快速检测寨卡病毒NS1蛋白的荧光定量免疫层析试纸条及其制作方法技术

本发明专利技术公开了一种快速检测寨卡病毒NS1蛋白的荧光定量免疫层析试纸条及其制作方法，试纸条包括底板，所述底板上依次设有样品垫、结合垫、包被膜和吸水纸且它们依次搭接；结合垫上含有荧光微球标记的寨卡NS1蛋白单克隆抗体和荧光微球标记的羊抗鸡抗体；包被膜的检测区包被有与结合垫上的荧光微球标记的寨卡NS1蛋白单克隆抗体具有不同表位的寨卡NS1蛋白单克隆抗体，质控区包被有鸡IgY抗体。制作方法包括步骤:荧光微球的清洗与活化、荧光微球标记抗体的制备、荧光标记抗体结合垫的制备、包被膜的制备、纸条的组装，本发明专利技术制作的试纸条可快速、特异、精准检测寨卡病毒NS1蛋白，实现现场快速定量检测。

【技术实现步骤摘要】
快速检测寨卡病毒NS1蛋白的荧光定量免疫层析试纸条及其制作方法
本专利技术属于生物
，涉及一种病毒的荧光定量免疫层析试纸条及其制作方法，尤其涉及一种快速检测寨卡病毒NS1蛋白的荧光定量免疫层析试纸条及其制作方法。
技术介绍
寨卡病毒(ZikaVirμs)属于黄病毒科(Flaviviridae)、黄病毒属(Flavivirμsgenμs)，是一种主要由伊蚊传播的虫媒病毒。该病毒于1947年在乌干达首次发现，此后多年持续发现散在病例或发生小规模疫情。但自2015年以来，由寨卡病毒引起的人类感染不断发生，美洲、西太平洋、非洲及亚洲已累计有32个国家和地区报告寨卡病毒在本地传播。目前，寨卡病毒主要是通过荧光PCR法，通过对血液和尿液进行病毒核酸的检测。该方法检测成本较高，耗时较长且对检测人员有一定的资质要求，很难应用于大规模人群快速筛查和既往感染史的调查研究，因此，能否快速精准的检测该病毒是控制疫情的关键因素。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题在于，针对现有技术的上述缺陷，提供一种快速、特异、精准检测的快速检测寨卡病毒NS1蛋白的荧光定量免疫层析试纸条，可实现现场快速定量检测。本专本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种快速检测寨卡病毒NS1蛋白的荧光定量免疫层析试纸条，其特征在于，包括底板，所述底板上依次设有样品垫、结合垫、包被膜和吸水纸，且所述样品垫、结合垫、包被膜和吸水纸依次搭接；所述结合垫上含有荧光微球标记的寨卡NS1蛋白单克隆抗体和荧光微球标记的羊抗鸡抗体；所述包被膜包含检测区和质控区，所述检测区包被有与结合垫上的荧光微球标记的寨卡NS1蛋白单克隆抗体具有不同表位的寨卡NS1蛋白单克隆抗体，所述质控区包被有鸡IgY抗体。

【技术特征摘要】
1.一种快速检测寨卡病毒NS1蛋白的荧光定量免疫层析试纸条，其特征在于，包括底板，所述底板上依次设有样品垫、结合垫、包被膜和吸水纸，且所述样品垫、结合垫、包被膜和吸水纸依次搭接；所述结合垫上含有荧光微球标记的寨卡NS1蛋白单克隆抗体和荧光微球标记的羊抗鸡抗体；所述包被膜包含检测区和质控区，所述检测区包被有与结合垫上的荧光微球标记的寨卡NS1蛋白单克隆抗体具有不同表位的寨卡NS1蛋白单克隆抗体，所述质控区包被有鸡IgY抗体。2.根据权利要求1所述的快速检测寨卡病毒NS1蛋白的荧光定量免疫层析试纸条，其特征在于，所述结合垫包被有终浓度为0.1-1.5mg/mL的荧光微球标记的寨卡NS1单克隆抗体、终浓度为0.5-1.5mg/mL的荧光微球标记的羊抗鸡抗体，所述荧光微球标记的寨卡NS1单克隆抗体固化后在结合垫上的含量为0.6-1.2μg/cm2；所述荧光微球标记的羊抗鸡抗体固化后在结合垫上的含量为0.4-0.6μg/cm2。3.根据权利要求1所述的快速检测寨卡病毒NS1蛋白的荧光定量免疫层析试纸条，其特征在于，所述样品垫通过浓度为0.5～1.5mg/ml的鼠IgG包被。4.根据权利要求1所述的快速检测寨卡病毒NS1蛋白的荧光定量免疫层析试纸条，其特征在于，所述包被膜上检测区包被有终浓度为0.5-2.0mg/ml、用量为25μl/27-29cm的寨卡NS1蛋白单克隆抗体。5.根据权利要求1所述的快速检测寨卡病毒NS1蛋白的荧光定量免疫层析试纸条，其特征在于，所述包被膜上质控区包被有终浓度为0.5-2.0mg/ml、用量为25μl/27-29cm的鸡IgY抗体。6.根据权利要求1所述的快速检测寨卡病毒NS1蛋白的荧光定量免疫层析试纸条，其特征在于，所述荧光微球的粒径为0.2-0.8μm，且荧光微球的激发光和发射光波长都为400～750nm。7.一种快速检测寨卡病毒NS1蛋白的荧光定量免疫层析试纸条的制作方法，其特征在于，包括以下步骤：A、荧光微球的清洗与活化：将荧光微球悬液离心处理后，加入吗啉乙磺酸溶液进行超声处理；接着依次加入碳二亚胺和N-羟基硫代琥珀酰亚胺溶液，室温混匀后离心处理，弃上清液，再用吗啉乙磺酸溶液重悬，重复清洗一次后超声混匀备用；B、荧光微球标记抗体的制备：在步骤A活化后得到的荧光微球悬液中，分别逐滴加入寨卡NS1蛋白单克隆抗体或羊抗鸡抗体，混匀后室温反应，离心清洗，沉淀用含有5％BSA的PBS溶液重悬后室温反应，离心清洗，沉淀再用含1％B...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑志，于洪波，
申请(专利权)人：深圳市梓健生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44