一种仙茅中仙茅苷的测定方法技术

本发明专利技术公开了一种仙茅中仙茅苷的测定方法，包括以下步骤：步骤1：将仙茅粉碎后采用ASE萃取法萃取得到萃取液；步骤2：将萃取液稀释、离心、过滤后，得到上清液；步骤3：将上清液采用液相色谱法进行分析。本发明专利技术提供了一种仙茅中仙茅苷的测定方法，该方法操作简单，检测精度高。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及实验室检测领域，特别是一种仙茅中仙茅苷的测定方法。
技术介绍
2015年药典记录了取本品粉末(过三号筛)约1g，精密称定，精密加入甲醇50ml，称定重量，加热回流2小时，取出，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。精密量取续滤液20ml，蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。液相色谱检测条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.1％磷酸溶液(21：79)为流动相；检测波长为285nm。理论板数按仙茅苷峰计算应不低于3000。药典的方法操作过程复杂，对操作人员的操作技能要求高。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种仙茅中仙茅苷的测定方法，该方法操作简单，检测精度高。本专利技术提供的技术方案为：一种仙茅中仙茅苷的测定方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1：将仙茅粉碎后采用ASE萃取法萃取得到萃取液；步骤2：将萃取液稀释、离心、过滤后，得到上清液；步骤3：将上清液采用液相色谱法进行分析；其中，液相色谱法的分析条件为：a)仪器：液相色谱仪b)色谱柱规格：碳18液相色谱柱3mm*100mm3.0μmc)柱温：40℃d)流速：0.5mL/mine)流动相：甲醇和0.1wt％磷酸溶液的混合物，其中甲醇和0.1wt％磷酸溶液的体积比为19:81f)检测波长：285nm。本专利技术中的体积比均为20℃情况下的各组分的体积比。在上述的仙茅中仙茅苷的测定方法中，所述的步骤1具体为：S11：将仙茅粉碎后，过筛；S12：称取1重量份仙茅粉，与0.5重量份硅藻土混合均匀待用；S13：将S12中的混合物移入预先放好过滤膜的萃取池中，加入适量的硅藻土至达到萃取池的池口；盖上萃取池的盖子进行静态萃取；萃取结束后得到萃取液；萃取条件为：萃取溶剂为甲醇；萃取温度90℃；静态萃取时间5min；冲洗体积100％；静态循环次数2次。在上述的仙茅中仙茅苷的测定方法中所述的萃取池的体积为10ml。在上述的仙茅中仙茅苷的测定方法中所述的静态萃取的压力为1500psi。在上述的仙茅中仙茅苷的测定方法中所述的静态萃取的吹扫时间为100s。在上述的仙茅中仙茅苷的测定方法中步骤2具体为：将萃取液用甲醇稀释后在1500r/min的条件下离心并过滤，保留滤液。在上述的仙茅中仙茅苷的测定方法中液相色谱分析所用的仪器为Thermo U-3000双三元液相色谱仪。在上述的仙茅中仙茅苷的测定方法中所述的ASE萃取法所采用的仪器为ASE350快速溶剂萃取仪。本专利技术在采用上述技术方案后，其具有的有益效果为：本专利技术的检测方法操作简单，精度与药典方法的精度一致，重复性好。附图说明图1为本专利技术的仙茅苷线性关系的直角坐标图；图2为本专利技术的药典记载的色谱图、按照实施例1的色谱图、药典记载方法的色谱图。具体实施方式下面结合具体实施方式，对本专利技术的技术方案作进一步的详细说明，但不构成对本专利技术的任何限制。实施例1：将仙茅样品经粉碎机粉碎，过三号筛，约1g，精密称定，与0.5g硅藻土混合均匀，待用，移入到预先放好过滤膜的10ml萃取池中再加入适量硅藻土，轻轻振摇使之与池口在同一水平线上，拧紧萃取池上盖。萃取结束后，把萃取液转移于50ml容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，在15000r/min下离心5min，取上清液，进入LC测定。萃取条件(见表1)为：表1分析方法为LC液相色谱法，液相色谱分析条件：a)仪器：Thermo双三元液相(U-3000)b)色谱柱：Thermo Syncronis C18 3*100mm 3um，即碳18色谱仪，直径3mm，长度100mm，粒径3微米c)柱温：40℃d)流速：0.5mL/mine)流动相：甲醇-0.1％磷酸即19单位体积的甲醇和81单位体积的0.1wt％磷酸溶液的混合物；在本实施例中，体积比均为20℃的条件下的体积比。f)检测波长：285nm色谱分析有效性验证：取仙茅苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含70μg的溶液，即得仙茅苷对照品溶液。取仙茅对照品溶液(浓度：0.0204mg/ml)，分别精密吸取该溶液0.5μl、1μl、1.5μl、2μl、3μl进入LC测定，并依照上述方法测定，结果详见表2。以绝对进样量(μg)-平均峰面积进行线性回归，求得回归方程：y＝1898.1x+2.2775，R2＝0.9999。仙茅苷在0.0102～0.0312μg范围内呈良好的线性关系；其直角坐标关系见图1；其液相色谱图谱见图2中的标号3的图谱。表2仙茅苷线性关系实施例1的萃取方法的重现性验证：取相同批号的样品(批号：20150701)1g，共6份，精密称定，按ASE提取方法提取供试品溶液，进样量为2μl，以实施例1的色谱条件平行试验，测得样品中仙茅苷的含量见表2，RSD为1.6％，试验表明ASE提取方法重复性良好，结果详见表3。表3实施例1的萃取方法的精确度测试采用实施例1的ASE萃取方法和药典的萃取方法对仙茅进行萃取，仙茅为4批，批号分别为1508090，151118,20150701，141201；实施例1的ASE萃取方法对同一批次的仙茅采用相同型号规格但是不同的机器进行平行测试两次，分别为ASE1和ASE2表示。图2中标号2的图谱为样品1508090按照药典所记载的方法得到的色谱图；图2中标号1的图谱为样品1508090按照实施例1所记载的方法得到的色谱图。具体测试结果见下表4；表4以上所述的仅为本专利技术的较佳实施例，凡在本专利技术的精神和原则范围内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本专利技术的保护范围之内。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种仙茅中仙茅苷的测定方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1：将仙茅粉碎后采用ASE萃取法萃取得到萃取液；所述的步骤1具体为：S11：将仙茅粉碎后，过筛；S12：称取1重量份仙茅粉，与0.5重量份硅藻土混合均匀待用；S13：将S12中的混合物移入预先放好过滤膜的萃取池中，加入适量的硅藻土至达到萃取池的池口；盖上萃取池的盖子进行静态萃取；萃取结束后得到萃取液；萃取条件为：萃取溶剂为甲醇；萃取温度90℃；静态萃取时间5min；冲洗体积100％；静态循环次数2次；步骤2：将萃取液稀释、离心、过滤后，得到上清液；步骤3：将上清液采用液相色谱法进行分析；其中，液相色谱法的分析条件为：a)仪器：液相色谱仪b)色谱柱规格：碳18液相色谱柱3mm*100mm3.0μmc)柱温：40℃d)流速：0.5mL/mine)流动相：甲醇和0.1wt％磷酸溶液的混合物，其中甲醇和0.1wt％磷酸溶液的体积比为19:81f)检测波长：285nm。

【技术特征摘要】
1.一种仙茅中仙茅苷的测定方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1：将仙茅粉碎后采用ASE萃取法萃取得到萃取液；所述的步骤1具体为：S11：将仙茅粉碎后，过筛；S12：称取1重量份仙茅粉，与0.5重量份硅藻土混合均匀待用；S13：将S12中的混合物移入预先放好过滤膜的萃取池中，加入适量的硅藻土至达到萃取池的池口；盖上萃取池的盖子进行静态萃取；萃取结束后得到萃取液；萃取条件为：萃取溶剂为甲醇；萃取温度90℃；静态萃取时间5min；冲洗体积100％；静态循环次数2次；步骤2：将萃取液稀释、离心、过滤后，得到上清液；步骤3：将上清液采用液相色谱法进行分析；其中，液相色谱法的分析条件为：a)仪器：液相色谱仪b)色谱柱规格：碳18液相色谱柱3mm*100mm3.0μmc)柱温：40℃d)流速：0.5mL/mine)流动相：甲醇和0.1wt％磷酸溶液的混合物...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈学松，王丽丽，韦涛，梁美艳，黄新惠，
申请(专利权)人：广西壮族自治区梧州食品药品检验所，
类型：发明
国别省市：广西;45