一种区分新城疫病毒强弱毒的引物及其试剂盒、鉴别检测方法技术

本发明专利技术属于动物病原检测技术领域，具体涉及一种区分新城疫病毒强弱的引物及其试剂盒、鉴别检测方法，具体为：首先提取待测毒株的RNA，然后用30 μL DEPC水来溶解RNA；然后进行RT‑PCR反应；对DNA扩增结果进行琼脂糖凝胶电泳检验。本发明专利技术针对NDV强弱毒株F基因裂解位点的不同核苷酸序列设计的引物，具有特异性好，能够准确的区分新城疫病毒强弱毒株；且本发明专利技术提供的试剂盒灵敏度高，可检测新城疫病毒核酸不低于100ng/µL的待检样本，耗时短且检测准确、有效，便于临床的快速区分诊断。

Primer for distinguishing between strong and weak of Newcastle disease virus and its kit, identification and detection method

The invention belongs to the technical field of animal pathogen detection, in particular to a distinction between the strength of the Newcastle disease virus and its primer kit, differential detection method, firstly extracted from strain RNA, and then dissolved with 30 RNA L DEPC and RT water; PCR reaction; the results of DNA amplification of agarose gel electrophoresis test. Primers of different nucleotide sequences of the invention design for the NDV F gene of virulent and avirulent strains of the cleavage site, with good specificity, can distinguish between virulent and avirulent strains of Newcastle disease virus accurately; the kit provided by the invention has high sensitivity and the detection of Newcastle disease virus, but not less than 100ng/ L samples, and the detection accuracy of short time convenient and effective, the clinical diagnosis of rapid identification.

【技术实现步骤摘要】
一种区分新城疫病毒强弱毒的引物及其试剂盒、鉴别检测方法
本专利技术属于动物病原检测
，具体涉及一种区分新城疫病毒强弱的引物及其试剂盒、鉴别检测方法。
技术介绍
新城疫（Newcastledisease，ND）俗称鸡瘟，是由新城疫病毒（Newcastlediseasevirus，NDV）引起的一种高度接触性急性传染病，它以肠炎、严重腹泻和神经症状为特征，是危害养禽业的重要疫病之一，造成很大的经济损失。目前世界许多国家和地区都有本病的流行，世界动物卫生组织（OIE）将其列为法定报告的疫病（在2005年之前列为A类疫病），我国将其列为一类动物疫病，是《国家中长期动物疫病防治规划（2012-2020年）》确定的优先防治病种。NDV为单股、负链、不分节段的RNA病毒，基因组的长度有15186、15192bp，基因排列顺序为3’-NP-P-M-F-HN-L-5’。基因组包含6个编码基因，编码相应6个结构蛋白：内部蛋白为NP（核蛋白）、P（磷酸化蛋白）和L（RNA依赖性聚合酶）；外部蛋白为M膜蛋白、F（融合蛋白）和HN（血凝素-神经氨酸酶蛋白），P基因经RNA编辑还可产生2个非结构蛋白（V和本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种区分新城疫病毒强弱毒株的引物，其特征在于，所述扩增弱毒株的引物为：QF1：如SEQ ID NO:1所示；QF2：如SEQ ID NO:2所示；所述扩增强毒株的引物为：QF3：如SEQ ID NO:3所示；QF4：如SEQ ID NO:4所示。

【技术特征摘要】
1.一种区分新城疫病毒强弱毒株的引物，其特征在于，所述扩增弱毒株的引物为：QF1：如SEQIDNO:1所示；QF2：如SEQIDNO:2所示；所述扩增强毒株的引物为：QF3：如SEQIDNO:3所示；QF4：如SEQIDNO:4所示。2.一种区分新城疫病毒强弱毒株的试剂盒，其特征在于，包括权利要求1所述的区分新城疫病毒强弱毒株的引物。3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，还包括2×PCR反应液25μL（含酶）、上下游引物各1μL、cDNA模板5μL，ddH2O补充至50μL。4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述反应液是由dNTP和EX-Taq组成。5.一种利用权利要求2-4任一项所述的试剂盒的鉴别检测方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）提取待...

【专利技术属性】
技术研发人员：王友令，袁小远，孟凯，张玉霞，艾武，亓丽红，
申请(专利权)人：山东省农业科学院家禽研究所，
类型：发明
国别省市：山东,37