同时检测7种睡眠类化学药品的检测方法技术

本发明专利技术公开了一种改善睡眠类保健食品或中成药中非法添加卡马西平、盐酸氯丙嗪、奥氮平、盐酸多塞平、富马酸喹硫平、奥卡西平、舒必利等7种化学药品的补充检验方法。样品用甲醇超声提取后，色谱柱分离，流动相洗脱，DAD检测器检测。利用已建立的检测方法，进行方法学的验证，其结果各参数见正文，经验证，本法快速、专属性强，适用于对改善睡眠类保健食品或中成药中添加的化学药物的检测。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及医药
，具体为针对改善睡眠类保健食品或中成药中非法添加的卡马西平、盐酸氯丙嗪、奥氮平、盐酸多塞平、富马酸喹硫平、奥卡西平、舒必利等7种化学药品的检测方法。
技术介绍
由于生活节奏加快，工作压力加大，社会中失眠患者日益增多，借助药物来改善睡眠的人群也在不断增加。许多人认为保健食品的副作用小，作用缓和，愿意购买保健食品来提高睡眠质量。但是，不法分子为了达到快速治疗失眠的效果，在保健食品或中成药中非法添加镇静催眠类化学药物。此类药物往往会造成相当严重的不良反应，而且具有耐药性和依赖性，大多被列为国家二类精神药品，必须在医师指导下用药。如卡马西平具有嗜睡作用，但其为抗惊厥、三叉神经痛药，并有抗抑郁及抗心律失常的作用；氯丙嗪为抗精神病药，具有神经安定作用，长期使用会产生耐药性。因此，测定保健食品或中成药中非法添加的化学药物对保障公民的身体健康有重要意义。现有的药品及保健食品补充检验方法中收录的改善睡眠类非法添加的化学药物有22种，根据近年来我所检测近500批次的结果，未发现有添加上述药物。除上述22种药物之外，还有一些具有睡眠作用的精神类药物也可能添加到保健食品或中成药中，如氯丙嗪、卡马西平，具有嗜睡作用。因此有必要对改善睡眠类保健食品或中成药中非法添加的其他精神类药品进行检测方法的研究。目前，国家局已经批准的用于改善睡眠类保健食品或中成药非法添加化学药品的补充检验方法有3个，分别为国家食品药品监管局药品检验补充检验方法和检验项目批准件2012004、2009024和2013002，其中包括22种非法添加的化学药品的检测，如氯氮卓、马来酸咪达唑仑、硝西泮、艾司唑仑、奥沙西泮、阿普唑仑、劳拉西泮、氯硝西泮、三唑仑、地西泮、巴比妥、苯巴比妥、司可巴比妥、异戊巴比妥、氯美扎酮、褪黑素、佐匹克隆、氯苯那敏、扎来普隆、文拉法辛、青藤碱、罗通定，但根据我所及外省检验结果，以及文献报道，鲜有检出上述化学药品。对于辅助睡眠保健食品尤其是不含褪黑素的保健食品是否还有其他化学药品的添加，用已有的补充检验方法不能够解决这个问题，文献报道也没有上述化学药品非法添加的检测方法，因此申请人建立了新的7种具有睡眠功能的化学药品的补充检验方法，供非法添加筛选工作应用。
技术实现思路
由于HPLC-DAD法在保健食品非法添加的化学药物检测中初筛快速、成本低、应用广，因此，本专利技术的目的是建立HPLC-DAD法检测睡眠类保健食品或中成药中卡马西平等7种精神类药品的方法并进行方法学验证。本专利技术是采用如下技术方案实现的：一种同时检测7种睡眠类化学药品的检测方法实验材料：磷酸二氢钾，分析纯；甲醇，分析纯（提取）、色谱纯（流动相）；盐酸，分析纯。对照品：卡马西平，盐酸氯丙嗪，奥氮平，盐酸多塞平，富马酸喹硫平，奥卡西平，舒必利，购自中国食品药品检定研究院。仪器和设备：超声提取仪，电子天平（万分之一，十万分之一），高效液相色谱仪。具体步骤如下：（1）、样品预处理固体样品：精密称取一次服用量至50ml容量瓶中，加甲醇40ml，超声提取15min，放至室温，用甲醇定容至刻度。0.45µm膜过滤，取续滤液，作为样品待测液备用。液体试样：精密量取10ml于50ml容量瓶中，加甲醇30ml，超声提取15min，放至室温，用甲醇定容至刻度。0.45µm膜过滤，取续滤液，作为样品待测备用。（2）、测定2.1、色谱参考条件色谱柱：C18柱，4.6×250mm，5µm；柱温：室温35℃；流动相：甲醇-0.02mol/L磷酸二氢钾溶液。梯度洗脱：0-55min：甲醇5%-95%，磷酸二氢钾95%-5%；55-64min：甲醇95%-95%，磷酸二氢钾5%-5%；65-75min：甲醇5%-5%，磷酸二氢钾95%-95%。检测波长：250nm；流速：1.0mL/min。2.2、校准曲线的制备精密称定上述7种对照品约12mg分别至9个25mL容量瓶中，卡马西平，富马酸喹硫平和盐酸多塞平等3种对照品用约20mL的甲醇溶解，奥卡西平、舒必利、奥氮平和盐酸氯丙嗪等4种对照品用约20mL的乙腈溶解。用溶媒定容后，摇匀，作为储备液备用（约500μg/mL）。精密量取对照品储备液各1.0mL至同一个10mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，制成每1mL含对照品约50μg的对照品溶液。然后取5.0mL定容至10.0mL，摇匀，以此类推，配制成不同浓度的对照品溶液作为标准曲线。2.3、样品测定取上述样品、不同浓度对照品续滤液各10μL进样，进行测定。记录色谱图及样品溶液中与对照品保留时间相同的色谱峰的光谱图。2.4、计算供试品溶液中不得出现与对照品溶液保留时间一致的色谱峰，如果出现保留时间一致的色谱峰，则其光谱图应不一致，如果一致，则质谱图应不一致。对供试品溶液中出现与对照品溶液保留时间，光谱，质谱均一致的色谱峰，则判定为有非法添加，用以上方法进行定量。以峰面积为纵坐标，以不同进样浓度为横坐标，做标曲曲线，将样品峰面积带入，计算样品待测液浓度。计算非法添加物的含量，含量=浓度×定容体积×稀释倍数/称样量。还可以进行干扰排除，如色谱保留时间、光谱图均与对照品一致，则用液质联用仪测定，进行干扰排除。本专利技术提供的技术方案建立了使用同一种色谱条件同时测定辅助睡眠类保健食品或中成药中可能添加的7种化学药物的高效液相色谱法，在75min内完成了对各化合物的分析测定，在保证分离度的情况下，实现了快速高效的高通量分析，经验证，本方法准确度、重复性高，精密度、重复性好，可用于睡眠类保健食品或中成药中7种化学药品的定性筛查和定量检测。附图说明图1表示样品中各组分分离效果色谱图。图2表示样品测定图谱。具体实施方式下面对本专利技术的具体实施例进行详细说明。一种同时检测7种睡眠类化学药品的检测方法1、材料1.1、仪器戴安U3000高效液相色谱仪，MS-204s万分之一电子天平，DV215CD十万分之一电子天平，超声波提取仪。1.2、试剂磷酸二氢钾，分析纯；甲醇，分析纯（提取）、色谱纯（流动相）；盐酸，分析纯。对照品：卡马西平，批号：100142-20110S，规格：100mg，含量99.8%。来源：中国食品药品检定研究院。富马酸喹硫平，批号：100815-201202，规格：100mg，含量99.9%。来源：中国食品药品检定研究院。盐酸氯丙嗪，批号：100460-201302，规格：100mg，含量99.7%，来源：中国食品药品检定研究院。奥氮平，批号：100948-200801，规格：100mg，含量99.9%，来源：中国食品药品检定研究院。盐酸多塞平，批号：100069-201103，规格：100mg，含量99.5%，来源：中国食品药品检定研究院。奥卡西平，批号：100657-201102，规格：100mg，含量99.8%，来源：中国食品药品检定研究院。舒必利，批号：100203-200503，规格：100mg，含量100%，来源：中国食品药品检定研究院。米氮平，批号：1.1，含量100%，来源：欧洲药典参考标准品。盐酸西普肽兰，批号：1.0，含量100%，来源：欧洲药典参考标准品。因稳定性问题，本方法实施例中舍弃后两种物质的方法学验证。1.3、具体检测方法1.3.1、色谱条件色谱柱：C18本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种同时检测7种睡眠类化学药品的检测方法，其特征在于：包括如下步骤：（1）、样品预处理固体样品：精密称取一次服用量至容量瓶中，加甲醇，超声提取15min，放至室温，用甲醇定容至刻度；0.45µm膜过滤，取续滤液，作为样品待测液备用；液体试样：精密量取一次服用量于容量瓶中，加甲醇，超声提取15min，放至室温，用甲醇定容至刻度；0.45µm膜过滤，取续滤液，作为样品待测备用；（2）、测定2.1、色谱条件色谱柱：C18柱，4.6×250mm，5µm；柱温：室温35℃；流动相：甲醇‑0.02mol/L磷酸二氢钾溶液；梯度洗脱：0‑55min：甲醇5%‑95%，磷酸二氢钾95%‑5%；55‑64min：甲醇95%‑95%，磷酸二氢钾5%‑5%；65‑75min：甲醇5%‑5%，磷酸二氢钾95%‑95%；检测波长：250nm；流速：1.0mL/min；2.2、校准曲线的制备精密称定卡马西平、盐酸氯丙嗪、奥氮平、盐酸多塞平、富马酸喹硫平、奥卡西平、舒必利7种对照品，分别至7个容量瓶中，卡马西平、富马酸喹硫平和盐酸多塞平3种对照品用甲醇溶解，奥卡西平，舒必利、奥氮平和盐酸氯丙嗪4种对照品用乙腈溶解；分别用溶媒定容后，摇匀，作为储备液备用；精密量取对照品储备液各1.0mL至同一个10mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，制成每1mL含对照品50‑55μg的对照品溶液；然后取5.0mL定容至10.0mL，摇匀，以此类推，配制成不同浓度的对照品溶液作为标准曲线；2.3、样品测定取上述样品、不同浓度对照品续滤液分别进样，进行测定；记录色谱图及样品溶液中与对照品保留时间相同的色谱峰的光谱图；（3）、计算供试品溶液中不得出现与对照品溶液保留时间一致的色谱峰，如果出现保留时间一致的色谱峰，则其光谱图应不一致，如果一致，则质谱图应不一致；对供试品溶液中出现与对照品溶液保留时间、光谱、质谱均一致的色谱峰，则判定为有非法添加；以峰面积为纵坐标，以不同进样浓度为横坐标，做标曲曲线，将样品峰面积带入，计算样品待测液浓度；计算非法添加物的含量，含量=浓度×定容体积×稀释倍数/称样量。...

【技术特征摘要】
1.一种同时检测7种睡眠类化学药品的检测方法，其特征在于：包括如下步骤：（1）、样品预处理固体样品：精密称取一次服用量至容量瓶中，加甲醇，超声提取15min，放至室温，用甲醇定容至刻度；0.45µm膜过滤，取续滤液，作为样品待测液备用；液体试样：精密量取一次服用量于容量瓶中，加甲醇，超声提取15min，放至室温，用甲醇定容至刻度；0.45µm膜过滤，取续滤液，作为样品待测备用；（2）、测定2.1、色谱条件色谱柱：C18柱，4.6×250mm，5µm；柱温：室温35℃；流动相：甲醇-0.02mol/L磷酸二氢钾溶液；梯度洗脱：0-55min：甲醇5%-95%，磷酸二氢钾95%-5%；55-64min：甲醇95%-95%，磷酸二氢钾5%-5%；65-75min：甲醇5%-5%，磷酸二氢钾95%-95%；检测波长：250nm；流速：1.0mL/min；2.2、校准曲线的制备精密称定卡马西平、盐酸氯丙嗪、奥氮平、盐酸多塞平、富马酸喹硫平、奥卡西平、舒必利7种对照品，分别至7个容量瓶...

【专利技术属性】
技术研发人员：董培智，郭景文，申国华，施怀生，王子龙，
申请(专利权)人：山西省食品药品检验所，
类型：发明
国别省市：山西;14