术涉及一种快速检测EGFRvⅢ的方法，适用于血清、细胞培养物或组织培养物中EGFRvⅢ的检测。
技术介绍
EGFR是表皮生长因子受体家族成员之一，是一种分子量为170kD的跨膜糖蛋白。广泛分布在哺乳动物上皮细胞、成纤维细胞、胶质细胞、角质细胞等细胞表面且在大多数肿瘤中过表达且表达程度与肿瘤的分化程度及恶性程度密切相关。研究发现EGFR在恶性肿瘤中存在着许多突变体，其中表皮生长因子受体Ⅲ型突变体(EGFRvⅢ)是最常见的缺失突变体。EGFRvⅢ是EGFR的胞外区框内缺失突变所致，与EGFR的完整分子结构相比较，EGFRvⅢ胞外区的2-7外显子被删除掉，导致801个碱基对的缺失并在缺失位点形成一个新的甘氨酸残基[1]。EGFRvⅢ由于缺失胞外配体结合区可以在没有与任何配体相结合的情况下激活酪氨酸激酶、产生自体磷酸化、诱发下游信号传导通路、引起级联反应，导致肿瘤的发生[2]。研究发现EGFRvⅢ与肿瘤的发生具有密切的关系，EGFRvⅢ能促进肿瘤细胞分裂和抑制其凋亡，从而提高其致癌性，同时EGFRvⅢ也具有提高细胞活力、促进肿瘤细胞转本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种抗EGFRvⅢ的单克隆抗体，包括重链CDR1‑3和轻链CDR1‑3，其特征在于，所述重链CDR1‑3的氨基酸序列为：CDR1：如序列列表中SEQ ID NO：1所示；CDR2：如序列列表中SEQ ID NO：2所示；CDR3：如序列列表中SEQ ID NO：3所示；所述轻链CDR1‑3的氨基酸序列为：CDR1：如序列列表中SEQ ID NO：4所示；CDR2：如序列列表中SEQ ID NO：5所示；CDR3：如序列列表中SEQ ID NO：6所示。

【技术特征摘要】
1.一种抗EGFRvⅢ的单克隆抗体，包括重链CDR1-3和轻链CDR1-3，其特征在于，所述重链CDR1-3的氨基酸序列为：CDR1：如序列列表中SEQIDNO：1所示；CDR2：如序列列表中SEQIDNO：2所示；CDR3：如序列列表中SEQIDNO：3所示；所述轻链CDR1-3的氨基酸序列为：CDR1：如序列列表中SEQIDNO：4所示；CDR2：如序列列表中SEQIDNO：5所示；CDR3：如序列列表中SEQIDNO：6所示。2.如权利要求1所述的抗EGFRvⅢ的单克隆抗体，其特征在于，重链可变区的氨基酸序列如序列列表SEQIDNO：7所示；轻链可变区的氨基酸序列如序列列表SEQIDNO：8所示。3.如权利要求1-2任意一项所述的抗EGFRvⅢ的单克隆抗体，其特征在于，所述重链CDR1-3的碱基序列如序列列表中SEQIDNO：9、SEQIDNO：10、SEQIDNO：11所示；所述轻链CDR1-3的碱基序列如序列列表中SEQIDNO：12、SEQIDNO：13、SEQIDNO：14所示。4.一种含权利要求1-3任意一项所述的抗EG...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘亭，杨友辉，刘香香，吴琼，薛维娜，李勇军，何彬，
申请(专利权)人：贵州医科大学，
类型：发明
国别省市：贵州,52