一种APMV‑4型病毒的检测方法技术

本发明专利技术属于生物技术领域，具体涉及一种APMV‑4型病毒的检测方法，该方法通过以下步骤实现：首先取200 μL的病毒尿囊液，进行样品RNA的提取，然后用25 μL DEPC水来溶解RNA，得待测产品；将上述待测产品进行一步法RT‑PCR反应；对DNA扩增结果进行琼脂糖凝胶电泳检验。本发明专利技术所建立的一步法的RT‑PCR技术具有快速、准确、灵敏等优点，可用于APMV‑4样品的检测，非常适合基层实验室的应用；本发明专利技术特异性的针对APMV‑4型病毒，可区分检测APMV‑1型和 APMV‑4型的病毒，特异性强，灵敏度高。

A detection method of APMV virus type 4

The invention belongs to the field of biotechnology, in particular relates to a method for detection of APMV virus type 4, the method is realized by the following steps: firstly, virus allantoic fluid from 200 mu L, extracted RNA samples, and then dissolved with 25 RNA L DEPC water, the product will be tested on; the products to be tested by one-step RT PCR reaction; the results of DNA amplification and agarose gel electrophoresis test. RT PCR technology one step set up by the invention has the advantages of rapid, accurate and sensitive, and can be used for APMV was detected in 4 samples, is very suitable for the primary laboratory; the specificity for APMV virus type 4, can distinguish between type 1 and APMV detection APMV type 4 virus strong specificity and high sensitivity.

【技术实现步骤摘要】
一种APMV-4型病毒的检测方法
本专利技术属于生物
，具体涉及一种APMV-4型病毒的检测方法。
技术介绍
禽副黏病毒(APMVs)属于副黏病毒科腮腺炎病毒属（禽流感病毒除外），常常能从世界各地的家禽及野生鸟类中分离得到。目前，腮腺炎病毒属的APMVs分为9个血清型(APMV1~9)。新城疫病毒是禽副黏病毒1型的代表，也是各禽副黏病毒类型中特点和研究最为透彻的。而对禽副黏病毒2~9(APMV2~9)的分子特性和致病性知之甚少，对于APMV-4的研究现在已获悉APMV-4只能从水禽中分离到，可导致病禽的肺炎、支气管炎等呼吸道症状。APMV-4的基因组全长是15054个核苷酸，并与副黏病毒“六规则”一致。基因组包含6个非重叠的基因，囊膜蛋白为NP（核蛋白）、P（磷酸化蛋白）和L（RNA依赖性聚合酶）；外部蛋白为M膜蛋白、F（融合蛋白）和HN（血凝素-神经氨酸酶蛋白）。目前针对APMV-4型病毒的相关研究非常少，关于本病的诊断研究则更少。文献《禽副黏病毒4型荧光RT-PCR检测方法的建立》提供了一种荧光RT-PCR检测方法，该方法成本高，需要昂贵的仪器设备，不适合普通基层实验室进行本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种APMV‑4型病毒的检测方法，其特征在于，该方法所采用的引物为：APMV4‑F：如SEQ ID NO：1所示；APMV4‑R：如SEQ ID NO：2所示。

【技术特征摘要】
1.一种APMV-4型病毒的检测方法，其特征在于，该方法所采用的引物为：APMV4-F：如SEQIDNO：1所示；APMV4-R：如SEQIDNO：2所示。2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）取200μL的病毒尿囊液，进行样品RNA的提取，然后用25μLDEPC水来溶解RNA，得待测产品；...

【专利技术属性】
技术研发人员：袁小远，王友令，杨金兴，张玉霞，于可响，宋敏训，亓丽红，
申请(专利权)人：山东省农业科学院家禽研究所，
类型：发明
国别省市：山东,37