本发明专利技术公开了一种由抗红细胞和抗乙肝表面抗原组成的基因工程双特异抗体及其应用，是利用基因工程重组技术通过缩短单链抗体连接肽的方法将抗红细胞和抗乙肝表面抗原改造成杂合抗体基因，组装于同一表达载体中，构成抗红细胞和抗乙肝表面抗原双特异抗体；可做为乙肝表面抗原检测试剂，检测血中乙肝表面抗原。由抗红细胞和抗乙肝表面抗原组成的双特异抗体，由于基因工程产品，可直接从细菌培养上清中获取，降低了产品的制备成本；在检测过程中不需要使用特殊设备，不受时间和地理位置的影响，具有操作简便、快捷的优点。（*该技术在2019年保护过期，可自由使用*）
【技术实现步骤摘要】
本专利技术公开了一种基因工程双特异抗体及其应用，特别涉及一种由抗红细胞和抗乙肝表面抗原组成的基因工程双特异抗体及其应用。目前，公知的双特异抗体主要有1993年英国剑桥大学的Winter教授通过缩短单链抗体连接肽的方法制备的由抗肿瘤细胞和抗免疫细胞表面标志CD3组成的双特异抗体，称为双特异Diabody，其在临床上主要作用于抗肿瘤治疗。由抗红细胞和抗乙肝表面抗原组成的基因工程双特异抗体及其应用尚无记载与应用。本专利技术的目的在于提供一种由抗红细胞和抗乙肝表面抗原组成的基因工程双特异抗体及其应用。本专利技术的目的是这样实现的A．双特异抗体基因本专利技术利用基因工程重组技术通过缩短单链抗体连接肽的方法将抗红细胞和抗乙肝表面抗原改造成杂合抗体基因，组装于PCOMb3H表达载体中(载体PCOMb3H的参考文献为CarlosF.BarbasⅢ andJurgen Wagner Synthetic Human Antibodies:Selecting andEvolving Functional Proteins METHODS:A Companion toMethods in Enzymology 1995；8:94-103)，构成抗红细胞和抗乙肝表面抗原双特异抗体；双特异抗体基因序列为GCCGAGCTCA CCCAGTCTCC ATCCTTCCTG TCTGCATCTATAGGAGACAG CGTCACCATC ACTTGCCGGA CCAGTCAGGACATTGATAAT TATTTAGCCT GGTATCAGCA AAAACCAGGAAAAGCCCCTA AGCTCCTGGT CTATTCTGCA TCCGCCTTGCAAGGTGGGGT CCCATCAAGG TTCAGCGGCA GTGGATCTAGGACAGATTTC ACTCTCACAA TCAACAGCCT GCAGCCTGAAGATTCTGCAA CTTATTACTG TCAACAGCTT GGAAGTTACCCACTCACTTT CGGCGGAGGG ACCAAGGTGG AGATCAAACGATCTAGAGGT GGTGGATCCG AGGTGCAGCT GCTCGAGCTTGCGGAGTCTG GGGGAGGCTT AGTGAAGCCT GGAGGGTCCCTGAAACTCTC CTGTACAACC TCTGGATTCG CTTTCAGTAGTTATGACATG TCTTGGGTTC GCCAGACTCC GGAGAAGAGGCTGGAGTGGG TCGCATACAT TAGTAGTGCT GGTGGTAGTATTTATTATTC AGACACTGTG AAGGACCGCT TCACCATCTCCAGAGACAAT GTCAAAAACA CCCTGTACCT GCAAATGAACAGTCTGAATT CTGAGGACAC AGCCATATAT TACTGTACAAGACACGGGCT CGGCTCCTAC TATGTTATGG ACTACTGGGGTCAAGGAACC TCAGTCACCG TCTCCTCAAC TAGTGAACAAAAACTCATCT CAGAAGAAGA TCTGGCTAGC CATCACCATCACCATCACTA AGTCGACAGG AGGAATTTAA AATGAAAAAGACAGCTATCG CGATTGCAGT GGCACTGGCT GGTTTCGCTACCGTGGCCCA GGCGGCCGAG CTCCAGATGA CCCAGTCTCCAGCCTCCCTA TCTGCATCTG TGGGAGAAAC TGTCACCATCACATGTCGAG CAAGTGAGAA TATTTACAGT TATTTAGCATGGTATCAGCA GAAACAGGGA AAATCTCCTC AGCTCCTGGTCTATAATGCA AAAACCTTAG CAGAAGGTGT GCCATCAAGGTTCAGTGGCA GTGGATCAGG CACACAGTTT TCTCTGAAGATCAACAGCCT GCAGCCTGAA GATTTTGGGA GTTATTACTGTCAACATCAT TATGGTACTC GTCTCACGTT CGGTGCTGGGACCAAGCTGG AGCTGAAACG GTCTAGAGGT GGTGGATCCGAGGTGCAGGT GCTCGAGGAG TCTGGGGGAG GCTTGGTACAGGCTGGGGGG TCCCTGAGAC TCTCCTGTGC AATCTCTGGATTCACCTTTA GTGACTATGC CGTGAGTTGG GTCCGCCAGGCTCCTGGGAA GGGGCTGGAG TGGGTCTCAA CCATCAGTGGCAGTGCTGGA AACACATACT ACGCAGACTC CGTGAAGGGCCGATTGATCA TCTCCAGAGA CACTTCCAGG AACATGCTATTTCTGCAAAT GAACAGCCTG AGAGCCGAGG ACACGGCCGTATATTACTGT GCGAAAGTCA AGATGGTTCG GGGTGGCTACTGGTTCTACG GTATGGACGT CTGGGGCCAA GGGACCGCGGTCAGAGTCTC CTCA；B．应用将双特异抗体基因转化大肠杆菌并分泌表达，离心收集细菌培养上清，上清中即含有抗红细胞和抗乙肝表面抗原双特异抗体，可做为乙肝表面抗原检测试剂，检测血中乙肝表面抗原。采用抗红细胞和抗乙肝表面抗原双特异基因制备而成的双特异抗体，由于基因工程产品，可直接从细菌培养上清中获取，降低了产品的制备成本；在检测过程中不需要使用特殊设备，只需采集未梢血，在室温放置1～2分钟便可完成检测，不受时间和地理位置的影响，具有操作简便、快捷的优点。使用双特异抗体检测血中乙肝表面抗原的方法是在玻片上滴加双特异抗体试剂50ml，采集未梢血(指血或耳垂血)20ml与试剂混匀，在室温放置1～2分钟，将玻片摇动观察凝集情况，判定结果，血球凝集者为乙肝表面抗原阳性。权利要求1．一种基因工程双特异抗体及其应用，利用基因工程重组技术通过缩短单链抗体连接肽的方法将抗红细胞和抗乙肝表面抗原改造成杂合抗体基因，组装于PCOMb3H表达载体中，构成抗红细胞和抗乙肝表面抗原双特异抗体基因；其特征在于双特异抗体基因序列为GCCGAGCTCA CCCAGTCTCC ATCCTTCCTG TCTGCATCTATAGGAGACAG CGTCACCATC ACTTGCCGGA CCAGTCAGGACATTGATAAT TATTTAGCCT GGTATCAGCA AAAACCAGGAAAAGCCCCTA AGCTCCTGGT CTATTCTGCA TCCGCCTTGCAAGGTGGGGT CCCATCAAGG TTCAGCGGCA GTGGATCTAGGACAGATTTC ACTCTCACAA TCAACAGCCT GCAGCCTGAAGATTCTGCAA CTTATTACTG TCAACAGCTT GGAAGTTACCCACTCACTTT CGGCGGAGGG本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种基因工程双特异抗体及其应用，利用基因工程重组技术通过缩短单链抗体连接肽的方法将抗红细胞和抗乙肝表面抗原改造成杂合抗体基因，组装于ＰＣＯＭｂ３Ｈ表达载体中，构成抗红细胞和抗乙肝表面抗原双特异抗体基因；其特征在于：双特异抗体基因序列为Ｇ ＣＣＧＡＧＣＴＣＡ ＣＣＣＡＧＴＣＴＣＣ ＡＴＣＣＴＴＣＣＴＧ ＴＣＴＧＣＡＴＣＴＡＴＡＧＧＡＧＡＣＡＧ ＣＧＴＣＡＣＣＡＴＣ ＡＣＴＴＧＣＣＧＧＡ ＣＣＡＧＴＣＡＧＧＡＣＡＴＴＧＡＴＡＡＴ ＴＡＴＴＴＡＧＣＣＴ ＧＧＴＡＴＣＡＧＣ Ａ ＡＡＡＡＣＣＡＧＧＡＡＡＡＧＣＣＣＣＴＡ ＡＧＣＴＣＣＴＧＧＴ ＣＴＡＴＴＣＴＧＣＡ ＴＣＣＧＣＣＴＴＧＣＡＡＧＧＴＧＧＧＧＴ ＣＣＣＡＴＣＡＡＧＧ ＴＴＣＡＧＣＧＧＣＡ ＧＴＧＧＡＴＣＴＡＧＧＡＣＡＧＡＴＴＴＣ ＡＣＴＣＴ ＣＡＣＡＡ ＴＣＡＡＣＡＧＣＣＴ ＧＣＡＧＣＣＴＧＡＡＧＡＴＴＣＴＧＣＡＡ ＣＴＴＡＴＴＡＣＴＧ ＴＣＡＡＣＡＧＣＴＴ ＧＧＡＡＧＴＴＡＣＣＣＡＣＴＣＡＣＴＴＴ ＣＧＧＣＧＧＡＧＧＧ ＡＣＣＡＡＧＧＴＧＧ ＡＧＡＴＣＡＡＡＣＧＡ ＴＣＴＡＧＡＧＧＴ ＧＧＴＧＧＡＴＣＣＧ ＡＧＧＴＧＣＡＧＣＴ ＧＣＴＣＧＡＧＣＴＴＧＣＧＧＡＧＴＣＴＧ ＧＧＧＧＡＧＧＣＴＴ ＡＧＴＧＡＡＧＣＣＴ ＧＧＡＧＧＧＴＣＣＣＴＧＡＡＡＣＴＣＴＣ ＣＴＧＴＡＣＡＡＣＣ ＴＣＴＧＧＡＴＴＣ Ｇ ＣＴＴＴＣＡＧＴＡＧＴＴＡＴＧＡＣＡＴＧ ＴＣＴＴＧＧＧＴＴＣ ＧＣＣＡＧＡＣＴＣＣ ＧＧＡＧＡＡＧＡＧＧＣＴＧＧＡＧＴＧＧＧ ＴＣＧＣＡＴＡＣＡＴ ＴＡＧＴＡＧＴＧＣＴ ＧＧＴＧＧＴＡＧＴＡＴＴＴＡＴＴＡＴＴＣ ＡＧＡＣＡ ＣＴＧＴＧ ＡＡＧＧＡＣＣＧＣＴ ＴＣＡＣＣＡＴＣＴＣＣＡＧＡＧＡＣＡＡＴ ＧＴＣＡＡＡＡＡＣＡ ＣＣＣＴＧＴＡＣＣＴ ＧＣＡＡＡＴＧＡＡＣＡＧＴＣＴＧＡＡＴＴ ＣＴＧＡＧＧＡＣＡＣ ＡＧＣＣＡＴＡＴＡＴ ＴＡＣＴＧＴＡＣＡＡＧ ＡＣＡＣＧＧＧＣＴ ＣＧＧＣＴＣＣＴＡＣ ＴＡＴＧＴＴＡＴＧＧ ＡＣＴＡＣＴＧＧＧＧＴＣＡＡＧＧＡＡＣＣ ＴＣＡＧＴＣＡＣＣＧ ＴＣＴＣＣＴＣＡＡＣ ＴＡＧＴＧＡＡＣＡＡＡＡＡＣＴＣＡＴＣＴ ＣＡＧＡＡＧＡＡＧＡ ＴＣＴＧＧＣＴＡＧ Ｃ ＣＡＴＣＡＣＣＡＴＣＡＣＣＡＴＣＡＣＴＡ ＡＧＴＣＧＡＣＡＧＧ ＡＧＧＡＡＴＴＴＡＡ ＡＡＴＧＡＡＡＡＡＧＡＣＡＧＣＴＡＴ...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：陈宇萍，王琰，
申请(专利权)人：中国人民解放军海军总医院，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]
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