测定含乳饮料中甜菊糖苷含量的方法技术

本发明专利技术提出了测定含乳饮料中甜菊糖苷含量的方法。所述方法包括：(1)将所述含乳饮料与乙酸铅溶液进行第一混合，并将得到的第一混合液进行第一离心，分离所得到的沉淀和第一上清液；(2)将所述沉淀与流动相进行第二混合，并将所得到的第二混合液进行第二离心，收集第二上清液；(3)合并所述第一上清液和第二上清液，并用所述流动相定容，并将所得到的第三混合液进行过滤，得到待测液；以及(4)利用色谱法对所述待测液进行检测，并基于检测结果确定所述含乳饮料中甜菊糖苷含量。本发明专利技术的方法准确性强、精密度高、稳定性好、操作简便。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及食品领域。具体地，本专利技术涉及测定含乳饮料中甜菊糖苷含量的方法。
技术介绍
甜菊糖苷是一种天然的非营养型高甜度甜味剂，它是从原产南美巴拉圭和巴西的菊科多年生灌木植物甜叶菊(steviarebaudianabertoni)的叶子中提取而得到的，其甜度是蔗糖的250～300倍，有后苦和青草味。甜菊糖苷具有高甜度、低热量、无毒等特性，长期食用不会使人发胖，特别适宜肥胖病、糖尿病、高血压、动脉硬化、龋齿病患者使用，而且物理、化学性质稳定、无发酵性，可延长甜菊糖苷制品的保质期。因而，被广泛应用在食品和药物行业中，被誉称为继蔗糖、甜菜糖之后的第三种天然糖源。甜菊糖苷代替蔗糖符合现代人对健康理念的要求，因此开发甜菊糖苷具有极广阔的前景。含乳饮料是指以新鲜牛乳(或乳粉)为主要原料，经发酵或不发酵，加入水与适量辅料(如可可、咖啡、果汁和蔗糖等)加工而成的具有相应风味的饮品。然而，目前含乳饮料中甜菊糖苷含量的检测方法仍有待开发。
技术实现思路
本专利技术旨在至少解决现有技术中存在的技术问题之一。为此，本专利技术提出了测定含乳饮料中甜菊糖苷含量的方法，该方法准确性强、精密度高、稳定性好、操作简便。需要说明的是，本专利技术是基于专利技术人的下列发现而完成的：目前甜菊糖苷的检测方法主要是地方标准方法DBSS22/007-2012《食品安全地方标准食品中甜菊糖苷的测定高效液相色谱法》，该前处理方法较为繁琐，不适合基质较复杂的含乳饮料中甜菊糖苷的检测。而国标GB8270-2014《食品安全国家标准食品添加剂甜菊糖苷》只是简单的介绍了水溶性样品的提取及检测方法，相对于基质较复杂的含乳饮料而言不适合。有鉴于此，专利技术人经过大量实验发现，预先将含乳饮料与乙酸铅溶液混合，以沉淀脂肪、蛋白质等杂质，通过离心除去沉淀，得到的上清液，再利用流动相进一步萃取沉淀中的甜菊糖苷，并将所得到的待测液进行色谱法检测，从而能够准确地测定出含乳饮料中甜菊糖苷含量。由此，根据本专利技术实施例的测定含乳饮料中甜菊糖苷含量的方法准确性强、精密度高、稳定性好、操作简便。为此，本专利技术提出了一种测定含乳饮料中甜菊糖苷含量的方法。根据本专利技术的实施例，所述方法包括：(1)将所述含乳饮料与乙酸铅溶液进行第一混合，并将得到的第一混合液进行第一离心，分离所得到的沉淀和第一上清液；(2)将所述沉淀与流动相进行第二混合，并将所得到的第二混合液进行第二离心，收集第二上清液；(3)合并所述第一上清液和第二上清液，并用所述流动相定容，再将所得到的第三混合液进行过滤，得到待测液；以及(4)利用色谱法对所述待测液进行检测，并基于检测结果确定所述含乳饮料中甜菊糖苷含量。专利技术人发现，含乳饮料中基质较复杂，若直接进行离心、收集上清液，并对上清液进行检测，则基质干扰较大，导致检测结果不准确，且对仪器造成损害。进而，专利技术人发现，预先利用有机溶剂将含乳饮料中的大量基质沉淀，对含有甜菊糖苷的上清液进行检测，能够有效地避免基质干扰，从而提高检测结果的准确性、精密度及稳定性。为此，专利技术人经过大量实验得到最优有机溶剂—乙酸铅，乙酸铅能够充分沉淀蛋白质、脂肪等物质，而甜菊糖苷保留在上清液中，且得到的上清液较澄清，对后续的色谱法检测的干扰较小，从而较大程度地提高了检测结果的准确性。由此，根据本专利技术实施例的测定含乳饮料中甜菊糖苷含量的方法准确性强、精密度高、稳定性好、操作简便。根据本专利技术的实施例，上述测定含乳饮料中甜菊糖苷含量的方法还可以具有下列附加技术特征：根据本专利技术的实施例，所述乙酸铅溶液的浓度为2体积％。由此，根据本专利技术实施例的测定含乳饮料中甜菊糖苷含量的方法准确性强、精密度高、稳定性好、操作简便。根据本专利技术的实施例，基于5g所述含乳饮料，所述乙酸铅溶液的用量为0.5～1mL，优选0.5mL。由此，根据本专利技术实施例的测定含乳饮料中甜菊糖苷含量的方法准确性强、精密度高、稳定性好、操作简便。根据本专利技术的实施例，步骤(2)中，基于5g所述含乳饮料，所述流动相的用量为20mL。由此，根据本专利技术实施例的测定含乳饮料中甜菊糖苷含量的方法准确性强、精密度高、稳定性好、操作简便。根据本专利技术的实施例，所述流动相为磷酸-乙腈溶液，所述磷酸-乙腈溶液中乙腈与磷酸的体积比为3：7。由此，根据本专利技术实施例的测定含乳饮料中甜菊糖苷含量的方法准确性强、精密度高、操作简便。根据本专利技术的实施例，所述色谱法检测条件如下：色谱柱：艾杰尔C18色谱柱(250mm×4.6mm，5.0μm)；流速：1.0mL/min；0.002mol/L所述流动相；进样量：20μL；柱温：30℃；波长：210nm。由此，根据本专利技术实施例的测定含乳饮料中甜菊糖苷含量的方法准确性强、精密度高、稳定性好、操作简便。根据本专利技术的实施例，所述第一混合和第二混合分别独立地包括进行超声5～10min。由此，根据本专利技术实施例的测定含乳饮料中甜菊糖苷含量的方法准确性强、精密度高、稳定性好、操作简便。根据本专利技术的实施例，所述第一离心和第二离心分别独立地在3000～5000r/min的转速下进行5～10min，优选4000r/min的转速下进行5min。由此，根据本专利技术实施例的测定含乳饮料中甜菊糖苷含量的方法准确性强、精密度高、稳定性好、操作简便。另外，本专利技术提出了另一种测定含乳饮料中甜菊糖苷含量的方法。根据本专利技术的实施例，所述方法包括：1)称取5g所述含乳饮料于50mL离心管中，加入0.5mL2体积％乙酸铅水溶液，超声10min后，4000r/min离心5min，取所得到的第一上清液于50ml容量瓶中，沉淀保留在离心管中；2)加入10ml的流动相(磷酸-乙腈溶液，其中乙腈与磷酸的体积比为3：7)于所述离心管中，超声5min后，4000r/min离心5min，取所得到的第二上清液于所述容量瓶中，沉淀保留在所述离心管中；3)重复步骤2)的操作2次，每次所述流动相的用量为5mL；4)于所述容量瓶中，用所述流动相定容，得到待测液；5)称取甜菊糖苷标准品，配制浓度分别为5.0μg/mL、10.0μg/mL、20.0μg/mL、50.0μg/mL、100.0μg/mL的甜菊糖苷标准溶液，0.22nm有机膜过滤，得到系列标准溶液；6)利用液相色谱分别对所述待测液及系列标准溶液进行检测，将所得到的系列标准溶液的峰面积与溶液浓度绘制标准曲线，并将所述待测液的峰面积代入所述标准曲线，以便确定所述含乳饮料中甜菊糖苷含量，其中，色谱检测条件如下：色谱柱：艾杰尔C18色谱柱(250mm×4.6mm，5.0μm)；流速：1.0mL/min；流动相：0.002mol/L磷酸-乙腈溶液，磷酸-乙腈溶液中乙腈与磷酸的体积比为3：7；进样量：20μL；柱温：30℃；波长：210nm。由此，根据本专利技术实施例的测定含乳饮料中甜菊糖苷含量的方法准确性强、精密度高、稳定性好、操作简便。本专利技术的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本专利技术的实践了解到。附图说明本专利技术的上述和/或附加的方面和优点从结合下面附图对实施例的描述中将变得明显和容易理解，其中：图1显示了根据本专利技术一个实施例的测定含乳饮料中甜菊糖苷含量的方法的流程示意图。具体实施方式下面详细描述本专利技术的实施例。下面描本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种测定含乳饮料中甜菊糖苷含量的方法，其特征在于，包括：1)称取5g所述含乳饮料于50mL离心管中，加入0.5mL 2体积％乙酸铅水溶液，超声10min后，4000r/min离心5min，取所得到的第一上清液于50ml容量瓶中，沉淀保留在所述离心管中；2)加入10ml的流动相(磷酸‑乙腈溶液，其中乙腈与磷酸的体积比为3：7)于所述离心管中，超声5min后，4000r/min离心5min，取所得到的第二上清液于所述容量瓶中，沉淀保留在所述离心管中；3)重复步骤2)的操作2次，每次所述流动相的用量为5mL；4)于所述容量瓶中，用所述流动相定容，得到待测液；5)称取甜菊糖苷标准品，配制浓度分别为5.0μg/mL、10.0μg/mL、20.0μg/mL、50.0μg/mL、100.0μg/mL的甜菊糖苷标准溶液，0.22nm有机膜过滤，得到系列标准溶液；6)利用液相色谱分别对所述待测液及系列标准溶液进行检测，将所得到的系列标准溶液的峰面积与溶液浓度绘制标准曲线，并将所述待测液的峰面积代入所述标准曲线，以便确定所述含乳饮料中甜菊糖苷含量，其中，色谱检测条件如下：色谱柱：艾杰尔C18色谱柱(250mm×4.6mm，5.0μm)；流速：1.0mL/min；流动相：0.002mol/L磷酸‑乙腈溶液，所述磷酸‑乙腈溶液中乙腈与磷酸的体积比为3：7；进样量：20μL；柱温：30℃；波长：210nm。...

【技术特征摘要】
1.一种测定含乳饮料中甜菊糖苷含量的方法，其特征在于，包括：1)称取5g所述含乳饮料于50mL离心管中，加入0.5mL2体积％乙酸铅水溶液，超声10min后，4000r/min离心5min，取所得到的第一上清液于50ml容量瓶中，沉淀保留在所述离心管中；2)加入10ml的流动相(磷酸-乙腈溶液，其中乙腈与磷酸的体积比为3：7)于所述离心管中，超声5min后，4000r/min离心5min，取所得到的第二上清液于所述容量瓶中，沉淀保留在所述离心管中；3)重复步骤2)的操作2次，每次所述流动相的用量为5mL；4)于所述容量瓶中，用所述流动相定容，得到待测液；5)称取甜菊糖苷标准品，配制浓度分别为5.0μg/mL、10.0μg/mL、20.0μg/mL、50.0μg/mL、100.0μg/mL的甜菊糖苷标准溶液，0.22nm有机膜过滤，得到系列标准溶液；6)利用液相色谱分别对所述待测液及系列标准溶液进行检测，将所得到的系列标准溶液的峰面积与溶液浓度绘制标准曲线，并将所述待测液的峰面积代入所述标准曲线，以便确定所述含乳饮料中甜菊糖苷含量，其中，色谱检测条件如下：色谱柱：艾杰尔C18色谱柱(250mm×4.6mm，5.0μm)；流速：1.0mL/min；流动相：0.002mol/L磷酸-乙腈溶液，所述磷酸-乙腈溶液中乙腈与磷酸的体积比为3：7；进样量：20μL；柱温：30℃；波长：210nm。2.一种测定含乳饮料中甜菊糖苷含量的方法，其特征在于，包括：(1)将所述含乳饮料与乙酸铅溶液进行...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴腾，扎木则仁，魏文平，徐向峰，李照，常建军，李雪晶，李秋琴，王丽丽，石利凤，王秀波，胡彩霞，谢鑫，
申请(专利权)人：内蒙古蒙牛乳业集团股份有限公司，
类型：发明
国别省市：内蒙古;15