一种蓝莓花色苷的制备方法技术

本发明专利技术提供一种蓝莓花色苷的制备方法，以蓝莓果渣为原料，加入水打成匀浆，再用果胶酶酶解，过滤后用乙醇水溶液在一定的温度下进行真空密闭提取花青素。离心过滤后，得到花色苷粗提液，经超滤过滤后，再利用纳滤进行浓缩，旋转蒸发粗提液去除乙醇，得到花青素浓缩液，经大孔树脂吸附至饱和，使用纯净水洗脱杂质，之后使用乙醇溶液洗脱花色苷，沉降、离心取上清液，经浓缩除乙醇后使用乙酸乙酯萃取杂质，静置分层后收集水相，将花色苷水相溶液真空冷冻干燥后得到花色苷粉末。本发明专利技术工艺操作简单、能耗低，节约试剂，所得到的花色苷纯度高达40%。提高了蓝莓的综合利用价值，大孔树脂使用方便迅速，能重复利用，大大降低成本，适合大型生产需要。

Preparation method of blueberry anthocyanin

The invention provides a preparation method of blueberry anthocyanins in blueberry pomace as the raw material, adding water into homogenate, and pectinase enzymolysis at a certain temperature for vacuum extraction of anthocyanins by ethanol solution after filtration. Centrifugal filter, obtained anthocyanin extract, by ultrafiltration, nanofiltration was concentrated by rotary evaporation, the crude extract of ethanol removal, obtained anthocyanin concentrate by macroporous resin adsorption to saturation, using pure water to remove impurities, after using ethanol elution anthocyanin, sedimentation and centrifugal supernatant. In addition to the use of the concentration of ethyl acetate extraction of impurities after alcohol layering will be collected after aqueous phase, aqueous solution of anthocyanins obtained after vacuum freeze-drying of anthocyanin powder. The process has the advantages of simple operation, low energy consumption and reagent saving, and the purity of the obtained anthocyanin is as high as 40%. The utility model improves the comprehensive utilization value of blueberries, and the macroporous resin is convenient and quick to use, can be reused, greatly reduces the cost and is suitable for large-scale production.

【技术实现步骤摘要】
一种蓝莓花色苷的制备方法
本专利技术涉及一种蓝莓花色苷的制备方法。
技术介绍
蓝莓具较高营养保健价值和经济价值，其果实的花色苷含量是纯天然的有效的抗氧化剂，具有消除眼睛疲劳，保护视力，以及抗氧化、抗衰老、抗溃疡、抗炎和抗癌等生理功能和药用功能。蓝莓中花色苷的含量较高，并且大部分存在于果渣中，因此可作为花色苷的良好来源。膜分离技术是使用具有选择透过性的膜为分离介质，当膜两侧存在某种推动力（如压力差、浓度差、电位差等）时，物料依据滤膜孔径的大小而通过或被截留，选择性地透过膜，达到分离、提纯的目的。由于大孔树脂其本身组成与结构特点，具有吸附性和筛选性相结合的分离、纯化多种功能，已广泛应用于生物制品领域。实践应用表明，它比其他天然吸附剂具有较大的吸附能力，洗脱容易、机械强度高，抗污染能力强等优点。
技术实现思路
本专利技术目的是提供一种蓝莓花青素提取的方法，本专利技术提供的技术方案采用了乙醇提取花青素，无污染，所生产的蓝莓花青素无毒、杂质少，纯净度高。本专利技术提供的蓝莓花青素制备方法如下：操作工序：蓝莓果渣→化冻→加水匀浆→酶解-压榨、过滤-乙醇溶液浸提→过滤→超滤→纳滤→浓缩→树脂柱上样→水洗→乙醇溶液洗脱→浓缩→乙酸乙酯萃取→真空冷冻干燥→产品。具体操作步骤为：将蓝莓果渣称重化冻后，加入1倍重量的纯净水和0.05%果胶酶后用匀浆机打成匀浆,在温度45℃条件下真空酶解120min，200目过滤，滤渣称重后加入15倍重量的60%乙醇溶液，混合均匀后在45℃下浸取120min-180min后200目过滤得滤渣和浸提液，浸提两遍，将得到的浸提液和酶解液合并得花色苷粗提液。将粗提液过超滤膜，取其透过液；再将透过液过纳滤膜，取其浓缩液，得纳滤浓缩液，将其在40℃-45℃下真空旋转蒸发，除去溶液中乙醇，得花色苷浓缩液。花色苷浓缩液经大孔树脂吸附，树脂柱高径比为20：3-40：3，上样液花色苷浓度在2mg/mL-3mg/mL，上样流速0.5BV/h-1BV/h，上样终点为流出液中花色苷含量达到0.2mg/mL-0.3mg/mL；终止上样后使用纯净水清洗树脂柱，流速2.5BV/h，清洗2h-3h，除去上样液存留在树脂中水溶性杂质；用75%-85%乙醇在流速1.5BV/h-2BV/h条件下冲洗树脂柱，洗脱3h-4h得到蓝莓花色苷洗脱液；然后置于-20℃下沉降24h后，5000r/min离心10min取上清液。上清液经40℃-45℃下真空旋转蒸发除去乙醇后，使用1-2倍的乙酸乙酯萃取脂溶性杂质，静置分层后收集水相。将蓝莓花色苷水溶液在40℃-45℃进行真空冷冻干燥，得到蓝莓花青素粉末。操作过程中温度不得超过45℃。本专利技术的优点是：1、浓缩过程使用膜操作简单、能耗低、无污染。2、大孔树脂活化方便迅速，选择性强且可重复使用，适合大型生产。3、提取剂乙醇可以回收重复利用。4、真空冷冻干燥使得花青素性质稳定不变性。5、提取的蓝莓花色苷纯度高达40%。具体实施方式实施例1称蓝莓果渣5Kg化冻后，加入5Kg纯净水水和2.5g果胶酶后用匀浆机打成匀浆,在温度45℃条件下真空罐内酶解120min，200目过滤得滤渣和酶解液，滤渣称重4.2Kg，加入63Kg重的60%乙醇溶液，混合均匀后在45℃下浸取120min后200目过滤得滤渣和浸提液，滤渣3Kg，加入45Kg重的60%乙醇溶液，混合均匀后在45℃下浸取180min后200目过滤得滤渣和浸提液；将得到的浸提液和酶解液合并得花色苷粗提液。将粗提液过超滤膜，取其透过液；再将透过液过纳滤膜，取其浓缩液，得纳滤浓缩液，将其在40℃-45℃下真空旋转蒸发，除去溶液中乙醇，得花色苷浓缩液。将花色苷浓缩液用水稀释到2.5mg/mL，经大孔树脂吸附，树脂柱Φ24*160mm，上样流速0.9mL/min,流出液中花色苷含量达到0.25mg/mL时终止上样，2.5mg/mL花色苷溶液共计使用1380mL；然后用纯净水清洗树脂柱，流速3mL/min，清洗2h；用75%乙醇冲洗树脂柱，流速1.8mL/min，洗脱4h得到蓝莓花色苷洗脱液432mL；然后置于-20℃下沉降24h后，5000r/min离心10min取上清液。上清液经40℃-45℃下真空旋转蒸发除去乙醇80mL，使用160mL乙酸乙酯萃取，静置分层后收集水相。将80mL蓝莓花色苷水溶液冷冻后，在40℃-45℃进行真空冷冻干燥，得到蓝莓花青素粉末8g，纯度40.2%。操作过程中温度不得超过45℃。树脂柱再用水冲洗将乙醇溶液置换后，可再次上样。实施例二称蓝莓果渣10Kg化冻后，加入10Kg纯净水水和5g果胶酶后用匀浆机打成匀浆,在温度45℃条件下真空罐内酶解120min，200目过滤得滤渣和酶解液，滤渣称重8Kg，加入120Kg重的60%乙醇溶液，混合均匀后在45℃下浸取150min后200目过滤得滤渣和浸提液，滤渣6.1Kg，加入91.5Kg重的60%乙醇溶液，混合均匀后在45℃下浸取180min后200目过滤得滤渣和浸提液；将得到的浸提液和酶解液合并得花色苷粗提液。将粗提液过超滤膜，取其透过液；再将透过液过纳滤膜，取其浓缩液，得纳滤浓缩液，将其在40℃-45℃下真空旋转蒸发，除去溶液中乙醇，得花色苷浓缩液。将花色苷浓缩液用水稀释到3.0mg/mL，经大孔树脂吸附，树脂柱Φ24*240mm，上样流速1.35mL/min,流出液中花色苷含量达到0.3mg/mL时终止上样，3.0mg/mL花色苷溶液共计使用1674mL；然后用纯净水清洗树脂柱，流速4.5mL/min，清洗2.5h；用80%乙醇冲洗树脂柱，流速3.15mL/min，洗脱3.5h得到蓝莓花色苷洗脱液661mL；然后置于-20℃下沉降24h后，5000r/min离心10min取上清液。上清液经40℃-45℃下真空旋转蒸发除去乙醇110mL，使用110mL乙酸乙酯萃取，静置分层后收集水相。将110mL蓝莓花色苷水溶液冷冻后，在40℃-45℃进行真空冷冻干燥，得到蓝莓花青素粉末12.5g，纯度41.0%。操作过程中温度不得超过45℃。树脂柱再用水冲洗将乙醇溶液置换后，可再次上样。实施例三称蓝莓果渣20Kg化冻后，加入20Kg纯净水水和10g果胶酶后用匀浆机打成匀浆,在温度45℃条件下真空罐内酶解120min，200目过滤得滤渣和酶解液，滤渣称重17Kg，加入225Kg重的60%乙醇溶液，混合均匀后在45℃下浸取180min后200目过滤得滤渣和浸提液，滤渣13Kg，加入195Kg重的60%乙醇溶液，混合均匀后在45℃下浸取180min后200目过滤得滤渣和浸提液；将得到的浸提液和酶解液合并得花色苷粗提液。将粗提液过超滤膜，取其透过液；再将透过液过纳滤膜，取其浓缩液，得纳滤浓缩液，将其在40℃-45℃下真空旋转蒸发，除去溶液中乙醇，得花色苷浓缩液。将花色苷浓缩液用水稀释到2.5mg/mL，经大孔树脂吸附，树脂柱Φ24*320mm，上样流速2.4mL/min,流出液中花色苷含量达到0.25mg/mL时终止上样，2.5mg/mL花色苷溶液共计使用2820mL；然后用纯净水清洗树脂柱，流速6mL/min，清洗3h；用75%乙醇冲洗树脂柱，流速3.6mL/min，洗脱4h得到蓝莓花色苷洗脱液864mL；然后置于-2本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种蓝莓花色苷的制备方法，其特征是操作步骤为：（1）蓝莓果渣称重，加入1倍重量的水和0.05%果胶酶后用匀浆机打成匀浆,在温度45℃条件下真空酶解120min，200目过滤，得滤渣和酶解液；滤渣称重后加入15倍的60%乙醇溶液，混合均匀后在45℃下浸提120min‑180min后200目过滤得滤渣和浸提液，提取两遍；将得到的提取液和酶解液合并得花色苷粗提液；（2）将粗提液过超滤膜，取其透过液；再将透过液过纳滤膜，取其浓缩液，得纳滤浓缩液，将其在40℃‑45℃下真空旋转蒸发，出去溶液中乙醇，得花色苷浓缩液；（3）花色苷浓缩液经大孔树脂吸附，树脂柱高径比为20：3‑40：3，上样液花色苷浓度在2mg/mL‑3mg/mL，上样流速0.5BV/h‑1BV/h，上样终点为流出液中花色苷含量达到0.2mg/mL‑0.3mg/mL；终止上样后使用纯净水清洗树脂柱，流速2.5BV/h，清洗2h‑3h，除去上样液存留在树脂中水溶性杂质；用75%‑85%乙醇在流速1.5BV/h‑2BV/h条件下冲洗树脂柱，洗脱3h‑4h得到蓝莓花色苷洗脱液，‑20℃沉降24h后离心取上清液；（5）上清液经40℃‑45℃下真空旋转蒸发除去乙醇后，使用1‑2倍的乙酸乙酯萃取脂溶性杂质，静置分层后收集水相；（6）将蓝莓花色苷水溶液在40℃‑45℃进行真空冷冻干燥，得到蓝莓花青素粉末，纯度达40%；操作过程中温度不得超过45℃。...

【技术特征摘要】
1.一种蓝莓花色苷的制备方法，其特征是操作步骤为：（1）蓝莓果渣称重，加入1倍重量的水和0.05%果胶酶后用匀浆机打成匀浆,在温度45℃条件下真空酶解120min，200目过滤，得滤渣和酶解液；滤渣称重后加入15倍的60%乙醇溶液，混合均匀后在45℃下浸提120min-180min后200目过滤得滤渣和浸提液，提取两遍；将得到的提取液和酶解液合并得花色苷粗提液；（2）将粗提液过超滤膜，取其透过液；再将透过液过纳滤膜，取其浓缩液，得纳滤浓缩液，将其在40℃-45℃下真空旋转蒸发，出去溶液中乙醇，得花色苷浓缩液；（3）花色苷浓缩液经大孔树脂吸附，树脂柱高径比为20：3-40：3，上样液花色苷浓度在2mg/mL-3mg/mL，上样流速0...

【专利技术属性】
技术研发人员：李斌，王维生，王淼，刘刚，孟宪军，郑彦杰，
申请(专利权)人：沈阳市皇冠蓝莓产业有限公司，
类型：发明
国别省市：辽宁,21