本发明专利技术提供了一种2‑((S)‑4‑甲基‑2‑((S)‑2‑(2‑吗啉代乙酰氨基)‑4‑苯基丁酰胺基)戊酰氨基)‑3‑(S)‑苯基丙酸中杂质的检测方法，包括：采用高效液相色谱法对2‑((S)‑4‑甲基‑2‑((S)‑2‑(2‑吗啉代乙酰氨基)‑4‑苯基丁酰胺基)戊酰氨基)‑3‑(S)‑苯基丙酸进行检测；所述高效液相色谱法中的流动相为磷酸盐缓冲液和乙腈。本发明专利技术采用磷酸盐缓冲液以及洗脱能力较强的乙腈作为流动相，能够较好的分离出2‑((S)‑4‑甲基‑2‑((S)‑2‑(2‑吗啉代乙酰氨基)‑4‑苯基丁酰胺基)戊酰氨基)‑3‑(S)‑苯基丙酸中的杂质，检测的准确度较高。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及2-((S)-4-甲基-2-((S)-2-(2-吗啉代乙酰氨基)-4-苯基丁酰胺基)戊酰氨基)-3-(S)-苯基丙酸
，尤其涉及一种2-((S)-4-甲基-2-((S)-2-(2-吗啉代乙酰氨基)-4-苯基丁酰胺基)戊酰氨基)-3-(S)-苯基丙酸杂质的检测方法。
技术介绍
美国食品药品管理局(FDA)批准的治疗多发性骨髓瘤的药物包括新型蛋白酶体抑制药和新型免疫调节药。硼替佐米为第一个蛋白酶体抑制药，成功用于治疗血液系统恶性肿瘤，但在初始应答患者中经常复发，并且治疗期间发生了细胞毒性(周围神经病变)。借鉴硼替佐米应用和作用机制的研究，卡非佐米成功发展为新一代蛋白酶体抑制药，它选择性且不可逆地与蛋白酶体上的靶点结合。蛋白酶体参与哺乳动物细胞的大多数蛋白质的水解，与调节多重生理功能有关，是抗肿瘤药物的确定靶点。卡非佐米是微生物自然产物的结构类似物，为四肽蛋白酶体结构抑制药，选择性不可逆结合到20S蛋白酶体的苏氨酸活性位点的N-末端，蛋白水解的核心颗粒26S蛋白酶体。卡非佐米对蛋白酶体抑制作用不可逆，且需要合成新的蛋白用于恢复细胞的蛋白酶体活性，因此，与其他缓慢的可逆性抑制药相比，卡非佐米的蛋白酶体抑制作用更持久，对骨髓瘤患者具有一定疗效。2-((S)-4-甲基-2-((S)-2-(2-吗啉代乙酰氨基)-4-苯基丁酰胺基)戊酰氨基)-3-(S)-苯基丙酸是合成卡非佐米的重要中间体，具有式I所示的结构：药品在不同工艺条件下可能产生不同的杂质谱，药品中杂质的控制是药品研发的重要方面，也是临床毒性研究的重要指标。2-((S)-4-甲基-2-((S)-2-(2-吗啉代乙酰氨基)-4-苯基丁酰胺基)戊酰氨基)-3-(S)-苯基丙酸在合成工艺中、生产过程运输过程中以及在微弱的酸、碱、氧化性环境下均会产生杂质，2-((S)-4-甲基-2-((S)-2-(2-吗啉代乙酰氨基)-4-苯基丁酰胺基)戊酰氨基)-3-(S)-苯基丙酸中杂质种类的多少及杂质含量的多少对卡非佐米的质量有重要影响，因此2-((S)-4-甲基-2-((S)-2-(2-吗啉代乙酰氨基)-4-苯基丁酰胺基)戊酰氨基)-3-(S)-苯基丙酸中杂质的检测对卡非佐米的应用具有重要意义。目前，尚未发现有关于2-((S)-4-甲基-2-((S)-2-(2-吗啉代乙酰氨基)-4-苯基丁酰胺基)戊酰氨基)-3-(S)-苯基丙酸中杂质检测的相关报道。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种2-((S)-4-甲基-2-((S)-2-(2-吗啉代乙酰氨基)-4-苯基丁酰胺基)戊酰氨基)-3-(S)-苯基丙酸中杂质的检测方法，本专利技术提供的检测方法能够对一种2-((S)-4-甲基-2-((S)-2-(2-吗啉代乙酰氨基)-4-苯基丁酰胺基)戊酰氨基)-3-(S)-苯基丙酸中的杂质进行有效的检测。本专利技术提供了一种2-((S)-4-甲基-2-((S)-2-(2-吗啉代乙酰氨基)-4-苯基丁酰胺基)戊酰氨基)-3-(S)-苯基丙酸中杂质的检测方法，包括：采用高效液相色谱法对2-((S)-4-甲基-2-((S)-2-(2-吗啉代乙酰氨基)-4-苯基丁酰胺基)戊酰氨基)-3-(S)-苯基丙酸进行检测；所述高效液相色谱法检测过程中的流动相为磷酸盐缓冲液和乙腈。优选的，所述磷酸盐缓冲液的质量浓度为35mmol/L～45mmol/L。优选的，所述磷酸盐缓冲液的pH值为2.5～3.5。优选的，所述高效液相色谱检测过程中的流动相流速为0.9mL/min～1.2mL/min。优选的，所述高效液相检测过程中采用梯度洗脱的方式使流动相通过色谱柱，所述梯度洗脱的方法为：在0～27min，磷酸盐缓冲液在流动相中的质量含量从80％～90％下降到45％～60％，乙腈在流动相中的质量含量从10％～20％增加到40％～55％；在27min～35min，磷酸盐缓冲液在流动相中的质量含量从45％～60％下降到20％～30％，乙腈在流动相中的质量含量从40％～55％增加到70％～80％；在35min～45min，磷酸盐缓冲液在流动相中的质量含量保持20％～30％，乙腈在流动相中的质量含量保持70％～80％。优选的，所述高效液相色谱检测过程中的色谱柱填充剂为十八烷基键合硅胶。优选的，所述高效液相色谱检测过程中填充剂的粒度为3μm～6μm。优选的，所述高效液相色谱检测过程中的检测波长为200nm～230nm。优选的，2-((S)-4-甲基-2-((S)-2-(2-吗啉代乙酰氨基)-4-苯基丁酰胺基)戊酰氨基)-3-(S)-苯基丙酸中杂质的检测方法具体为：采用高效液相色谱法对2-((S)-4-甲基-2-((S)-2-(2-吗啉代乙酰氨基)-4-苯基丁酰胺基)戊酰氨基)-3-(S)-苯基丙酸进行检测；所述高效液相色谱检测过程中的色谱柱为C18色谱柱；流动相为乙腈和pH为3的40mmol/L的磷酸盐缓冲液；流动相流速为1mL/min；检测波长为210nm；所述液相色谱检测过程中流动相采用梯度洗脱的方式通过色谱柱，所述梯度洗脱的方法为：在0～27min，磷酸盐缓冲液在流动相中的质量含量从86％下降到55％，乙腈在流动相中的质量含量从14％增加到45％；在27min～35min，磷酸盐缓冲液在流动相中的质量含量从55％下降到25％，乙腈在流动相中的质量含量从45％增加到75％；在35min～45min，磷酸盐缓冲液在流动相中的质量含量保持25％，乙腈在流动相中的质量含量保持75％。优选的，所述2-((S)-4-甲基-2-((S)-2-(2-吗啉代乙酰氨基)-4-苯基丁酰胺基)戊酰氨基)-3-(S)-苯基丙酸中的杂质包括式K1～K4-SRS中的一种或几种：本专利技术采用磷酸盐缓冲液作为流动相中的水相，能够避免液相色谱检测过程中基线的飘逸以及出现波峰波谷样的波动，使小杂峰的灵敏度降低，而且2-((S)-4-甲基-2-((S)-2-(2-吗啉代乙酰氨基)-4-苯基丁酰胺基)戊酰氨基)-3-(S)-苯基丙酸以及其中的杂质对磷酸盐缓冲液不敏感，不会增加检测过程中的干扰，并且通过配合使用洗脱能力较强的乙腈作为有机相，使本专利技术提供的方法能够较好的分离出2-((S)-4-甲基-2-((S)-2-(2-吗啉代乙酰氨基)-4-苯 基丁酰胺基)戊酰氨基)-3-(S)-苯基丙酸中的杂质，杂质的分离度较好，检测的准确度较高。此外，本专利技术提供的2-((S)-4-甲基-2-((S)-2-(2-吗啉代乙酰氨基)-4-苯基丁酰胺基)戊酰氨基)-3-(S)-苯基丙酸中杂质的检测方法稳定性和重复性较好，检测方法稳定可靠。附图说明为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据提供的附图获得其他的附图。图1为本专利技术实施例1中制备2-((S)-4-甲基-2-((S)-2-(2-吗啉代乙酰氨基)-4-苯基丁酰胺基)戊酰氨基)-3-(S)-苯基丙酸的工艺流程图；图2为本专利技术实施例1制备得到的2-((S)-4-甲基-2-((S)-2-(2-吗啉代乙酰氨基)-4-苯本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种2‑((S)‑4‑甲基‑2‑((S)‑2‑(2‑吗啉代乙酰氨基)‑4‑苯基丁酰胺基)戊酰氨基)‑3‑(S)‑苯基丙酸中杂质的检测方法，包括：采用高效液相色谱法对2‑((S)‑4‑甲基‑2‑((S)‑2‑(2‑吗啉代乙酰氨基)‑4‑苯基丁酰胺基)戊酰氨基)‑3‑(S)‑苯基丙酸进行检测；所述高效液相色谱法检测过程中的流动相为磷酸盐缓冲液和乙腈。
【技术特征摘要】
1.一种2-((S)-4-甲基-2-((S)-2-(2-吗啉代乙酰氨基)-4-苯基丁酰胺基)戊酰氨基)-3-(S)-苯基丙酸中杂质的检测方法，包括：采用高效液相色谱法对2-((S)-4-甲基-2-((S)-2-(2-吗啉代乙酰氨基)-4-苯基丁酰胺基)戊酰氨基)-3-(S)-苯基丙酸进行检测；所述高效液相色谱法检测过程中的流动相为磷酸盐缓冲液和乙腈。2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述磷酸盐缓冲液的质量浓度为35mmol/L～45mmol/L。3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述磷酸盐缓冲液的pH值为2.5～3.5。4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述高效液相色谱检测过程中的流动相流速为0.9mL/min～1.2mL/min。5.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述高效液相检测过程中采用梯度洗脱的方式使流动相通过色谱柱，所述梯度洗脱的方法为：在0～27min，磷酸盐缓冲液在流动相中的质量含量从80％～90％下降到45％～60％，乙腈在流动相中的质量含量从10％～20％增加到40％～55％；在27min～35min，磷酸盐缓冲液在流动相中的质量含量从45％～60％下降到20％～30％，乙腈在流动相中的质量含量从40％～55％增加到70％～80％；在35min～45min，磷酸盐缓冲液在流动相中的质量含量保持20％～30％，乙腈在流动相中的质量含量保持70％～80％。6.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述高效液相色谱检测过程中的色谱柱填充剂为十八烷基键合硅胶。...
【专利技术属性】
技术研发人员：周敏，王青山，费洪，石功名，贺耘，
申请(专利权)人：重庆两江药物研发中心有限公司，
类型：发明
国别省市：重庆;50
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