一种测定帕利哌酮原料中有关物质的方法技术

本发明专利技术公开了一种测定帕利哌酮原料中有关物质的方法，它包括如下步骤：高效液相色谱仪的固定相为十八烷基键合硅胶，流动相A为0.1mol/l甲酸铵缓冲液，流动相B为乙腈，流动相C为甲醇：正丙醇=1:1，柱温为30℃～36℃，检测波长为270nm～280nm。杂质A的线性范围为0.38~5.25μg/ml，杂质B的线性范围为0.38~5.25μg/ml，杂质C的线性范围为0.38~5.25μg/ml，杂质D的线性范围为0.38~5.25μg/ml，杂质E的线性范围为0.38~5.25μg/ml，帕利哌酮的线性范围为0.38~28.92μg/ml。本发明专利技术应用高效液相色谱法测定帕利哌酮原料药中有关物质，分离效率高、分析速度快、检测灵敏度高，通过检测帕利哌酮原料药中杂质的含量，能够更好控制帕利哌酮原料的质量。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及高效液相色谱
，具体涉及一种高效液相色谱法测定帕利哌酮原料中有关物质的方法。
技术介绍
帕利哌酮属于治疗精神分裂症急性期的药物，帕利哌酮原料药生产储存过程中可能存在多种杂质，去除不完全将影响药物的纯度和质量。对于该化合物的合成主要控制的有关物质有5个，对于帕利哌酮原料中存在的杂质需进行质量控制，因此，实现帕利哌酮及其有关物质的分离与检测，对其质量控制方面具有重要的现实意义。
技术实现思路
本专利技术的目的是建立一种测定帕利哌酮原料中有关物质的方法，更好的对帕利哌酮原料药中可能存在的杂质进行检测，以更好的控制帕利哌酮原料药的质量。本专利技术的技术方案是：高效液相色谱测定帕利哌酮原料药中有关物质的方法，它包括如下步骤：系统测试液的制备：称取杂质A对照品、杂质B对照品、杂质C对照品、杂质D对照品、杂质E对照品适量，置量瓶中，另称取帕利哌酮对照品适量，加甲醇溶液溶解并稀释制成每1ml中约含杂质A 3.75μg、杂质B 3.75μg、杂质C 3.75μg杂质D 3.75μg、杂质E 3.75μg、帕利哌酮25μg的混合溶液，作为系统测试液；对照品溶液制备：精密称取帕利哌酮对照品适量，精密称定，用甲醇溶解并用稀释液稀释制成每1mL约含25µg的溶液即得；供试品溶液制备：精密称取本品适量置容量瓶中加甲醇溶液溶解并稀释制成每1ml中约含帕利哌酮2.5mg的溶液，作为供试品溶液；空白溶液的制备：甲醇；测定：高效液相色谱仪的固定相为十八烷基键合硅胶，流动相A为0.1mol/l甲酸铵缓冲液，流动相B为乙腈，流动相C为甲醇：正丙醇=1:1，柱温为30℃～36℃，检测波长为270nm～280nm。吸取对照品溶液、供试品溶液、空白溶液各10µl注入液相色谱仪，记录色谱图；计算对照品溶液浓度的值与相应峰面积值的线性回归方程，相关系数而应不小于0.99，对照品溶液峰形对称，理论塔板数以帕利哌酮计达到2000以上；高效液相色谱法测定帕利哌酮原料药中有关物质的方法，所述流动相A为0.1mol/l甲酸铵缓冲液，流动相B为乙腈，流动相C为甲醇：正丙醇=1:1，其运行的比例变化为过程见表1梯度表；每克帕利哌酮原料中，单个杂质量不得超过2mg，杂质总量不得超过5mg。本专利技术的有益效果是：本专利技术应用高效液相色谱测帕利哌酮原料药中有关物质，分离效率高、分析速度快、检测灵敏度高，通过检测帕利哌酮原料药中有关物质，控制每克帕利哌酮原料药中单个杂质量不得超过2mg，杂质总量不得超过5mg，更好的对帕利哌酮原料药中可能存在的杂质进行检测，可以更好控制帕利哌酮原料药的质量。附图说明：图1为实施例1方法摸索色谱图；图2为实施例2方法摸索色谱图；图3为实施例3方法摸索色谱图；图4为实施例4流动相的确定色谱图；图5为实验例7系统适用性实验色谱图；图6为帕利哌酮杂质A峰面积与浓度曲线关系图；图7为帕利哌酮杂质C峰面积与浓度曲线关系图；图8为帕利哌酮杂质B峰面积与浓度曲线关系图；图9为帕利哌酮杂质E峰面积与浓度曲线关系图；图10为帕利哌酮峰面积与浓度曲线关系图；图11为帕利哌酮杂质D峰面积与浓度曲线关系图；图12为流动相比例变化测试结果对比图；图13为柱温变化结果对比图；图14为流速变化测试结果对比图；图15为pH变化结果对比；图16为检测波长变化结果对比；图17为色谱柱变化结果对比；图18为杂质A分子结构式；图19为杂质B结构式；图20为杂质C结构式；图21为杂质D结构式；图22为杂质E结构式；图23为帕利哌酮结构式。以下通过实施例形式再对本专利技术的内容作进一步详细说明，但不应就此理解为本专利技术上述主题范围内仅限于以下实施例。在不脱离本专利技术上述技术前提下，根据本领域普通技术知识和惯用手段做出的相应替换或变更的修改，均包括在本专利技术的范围内。实施例1流动相的确定系统测试液的制备：称取杂质A对照品、杂质B对照品、杂质C对照品、杂质D对照品、杂质E对照品适量，置量瓶中，另称取帕利哌酮对照品适量，加甲醇溶液溶解并稀释制成每1ml中约含杂质A 3.75μg、杂质B 3.75μg、杂质C 3.75μg杂质D 3.75μg、杂质E 3.75μg、帕利哌酮25μg的混合溶液，作为系统测试液；色谱柱：C18，250×4.6mm,5μm；波长：275nm；流速：1.25ml/min；进样量：10μl；柱温：35℃；流动相A：5gm/l乙酸铵缓冲液pH=6.0；流动相B：甲醇，梯度表见表2。结果见图1。结论：杂质E和主峰不能分离。实施例2流动相的确定系统测试液的制备，同实施例1；色谱柱：C18，250×4.6mm,5μm；波长：275nm；流速：1.25ml/min；进样量：10μl；柱温：35℃；流动相A：0.1mol/l甲酸铵缓冲液；流动相B：乙腈；流动相C：甲醇-四氢呋喃=1:1；运行梯度见表3。结果见图2。结论：四氢呋喃稳定剂对检测有干扰。实施例3流动相的确定系统测试液的制备，同实施例1；色谱柱：C18，250×4.6mm,5μm；波长：275nm；流速：1.25ml/min；进样量：10μl；柱温：35℃；流动相A：0.1mol/l甲酸铵缓冲液；流动相B：乙腈；流动相C：甲醇-四氢呋喃=1:1；运行梯度见表3，实施例3结果见图3。结论：杂质B和杂质C不能完全分离。实施例4流动相的确定系统测试液的制备，同实施例1；色谱柱：C18，250×4.6mm,5μm；波长：275nm；流速：1.25ml/min；进样量：10μl；柱温：35℃；流动相A：0.1mol/l甲酸铵缓冲液；流动相B：乙腈；流动相C：甲醇-正丙醇=1:1；运行梯度见表3，实施例4结果见图4。结论：杂质A、杂质B、杂质C、杂质D、杂质E和帕利哌酮均可达到完全分离。实施例5色谱柱的确定系统测试液的制备，同实施例1；色谱柱：C18，150×4.6mm,5μm；波长：275nm；流速：1.25ml/min；进样量：10μl；柱温：35℃；流动相A：0.1mol/l甲酸铵缓冲液；流动相B：乙腈；流动相C：甲醇-正丙醇=1:1；运行梯度见表3。结论：杂质B和杂质C不能完全分离。实施例6检测波长的确定。系统测试液的制备，同实施例1；色谱柱：C18，250×4.6mm,5μm；流速：1.25ml/min；进样量：10μl；柱温：35℃；流动相A：0.1mol/l甲酸铵缓冲液；流动相B：乙腈；流动相C：甲醇-正丙醇=1:1；运行梯度见表3。结论：在200～400nm波长范围内PDA扫描，杂质A 波长为275nm、杂质B 波长为277nm、杂质C 波长为278nm、杂质D 波长为278nm、杂质E 波长为281nm、帕利哌酮波长为277nm，折中考虑，故采用波长275nm。实验例7系统适用性实验系统测试液的制备：分别取帕利哌酮杂质A、帕利哌酮杂质B、帕利哌酮杂质C、帕利哌酮杂质D、帕利哌酮杂质E、帕利哌酮杂质F、帕利哌酮杂质G、帕利哌酮杂质H、帕利哌酮杂质I、帕利哌酮杂质J、帕利哌酮杂质K、帕利哌酮杂质N、帕利哌酮对照品适量，分别用甲醇稀释制成每1ml分别约含杂质A 3.75μg、杂质B 3.75μg、杂质C 3.75μg、杂质D 3.75μg、杂质E 3.75μg、杂质F 3.75μg、杂质本文档来自技高网...

【技术保护点】
高效液相色谱测定帕利哌酮原料药中有关物质的方法，其特征在于，它包括如下步骤：a）系统测试液的制备：称取杂质A对照品、杂质B对照品、杂质C对照品、杂质D对照品、杂质E对照品适量，置量瓶中，另称取帕利哌酮对照品适量，加甲醇溶液溶解并稀释制成每1ml中约含杂质A 3.75μg、杂质B 3.75μg、杂质C 3.75μg、杂质D 3.75μg、杂质E 3.75μg、帕利哌酮25μg的混合溶液，作为系统测试液；b）对照品溶液制备：精密称取帕利哌酮对照品适量，精密称定，用甲醇溶解并用稀释液稀释制成每1mL约含25µg的溶液即得；c）供试品溶液制备：精密称取本品适量置容量瓶中加甲醇溶液溶解并稀释制成每1ml中约含帕利哌酮2.5mg的溶液，作为供试品溶液；d）空白溶液的制备：甲醇；e）测定：高效液相色谱仪的固定相为十八烷基键合硅胶，流动相A为0.1mol/l甲酸铵缓冲液，流动相B为乙腈，流动相C为甲醇：正丙醇=1:1，柱温为30℃～36℃，检测波长为270nm～280nm，吸取对照品溶液、供试品溶液、空白溶液各10µl注入液相色谱仪，记录色谱图；f）计算对照品溶液浓度的值与相应峰面积值的线性回归方程，相关系数而应不小于0.99，对照品溶液峰形对称，理论塔板数以帕利哌酮计达到2000以上；g）高效液相色谱法测定帕利哌酮原料药中有关物质的方法，所述流动相A为0.1mol/l甲酸铵缓冲液，流动相B为乙腈，流动相C为甲醇：正丙醇=1:1，其运行的比例变化为过程见表1梯度表；每克帕利哌酮原料中，单个杂质量不得超过2mg，杂质总量不得超过5mg；。...

【技术特征摘要】
1.高效液相色谱测定帕利哌酮原料药中有关物质的方法，其特征在于，它包括如下步骤：a）系统测试液的制备：称取杂质A对照品、杂质B对照品、杂质C对照品、杂质D对照品、杂质E对照品适量，置量瓶中，另称取帕利哌酮对照品适量，加甲醇溶液溶解并稀释制成每1ml中约含杂质A 3.75μg、杂质B 3.75μg、杂质C 3.75μg、杂质D 3.75μg、杂质E 3.75μg、帕利哌酮25μg的混合溶液，作为系统测试液；b）对照品溶液制备：精密称取帕利哌酮对照品适量，精密称定，用甲醇溶解并用稀释液稀释制成每1mL约含25µg的溶液即得；c）供试品溶液制备：精密称取本品适量置容量瓶中加甲醇溶液溶解并稀释制成每1ml中约含帕利哌酮2.5mg的溶液，作为供试品溶液；d）空白溶液的制备：甲醇；e）测定：高效液相色谱仪的固定相为十八烷基键合硅胶，流动相A为0.1mol/l甲酸铵缓冲液，流动相B为乙腈，流动相C为甲醇：正丙醇=1:1，柱温为30℃～36℃，检测波长为270nm～280nm，吸取对照品溶液、供试品溶液、空白溶液各10µl注入液相色谱仪，记录色谱图；f）计算对照品溶液浓度的值与相应峰面积值的线性回归方程，相关系数而应不小于0.99，对照品溶液峰形对称，理论塔板数以帕利哌酮计达到2000以上；g）高效液相色谱法测定帕利哌酮原料药中有关物质的方法，所述流动相A为0.1mol/l甲酸铵缓冲液，流动相B为乙腈，流动相C为甲醇：正丙醇=1:1，其运行的比例变化为过程见表1梯度表；每克帕利哌酮原料中，单个杂质量不得超过2mg，杂质总量不得超过5mg； 。2.权利要求1所述的高效液相色谱测定帕利哌酮原料药中有关物质的方法，其特征在于，它包括如下步骤：a）系统测试液的制备：称取杂质A对照品、杂质B对照品、杂质C对照品、杂质D对照品、杂质E对照品适量，置量瓶中，另称取帕利哌酮对照品适量，加甲醇溶液溶解并稀释制成每1ml中约含杂质A 3.75μg、杂质B 3.75μg、杂质C 3.75μg杂质D 3.75μg、杂质E 3.75μg、帕利哌酮25μg的混合溶液，作为系统测试液；b）对照品溶液制备：精密称取帕利哌酮对照品适量，精密称定，用甲醇溶解并用稀释液稀释制成每1mL约含25µg的溶液即得；c）供试品溶液制备：精密称取本品适量置容量瓶中加甲醇溶液溶解并稀释制成每1ml中约含帕利哌酮2.5mg的溶液，作为供试品溶液；d）空白溶液的制备：甲醇；e）测定：高效液相色谱仪的固定相为十八烷基键合硅胶，流动相A为0.1mol/l甲酸铵缓冲液，流动相B为乙腈，流动相C为甲醇：正丙醇=1:1，柱温为30℃，检测波长为270nm，吸取对照品溶液、供试品溶液、空白溶液各10µl注入液相色谱仪，记录色谱图；f）计算对照品溶液浓度的值与相应峰面积值的线性回归方程，相关系数而应不小于0.99，对照品溶液峰形对称，理论塔板数以帕利哌酮计2000以上；g）高效液相色谱法测定帕利哌酮原料药中有关物质的方法，所述流动相A为0.1mol/l甲酸铵缓冲液，流动相B为乙腈，流动相C为甲醇：正丙醇=1:1，其运行的比例变化为过程见表1梯度表；每克帕利哌酮原料中，单个杂质量不得超过2mg，杂质总量不得超过...

【专利技术属性】
技术研发人员：王崇益，周志慧，汪武卫，
申请(专利权)人：江苏正大清江制药有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32