包含GLP和免疫球蛋白杂合FC的融合多肽及其用途制造技术

基于发现了适合于GLP或其类似物的免疫球蛋白杂合Fc,本发明专利技术涉及包含胰高血糖素样肽(GLP)和免疫球蛋白杂合Fc的融合多肽,以及更具体地涉及相比于常规融合多肽具有增大的半寿期和改善的效力的融合多肽以及用于治疗糖尿病、炎性肠病、由抗癌化学疗法所引起的肠粘膜炎或腹泻或短肠综合征的包含所述的融合多肽的药物组合物。相比于GLP‑1和GLP‑2,本发明专利技术所述的融合多肽具有增加的半寿期和改善的对DPP‑4酶的抗性,因而相比于常规药物,它在治疗糖尿病、炎性肠病、由抗癌化学疗法所引起的肠粘膜炎或腹泻或短肠综合征中具有改善的药效。因此,本发明专利技术所述的融合多肽能够被有效地应用于药物中。

Fusion polypeptides comprising GLP and immunoglobulin heterozygous FC and uses thereof

Find suitable for immunoglobulin GLP and its analogs based on hybrid Fc, the present invention relates to glucagon like peptide (GLP) and immunoglobulin complex fusion peptide Fc fusion polypeptide, and more specifically to effect compared with the conventional fusion polypeptide has increased the half-life and improve the and a pharmaceutical composition for treating diabetes, inflammatory bowel disease, caused by cancer chemotherapy intestinal mucositis or diarrhea or short bowel syndrome comprising the fusion polypeptide. Compared to the GLP 1 and GLP 2, resistance of DPP fusion polypeptides of the present invention has an increased half-life and improve the enzyme 4, and compared to conventional drugs, it is in the treatment of diabetes, inflammatory bowel disease, caused by cancer chemotherapy or intestinal mucositis or diarrhea in short bowel combined with improved efficacy in syndrome. Therefore, the fusion polypeptide of the present invention can be effectively applied in medicaments.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】包含GLP和免疫球蛋白杂合FC的融合多肽及其用途
基于发现了适合于GLP或其类似物的免疫球蛋白杂合Fc,本专利技术涉及包含胰高血糖素样肽(GLP)和免疫球蛋白杂合Fc的融合多肽,以及更具体地涉及相比于常规融合多肽具有增大的半寿期和改善的效力的融合多肽以及用于治疗糖尿病、炎性肠病、由抗癌化学疗法所引起的肠粘膜炎或腹泻或短肠综合征的包含所述的融合多肽的药物组合物。另外,编码所述的融合多肽的多核苷酸、包含所述的多核苷酸的表达载体以及包含所述的表达载体的宿主细胞也被包括在本专利技术的保护范围中。
技术介绍
糖尿病是一种代谢疾病,其由于遗传或环境原因而引起胰岛素分泌或胰岛素功能方面的问题，并且因此在血液中的葡萄糖不能被用作细胞的能源,从而显示具有高血糖水平的高血糖症状。糖尿病可以引起并发症并且是现代社会中的一种最严重的慢性疾病。大体上可以把糖尿病分类为I型糖尿病和II型糖尿病。I型糖尿病占总糖尿病患者的不到10％并且大部分发生在儿童中。据报道,当胰腺β细胞由于自身免疫疾病等而被破坏导致未能产生或分泌胰岛素时，发生I型糖尿病,因此I型糖尿病患者需要终生注射胰岛素。相比之下,II型糖尿病占总糖尿病患者的90％或更多并且大部分发生在成人中,并且特别地,更经常发生在超重和肥胖的成人中。据报道,II型糖尿病是由胰腺中缺损的胰岛素分泌或胰岛素抗性所引起的。为了治疗糖尿病,人们通常从体育锻炼和膳食疗法开始。然而,当这些努力未能控制血糖水平时,可以施用单一或组合的糖尿病剂。按照美国糖尿病协会(ADA)指南,首选的药物是二甲双胍、第二和第三选择的药物包括基于磺酰脲类的、基于格列奈(glinide)的、基于噻唑烷二酮的、DPP-4抑制剂等等以及此后接着是注射剂例如胰高血糖素样肽-1(GLP-1)激动剂或胰岛素注射剂。目前在临床治疗中使用的常规口服治疗剂具有能够连续地保持正常的血糖水平的优点,然而长期施用这些治疗剂不仅引起各种副作用例如引起低血糖、腹泻、体重增加、心血管问题、肝脏毒性等等,而且也引起胰腺β细胞被破坏,从而最终需要胰岛素注射。另外,胰岛素注射作为最后的治疗必须以皮下方式每天被施用两至三次，因而引起不便,并且胰岛素注射也许可能诱导低血糖,低血糖是一种最严重的副作用。虽然为了补救这些问题做了努力,但是近来GLP-1作为下一代糖尿病疗法一直在聚光灯下。GLP-1和类似物以及其衍生物已经显示了作为用于临床试验中治疗II型糖尿病的治疗剂的良好潜力。它们能够诱导许多的生物学效果,例如刺激胰岛素分泌、抑制胰高血糖素分泌、抑制胃排空、抑制胃或肠的运动、诱导体重减轻等等。另外,它们能够在长期施用期间保护胰腺、免于低血糖以及长时间地保持合适的血糖水平。然而,在体内GLP-1被DPP-4降解并且变成非活性的，从而在体内具有非常短的半寿期,这使其难以被开发成治疗剂。因此,已经进行了各种的方法以延长GLP-1的半寿期或减少该肽被从身体中除去的速率，同时保持它的生物学活性。也就是说,已经积极地开发了各种GLP-1类似物,并且已经尝试了一种用来把GLP-1融合到免疫球蛋白Fc区的方法(美国专利号7,452,966B2等等)。尽管如此,由于在半寿期、诱导抗体依赖性细胞的细胞毒性(ADCC)的能力、对于DPP-4酶的稳定性等等方面的限制，用来融合免疫球蛋白Fc的技术的应用还未曾被充分地发展用于它的商业化。同时,炎性肠病(IBD)被认为是由于遗传和免疫因素而发生的,然而,它是一种不治之症，其中的原因和治疗仍然有待于被澄清。它是一种由消化道内壁上的炎症所引起的慢性病,并且炎性肠病大体上被分类为溃疡性结肠炎和局限性回肠炎。溃疡性结肠炎(UC)是一种慢性炎性疾病，其发生在消化道的大肠粘膜上,并且该炎症开始于直肠并且连续地与大肠相连。患有溃疡性结肠炎的患者通常诉说腹泻、血性便、腹痛等等,以及常常伴随诸如厌食、重量减轻、疲劳等等的症状。在大多数情况下,溃疡性结肠炎是间歇性疾病，其重复地具有加重的症状周期和改善的症状周期的特征以及有时也有长的无症状周期。在局限性回肠炎(CD)中,不同于溃疡性结肠炎,炎症侵入整个肠层并且病变的分布不是连续的而是在很多情况下散布在周围。局限性回肠炎的经常发生的症状包括腹泻、腹痛、厌食等等,但是取决于患者，症状的种类和程度变化非常大。事实上,相比于患有溃疡性结肠炎的患者，患有局限性回肠炎的患者看起来经受更严重的疼痛,并且治疗患有局限性回肠炎的患者的长期进展和应答大大地更差,因而常常使得他们经历手术。导致完全治愈炎性肠病的有效治疗仍然是未知的，因为炎性肠病的原因还没有被确定,关于影响炎性肠病发展的因素的研究已经被相当大地推进了,并且用于减少炎症的各种药物已经被开发并且目前在使用中。按照症状的严重度，按照下列次序顺序地应用目前广泛地使用的用于炎性肠病的治疗剂:抗炎剂(5-氨基水杨酸；5-ASA)、类固醇剂、免疫抑制剂例如6-巯基嘌呤(6-MP)和生物作用剂例如TNFα抑制剂(抗TNFα抗体、英夫利昔单抗)。然而,这些目前在使用中的作用剂已经显示了各种副作用,因此急需开发:1)具有补偿或取代现有药物的效力的生物作用剂,或2)利用与现有药物的机制不同的生物作用剂。在致力于补偿这些问题时,近来GLP-2作为炎性肠病的治疗剂一直处于聚光灯下。GLP-2是从肠中的L细胞中分泌的,它通过在肠细胞中表达的GLP-2受体的信号传导而诱导产生IGF-1、一氧化氮(NO)、血管活性肠肽(VIP)等等。这样产生的IGF-1通过PI-3K和AKT的信号传导而诱导肠细胞的生长,并且NO帮助改善肠中的血液循环。另外,由于已知GLP-2通过诱导VIP生产而具有消炎作用,也在各种科研小组中在实验上证实了GLP-2有效用于治疗短肠综合征以及炎性肠病。事实上,(teduglutide),一种GLP-2类似物，是由NPSpharmaceuticals,Inc.(美国)在2012年末时开发的，其被批准作为用于治疗短肠综合征(SBS)的孤儿药物,并且在扩大适应证之后,它目前在患有炎性肠病的患者中处于II期临床研究中。然而,尽管与天然GLP-2的半寿期相比,具有显著增加的半寿期,但是也应该每天注射它一次,因而从患者方便方面来说，仍然没有满足未满足的需要。此外,当药物将要被应用到作为需要终生治疗的自体免疫性疾病的炎性肠病时,它应该以能够从至少每周一次到每月一次施用的长效的治疗剂形式开发。也就是说,由于GLP-2是肽激素,与蛋白质药物的持续时间相比，它具有显著缩短的持续时间,并且因此需要改善GLP-2的长期持续时间的方法。另一方面,由于癌细胞具有迅速生长和分裂的特征,大多数抗癌剂被设计成用来杀死迅速生长的细胞。然而,一些正常细胞也像癌细胞一样迅速地生长，因此这些正常细胞也被抗癌的化学疗法破坏。在正常细胞之中迅速生长和分裂的细胞,即在骨髓中形成的血细胞、在包含口腔在内的胃肠道中的上皮细胞、毛细胞以及产生精子和卵子的生殖细胞,受到更严重的影响。特别地,抗癌剂经常在胃肠道中引起粘膜炎，其可能引起腹泻,并且在严重腹泻的情形中,应该经由静脉内注射补充林格溶液和营养素以防止脱水。在这样的情况下,可能必须改变预置的抗癌化学治疗日程表，因此相当大地影响癌症治疗。相应地,它被认为对预防由抗癌的化学本文档来自技高网...

【技术保护点】
融合多肽，其包含(a)胰高血糖素样肽(GLP)或其类似物,和(b)免疫球蛋白Fc多肽，其中所述的免疫球蛋白Fc多肽包含:(i)由来自SEQ ID NO:25的C‑端的35至49个连续的氨基酸残基的氨基酸序列组成的分离的IgD铰链区；和(ii)由SEQ ID NO:29的氨基酸序列组成的CH2结构域和CH3结构域。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.12.31 KR 10-2014-01957931.融合多肽，其包含(a)胰高血糖素样肽(GLP)或其类似物,和(b)免疫球蛋白Fc多肽，其中所述的免疫球蛋白Fc多肽包含:(i)由来自SEQIDNO:25的C-端的35至49个连续的氨基酸残基的氨基酸序列组成的分离的IgD铰链区；和(ii)由SEQIDNO:29的氨基酸序列组成的CH2结构域和CH3结构域。2.权利要求1所述的融合多肽,其中所述的GLP是GLP-1。3.权利要求2所述的融合多肽,其中所述的GLP-1由SEQIDNO:1或SEQIDNO:13的氨基酸序列组成。4.权利要求2所述的融合多肽,其中所述的GLP-1类似物在可以被DPP-4酶切割的位点中包含修饰,并且由选自由SEQIDNO:2至12和SEQIDNO:14至24组成的组的氨基酸序列组成。5.权利要求1所述的融合多肽,其中所述的GLP是GLP-2。6.权利要求5所述的融合多肽,其中所述的GLP-2由SEQIDNO:44的氨基酸序列组成。7.权利要求5所述的融合多肽,其中所述的GLP-2的类似物在可以被DPP-4酶切割的位点中包含修饰,并且由SEQIDNO:45或SEQIDNO:46的氨基酸序列组成。8.权利要求1所述的融合多肽,其中所述的IgD铰链区由选自由SEQIDNO:26至28组成的组的氨基酸序列组成。9.权利要求1所述的融合多肽,其中相比于没有与免疫球蛋...

【专利技术属性】
技术研发人员：成永喆，梁世涣，卞美仙，杨尚仁，辛恩朱，
申请(专利权)人：格纳西尼有限公司，
类型：发明
国别省市：韩国,KR