本发明专利技术涉及一种硫代氨基甲酸酯类次氯酸荧光探针的制备与应用。具体地，本发明专利技术的探针为一种硫代氨基甲酸酯类化合物，其可作为次氯酸荧光探针用于次氯酸的检测。这类探针可实现如下的技术效果中的至少一个：灵敏高选择性地识别次氯酸并进行准确检测；可以快速对次氯酸实现响应；可以实现对次氯酸的即时检测；性质稳定，可以长期保存使用；有利于在实际样本中对(体内/体外)次氯酸进行检测。
Preparation and application of a fluorescent probe of dithiocarbamate hypochlorite
The present invention relates to the preparation and application of a fluorescent probe of dithiocarbamate hypochlorite. Specifically, the probe of the present invention is a carbamate compound, which can be used as a hypochlorite fluorescence probe for the detection of hypochlorite. This type of probe can realize the technical effects in at least one of a sensitive and highly selective recognition of hypochlorous acid and accurate detection; can achieve rapid response to hypochlorous acid; can realize the real-time detection of hypochlorous acid; stable, long-term preservation; is advantageous in the actual samples of (in vitro and in vivo) hypochlorous acid detection.
【技术实现步骤摘要】
一种硫代氨基甲酸酯类次氯酸荧光探针的制备与应用
本专利技术涉及硫代氨基甲酸酯类化合物作为次氯酸荧光探针，其可在水溶液中对次氯酸进行快速灵敏高选择性检测，或者其可测定实际水样中次氯酸的浓度。
技术介绍
在人体内，次氯酸可以以髓过氧化物酶(MPO)催化反应的过氧化氢和氯离子的调节方式产生，其与先天宿主防御和对杀死各种病原体非常重要。在体外，由于泳池水次氯酸浓度过高导致的游泳池中毒事件现依旧频频发生。生物体内产生或蓄积过量的次氯酸，会引起多种疾病，包括心血管疾病，动脉粥样硬化，骨关节炎，类风湿性关节炎和肺损伤，严重还会导致癌症。因此，检测实际水体和生物体系中次氯酸的浓度已成为一个重要的课题，现亟待发展快速、灵敏、高选择性检测次氯酸的手段。当前，常见的次氯酸检测手段主要是碘还原滴定法、分光光度法、化学发光分析法、库伦法等。但这些分析手段在实际应用中既昂贵又繁琐，且常常需要特殊的昂贵实验仪器和高技能专业操作人员。因此，高效、廉价、简捷的次氯酸检测手段成为重要的研究课题。在各种离子/分子的检测方法中，荧光探针检测法由于操作简单，可在现场使用，选择性和灵敏度高，检测范围广，响应时间快速，能够进行原位检测和实时监测，检测过程对样品没有破坏而极为引人注目。但是目前报道的荧光探针仍存在一些问题，包括灵敏度低、选择性差以及合成复杂等。总之，发展具有高灵敏度、高选择性、合成步骤简单的次氯酸荧光探针是本领域技术人员急需解决的问题。
技术实现思路
本领域急需一种制备简单的快速高灵敏高选择性识别次氯酸的荧光探针，从而能够有效检测体内或体外次氯酸。为此，本专利技术合成了一类新颖的次氯酸荧光探针，其合成简单、超灵敏、稳定性高、和/或选择性高，和/或能够快速特异性识别次氯酸。具体而言，本专利技术提供了一种次氯酸荧光探针，其为硫代氨基甲酸酯类化合物，其结构如下：优选的，本专利技术的荧光探针是：在本专利技术的次氯酸荧光探针的制备方法中，反应温度为25℃；反应时间是6h；三氰基三甲基呋喃和对醛基硫代氨基甲酸苯酯的摩尔比为约1：1至1：3，优选为1：1.1或1：1.3；二异丙基乙基胺作为有机碱催化剂。本专利技术还提供了用于检测样本(例如游泳池水样本)中次氯酸浓度的检测制剂或试剂盒，其包含本专利技术的探针。优选地，本专利技术的检测制剂或试剂盒还包含产品的使用说明书。还优选地，本专利技术的试剂盒还包含用于测定样本中的次氯酸浓度的缓冲剂。本专利技术还提供了检测样本(例如游泳池水样本)中次氯酸浓度的方法，其包括将本专利技术的探针与待测样本接触的步骤。本专利技术还提供了本专利技术的探针在制备用于检测样本(例如游泳池水样本)中次氯酸浓度的制剂中的用途。本专利技术的次氯酸荧光探针可与次氯酸进行特异性作用，产生荧光光谱的增强变化，从而实现对次氯酸的定量检测。具体而言，本专利技术的次氯酸荧光探针分别与过氧化氢、过氧化叔丁醇、羟基自由基以及其他物质进行作用均不能导致荧光光谱的明显改变，从而实现对次氯酸的特异性识别。可选择地，本专利技术的次氯酸荧光探针的稳定性好，进而能够长期保存使用。进一步的，本专利技术的次氯酸荧光探针是快速高选择性次氯酸荧光探针，且合成简单，成本低廉，有利于商业化的推广应用。附图说明图1是探针溶液(5μM)随次氯酸浓度变化的荧光光谱，插图是603nm的荧光强度对次氯酸浓度的拟合曲线。图2是探针对次氯酸的响应时间测定。图3是探针(5μM)对不同分析物(0.5mM)的响应情况。其中a：探针溶液，b：过氧化氢，c：超氧阴离子，d：过氧化叔丁醇，e：过氧化叔丁醇自由基，f：羟基自由基，g：单线态氧，h：亚硝酸根离子，i：硝酸根离子，j：一氧化氮，k：过氧化亚硝酸盐，l：谷胱甘肽(3mM)，m：钾离子，n：钙离子，o：钠离子，p：镁离子，q：锌离子，r：谷氨酸，s：丙氨酸，t：缬氨酸，u：苏氨酸，v：赖氨酸，w：亮氨酸，x：次氯酸(10μM)。具体实施方式：本专利技术提供了上述快速灵敏高选择性次氯酸荧光探针的合成路线、方法及其光谱性能。本专利技术的次氯酸荧光探针是一种硫代氨基甲酸酯类化合物，其具有以下结构通式：上式中：R1，R2，R3，R4,R5和R6为氢原子，直链或支链烷基，直链或支链烷氧基，磺酸基，酯基，羧基；R1，R2，R3，R4,R5和R6可以相同或不同。该类次氯酸荧光探针的合成路线和方法如下：具体地，本专利技术的荧光探针可以通过如下方法制备，将三氰基三甲基呋喃(2mmol)、对醛基硫代氨基甲酸苯酯(2.5mmol)和二异丙基乙基胺(3mmol)溶于20mL乙醇中，25℃下搅拌反应6h，然后用硅胶柱色谱提纯(洗脱剂为二氯甲烷：石油醚＝2：1)得到纯品固体(产率91％)。因此，本专利技术还提供了对醛基硫代氨基甲酸苯酯类化合物在制备用于检测次氯酸的荧光探针中的用途。本专利技术还提供了三氰基三甲基呋喃化合物在制备用于检测次氯酸的荧光探针中的用途。本专利技术的快速高灵敏高选择性识别次氯酸荧光探针的显著特征是能够快速高选择性特异性地识别次氯酸，能够准确对次氯酸进行定量分析。下面将通过借助以下实施例来更详细地说明本专利技术。以下实施例仅是说明性的，应该明白，本专利技术并不受下述实施例的限制。实施例1(方案1)将三氰基三甲基呋喃(398mg，2mmol)和对甲酰基硫代氨基甲酸苯酯(419mg，2mmol)溶解于20mL无水乙醇中，然后逐滴加入二异丙基乙基胺(646mg，3mmol)，反应液在室温下反应6小时。反应完成后，旋蒸除去溶剂得到粗产品，然后用硅胶柱(洗脱剂为二氯甲烷：石油醚＝2：1)分离提纯，得到黄色固体648mg，产率为83％。(方案2)将三氰基三甲基呋喃(398mg，2mmol)和对甲酰基硫代氨基甲酸苯酯(460mg，2.2mmol)溶解于20mL无水乙醇中，然后逐滴加入二异丙基乙基胺(646mg，3mmol)，反应液在室温下反应6小时。反应完成后，旋蒸除去溶剂得到粗产品，然后用硅胶柱(洗脱剂为二氯甲烷：石油醚＝2：1)分离提纯，得到黄色固体687mg，产率为88％。(方案3)将三氰基三甲基呋喃(398mg，2mmol)和对甲酰基硫代氨基甲酸苯酯(523mg，2.5mmol)溶解于20mL无水乙醇中，然后逐滴加入二异丙基乙基胺(646mg，3mmol)，反应液在室温下反应6小时。反应完成后，旋蒸除去溶剂得到粗产品，然后用硅胶柱(洗脱剂为二氯甲烷：石油醚＝2：1)分离提纯，得到黄色固体710mg，产率为91％。(方案4)三氰基三甲基呋喃(398mg，2mmol)和对甲酰基硫代氨基甲酸苯酯(628mg，3.0mmol)溶解于20mL无水乙醇中，然后逐滴加入二异丙基乙基胺(646mg，3mmol)，反应液在室温下反应6小时。反应完成后，旋蒸除去溶剂得到粗产品，然后用硅胶柱(洗脱剂为二氯甲烷：石油醚＝2：1)分离提纯，得到黄色固体726mg，产率为93％。实施例2在PBSpH＝7.4条件下，不同浓度次氯酸对探针溶液荧光光谱的影响，插图是荧光光谱法定量分析次氯酸的线性关系图；上述测定是在10mMPBS的水溶液中进行的，所使用的探针是实施例1中所制备的探针，且所有光谱测试都是在25℃下次氯酸加入作用1min后测得的。结果参见图1。图1是探针的荧光光谱随不同浓度次氯酸的变化情况图。由图可以看出，在加入次氯酸之前，探针几乎没有荧光；当加入次氯酸之后，随着本文档来自技高网...
【技术保护点】
化合物，其具有以下结构：
【技术特征摘要】
1.化合物，其具有以下结构：上式中：R1，R2，R3，R4，R5和R6为氢原子，直链或支链烷基，直链或支链烷氧基，磺酸基，酯基，羧基；R1，R2，R3，R4，R5和R6可以相同或不同。2.根据权利要求1所述的化合物，其为如下结构的化合物：3.制备权利要求1或2所述的化合物的方法，其包括使三氰基三甲基呋喃和对甲酰基硫代氨基甲酸苯酯反应。4.根据权利要求3所述的方法，其中三氰基三甲基呋喃和对甲酰基硫代氨基甲酸苯酯的摩尔比为1:1至1:3。5.根据权利要求3所述的方法，其中反应溶剂为乙醇、甲醇、异丙醇、正丁...
【专利技术属性】
技术研发人员：闫语，朱宝存，
申请(专利权)人：闫语，
类型：发明
国别省市：山东,37
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