一种热稳定性提高的β-淀粉酶突变体制造技术

本发明专利技术公开了一种热稳定性提高的β‑淀粉酶突变体，属于基因工程和酶工程技术领域。本发明专利技术通过对弯曲芽孢杆菌(Bacillus flexus)来源的β‑淀粉酶进行定向进化的研究，利用进化最常用的方法之一易错PCR技术对亲本β‑淀粉酶进行热稳定性的筛选，最终得到了一株热稳定性显著提高的β‑淀粉酶突变体。本发明专利技术突变体Thr461Tyr/Asp506Asn/Asp519Lys在55℃下的半衰期比野生型β‑淀粉酶提高了2倍，在55‑65℃范围内始终保持较高的酶活力。本发明专利技术得到的突变体比野生型β‑淀粉酶更加适用于淀粉糖的工业应用。

【技术实现步骤摘要】
一种热稳定性提高的β-淀粉酶突变体
本专利技术涉及一种热稳定性提高的β-淀粉酶突变体，属于基因工程和酶工程

技术介绍
β-淀粉酶又称为麦芽糖苷酶、糖原淀粉酶，其系统名为α-1,4-葡聚糖-4-麦芽糖水解酶(α-1,4-Dglucanmaltohydrolase)，E.C.编号为3.2.1.2.作用于淀粉时，从其非还原性末端顺次切下麦芽糖，水解产物是β-麦芽糖、β-极限糊精及非常少量的β-葡萄糖。β-淀粉酶具有相当大的工业应用价值，长期以来植物来源的大麦β-淀粉酶一直被广泛用于多个领域。例如，在啤酒发酵业中部分代替大麦芽用于啤酒的生产，在食品业中用于水解淀粉制造麦芽糖浆和饴糖等。自1974年Higashihara等人首次确定巨大芽孢杆菌(Bacillusmegaterium)胞外淀粉酶含有β-淀粉酶以来，相继发现了几种能够产生该酶的微生物，这些菌株大都属于细菌，如蜡状芽孢杆菌(Bacilluscereus)、多粘芽孢杆菌(Bacilluspolymyxa)、环状芽孢杆菌(Bacilluscirculans)、高温放线菌(Thermeoactinomycessp.)和热硫梭菌(本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种β‑淀粉酶突变体，其特征在于，是将弯曲芽孢杆菌(Bacillusflexus)的β‑淀粉酶的461位突变为酪氨酸、第506位突变为天门冬酰胺以及第519位突变为赖氨酸。

【技术特征摘要】
1.一种β-淀粉酶突变体，其特征在于，是将弯曲芽孢杆菌(Bacillusflexus)的β-淀粉酶的461位突变为酪氨酸、第506位突变为天门冬酰胺以及第519位突变为赖氨酸。2.一种β-淀粉酶突变体，其特征在于，氨基酸序列为SEQIDNO:2。3.编码权利要求1或2所述β-淀粉酶突变体的基因。4.表达权利要求1或2所述β-淀粉酶突变体的细胞。5.表达权利要求1或2所述β-淀粉酶突变体...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴敬，陈晟，陈磊，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：江苏,32