一种快速检测HER‑2基因扩增的探针组、试剂盒及方法技术

本发明专利技术公开了一种使用荧光原位杂交技术快速检测HER‑2基因扩增的方法，每个靶位点的检测需要三种探针，分别为：接触探针、扩增探针和荧光探针。其中接触探针的5’端特异性地与HER‑2基因结合，3’端有20组20碱基的重复序列，可以特异性地与扩增探针相结合；扩增探针的5’端特异性地与接触探针的3’端结合，3’端有20组20碱基的重复序列，可以特异性地与荧光探针结合；荧光探针的5’末端带有CY3或FITC标记，通过这三种探针的协同作用，将荧光信号放大400倍，实现HER‑2基因扩增快速、灵敏的检测。本发明专利技术还公开了一种快速检测HER‑2基因扩增的试剂盒及探针组。

【技术实现步骤摘要】
一种快速检测HER-2基因扩增的探针组、试剂盒及方法
本专利技术属于分子生物学领域，特别涉及一种探针组和试剂盒，通过使用荧光原位杂交的手段，快速检测样品中的HER-2基因扩增。
技术介绍
HER-2/neu基因(Her-2基因)在20-30％的浸润性乳腺癌中存在扩增，常见的扩增有单纯的Her-2基因扩增，也存在17号染色体非整倍性导致的Her-2基因拷贝数增加。Her-2基因所编码的蛋白为表皮生长因子受体蛋白2，其家族中共有4位成员，分别位Her1、Her2、Her3和Her4，属于酪氨酸激酶受体家族。基础研究显示，这些受体通过同源二聚或异源二聚的方式发生偶联，使受体胞内部分的酪氨酸激酶激活，导致下游的蛋白发生磷酸化，从而发挥调控细胞增殖以及血管生成等作用。正确的判断Her-2基因状态，可以准确的判断患者预后，并能指导临床合理选择治疗药物。HER-2基因扩增的患者能明显受益于靶向治疗药物赫赛汀。在该药物的临床应用过程中，HER-2基因的检测是至关重要的，因为该药物对具有HER-2基因扩增的患者具有良好的治疗效果，而对于低度扩增或者是不扩增的患者疗效不理想。由于上述原因，HER-2基因本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种快速检测HER‑2基因扩增的探针组，其特征在于，由接触探针、扩增探针和荧光探针三种探针组成，所述接触探针包括接触探针1和接触探针2，所述扩增探针包括扩增探针1和扩增探针2，所述荧光探针包括荧光探针1和荧光探针2，其中，接触探针1、扩增探针1、荧光探针1、接触探针2、扩增探针2和荧光探针2的碱基序列分别为：接触探针1：5’‑GTGGCGCTTAAGAAAATCCGCCTGGACACT(GTATJCGCJCTGFTATJCCG)‑3’；扩增探针1：5’‑CGGFATAJCAGFGCGFATAC(TCFACGJCFCTAJGGAFAAFG)‑3’；荧光探针1：5’‑CY3‑JTTJTCCFTAG...

【技术特征摘要】
1.一种快速检测HER-2基因扩增的探针组，其特征在于，由接触探针、扩增探针和荧光探针三种探针组成，所述接触探针包括接触探针1和接触探针2，所述扩增探针包括扩增探针1和扩增探针2，所述荧光探针包括荧光探针1和荧光探针2，其中，接触探针1、扩增探针1、荧光探针1、接触探针2、扩增探针2和荧光探针2的碱基序列分别为：接触探针1：5’-GTGGCGCTTAAGAAAATCCGCCTGGACACT(GTATJCGCJCTGFTATJCCG)-3’；扩增探针1：5’-CGGFATAJCAGFGCGFATAC(TCFACGJCFCTAJGGAFAAFG)-3’；荧光探针1：5’-CY3-JTTJTCCFTAGJGFCGTJGA-3’；接触探针2：5’-CCTCGGAGAGGACAGAGGCCTAGGCCCACG(AGTFAJCGCFGTAFCAAJTJ)-3’；扩增探针2：5’-FAFTTGJTACJGCGFTJACT(GCAFJTTACCGFAJJTACFT)-3’；荧光探针2：5’-FITC-AJGTAFFTJCGGTAAFJTGC-3’。2.根据权利要求1所述的探针组，其特征在于，所述荧光探针1和所述荧光探针2的5’端用荧光基团标记。3.根据权利要求2所述的探针组，其特征在于，所述荧光基团为CY3或FITC。4.根据权利要求1所述的探针组，其特征在于，所述接触探针1、所述扩增探针1和所述荧光探针1用于检测HER-2基因，所述荧光探针1将HER-2基因标记为红色荧光，所述接触探针2、所述扩增探针2和所述荧光探针2用于检测17号染色体的着丝粒，所述荧光探针2将17号染色体的着丝粒标记为绿色荧光。5.根据权利要求4所述的探针组，其特征在于，所述接触探针、所述扩增探针和所述荧光探针的碱基序列中的F和J为两种天然基因组DNA中不存在的...

【专利技术属性】
技术研发人员：方国伟，洪冉，
申请(专利权)人：苏州达麦迪生物医学科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32