抗肝癌基因工程单链抗体scFv25制造技术

本发明专利技术主要涉及基因工程。特别是关于一种抗肝癌基因工程单链抗体。这种抗肝癌基因工程单链抗体ｓｃＦｖ２５，它利用基因工程将单克隆抗体改造成单链抗体，用于克服鼠源性单克隆抗体用于病人会产生人抗鼠免疫球蛋白抗体的缺点。它除具有一般单链抗体的优点外，如分子量小、穿透能力强、免疫原性低、血循环及全身廓清快和容易基因工程大量生产等，进一步证明它保留并超出了ＨＡｂ２５的特异性及亲合性，并进行了人源化、稳定性及融合蛋白制备及应用，是一种非常具有临床应用潜力的基因工程抗体。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术主要涉及基因工程。特别是关于一种抗肝癌基因工程单链抗体。
技术介绍
按照世界卫生组织的统计，全世界每年就有100余万患者死于肝癌，而我国肝癌的发病率占全世界的42.5％。迄今国外的Shouval及Dunk等和国内的谢弘及我们等都报道了抗肝癌单克隆抗体，其中的一些单克隆抗体用131I标记后，进行了有效的临床肝癌放射免疫显像。然而鼠源性单克隆抗体用于病人会产生人抗鼠免疫球蛋白抗体，限制了在治疗中重复使用，因而使用基因工程的手段对单克隆抗体进行改造成鼠/人嵌合或单链抗体才是解决问题的好办法。虽然抗结肠癌、乳腺癌等肿瘤的基因工程鼠/人嵌合抗体、单链抗体等在国外已有许多报道，但抗肝癌的基因工程抗体国外目前尚未见报道，国内连我们的工作单位共有5个单位报导了肝癌单链抗体，如(1)牛利国等.细胞与分子免疫学杂志，1998，14(2)102-104。(2)毕向军、杨冬华.第一军医大学学报，2001，21(12)910-913.《肿瘤》2001，14(2)102-104。(3)谢捷明等。福建医学杂志，2000，22(1)203-205。(4)李赏等.免疫学杂志，2002，18(B)(06)20-21。我们最早在我国1996年克隆了单克隆抗体HAb25的轻链与重链的基因，1998年相继发表了抗肝癌基因工程单链抗体scFv25的应用论文，对scFv25进行了人源化、二硫键稳定以及融合蛋白的制备。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种抗肝癌基因工程单链抗体scFv25，它利用基因工程将单克隆抗体改造成单链抗体，用于克服上述缺点。本专利技术的技术方案是制备了一种抗肝癌基因工程单链抗体scFv25，它的氨基酸序列是ATG CAG GTG CAG CTG TTG GAG TCT GGG ACT GAA CTG GTG AAG CCT GGG GCT TCAM Q V Q L L E S G T E L. V K P G A SGTG AAA CTG TCC TGC AAA GCT TCT GGC TAC ACC TTC ACC AGT TAT TGG ATG CACV K L S C K A S G Y T F TS Y W M HVH-CDR1TGG GTG AAG CAG AGG CCT GGA CAA GGC CTT GAG TGG ATT GGA GAG ATT AAT CCTW V K Q R P G Q G L E WI G EIA PAGC AAC GGT CGT ATT TAC TAC AAT GAA AAG TTC AAG AAC AAG GCC ACA CTG ACTS N G R I Y Y N E K F KN KA T LTVH-CDR2 GTA GAC AAA TCC TCC AAC ACA GCC TAT ATG GAA CTC ACC AGC CTG ACA TCT GAGV D K S SN T AY M E LT S L T SEGAC TCT GCG GTC TAT TCT TGT GCA AGA TTG GTG GGA CCC TTC TCT TAC TGG GGCD S A V Y S C ARL V GP F S Y WGVH-CDR3CAA GGC ACC CTG GTC ACC GTC TCC TCA GAG CTC GGT GGA GGC GGT TCA GGT GGAQ G TL V T V S S E LGG G G SG GGGT GGC TCT GGC GGT GGC GGA TCT GGA TCC AGA TGT GAG CTC GTG ATG ACC CAGG G SG G G GSG S R CE L V MT QLinkerACT CCA CTC TCC CTG CCT GTC AGT CTT GGA GAT CAA GCC TCC ATC TCT TGC AGAT P L S L P V S L G D QA S I S CRTCT AGT CAG AGC CTT GTA CAC AGT AAT GGA AAC ACC TAT TTA CAT TGG TAC CTGS S QS L V H S NGN TY L H W Y LVL-CDR1CAG AAG CCA GGC CAG TCT CCA AAG CTC CTG ATC TAC AAA GTT TCC AAC CGA TTTQ K P G Q S P K LL I YK V S N R FVL-CDR2TCT GGG GTC CCA GAC AGG TTC AGT GGC AGT GGA TCA GGG ACA GAT TTC ACA CTCS G V P D R F SG S G SG T D FT LAAG ATC AGC AGA GTG GAG GCT GAG GAT CTG GGA GTT TAT TTC TGC TCT CAA AGTK I S R V E A ED L G VY F CSQ SACA CAT GTT CCG TAC ACG TTG GGA GGG GGG ACC AAG GTC GAG ATC AAA CGT GTCT H V P Y TL GG G T KL E L KR VVL-CDR3GACD。所述的抗肝癌基因工程单链抗体scFv25，它的重链氨基酸序列是ATG CAG GTG CAG CTG TTG GAG TCT GGG ACT GAA CTG GTG AAG CCT GGG GCT TCAM Q VQ L LE SG T E L. V K P G A SGTG AAA CTG TCC TGC AAA GCT TCT GGC TAC ACC TTC ACC AGT TAT TGG ATG CACV K LS C K A SG Y T F TS Y WM HVH-CDR1TGG GTG AAG CAG AGG CCT GGA CAA GGC CTT GAG TGG ATT GGA GAG ATT AAT CCTW V KQ R P G Q G L E WI G EIA PAGC AAC GGT CGT本文档来自技高网...

【技术保护点】
抗肝癌基因工程单链抗体ｓｃＦｖ２５，它的特殊氨基酸序列是：ＡＴＧ　ＣＡＧ　ＧＴＧ　ＣＡＧ　ＣＴＧ　ＴＴＧ　ＧＡＧ　ＴＣＴ　ＧＧＧ　ＡＣＴ　ＧＡＡ　ＣＴＧ　ＧＴＧ　ＡＡＧ　ＣＣＴ　ＧＧＧ　ＧＣＴ　ＴＣＡＭ　Ｑ　Ｖ　Ｑ　Ｌ　Ｌ　Ｅ　 Ｓ　Ｇ　Ｔ　Ｅ　Ｌ　Ｖ　Ｋ　Ｐ　Ｇ　Ａ　ＳＧＴＧ　ＡＡＡ　ＣＴＧ　ＴＣＣ　ＴＧＣ　ＡＡＡ　ＧＣＴ　ＴＣＴ　ＧＧＣ　ＴＡＣ　ＡＣＣ　ＴＴＣ　ＡＣＣ　ＡＧＴ　ＴＡＴ　ＴＧＧ　ＡＴＧ　ＣＡＣＶ　Ｋ　Ｌ　Ｓ　Ｃ　Ｋ　Ａ　Ｓ　Ｇ　Ｙ　Ｔ　Ｆ　 Ｔ　Ｓ　Ｙ　Ｗ　Ｍ　ＨＶＨ－ＣＤＲ１ＴＧＧ　ＧＴＧ　ＡＡＧ　ＣＡＧ　ＡＧＧ　ＣＣＴ　ＧＧＡ　ＣＡＡ　ＧＧＣ　ＣＴＴ　ＧＡＧ　ＴＧＧ　ＡＴＴ　ＧＧＡ　ＧＡＧ　ＡＴＴ　ＡＡＴ　ＣＣＴＷ　Ｖ　Ｋ　Ｑ　Ｒ　Ｐ　Ｇ　Ｑ　Ｇ　Ｌ　Ｅ　Ｗ　Ｉ 　Ｇ　Ｅ　Ｉ　Ａ　ＰＡＧＣ　ＡＡＣ　ＧＧＴ　ＣＧＴ　ＡＴＴ　ＴＡＣ　ＴＡＣ　ＡＡＴ　ＧＡＡ　ＡＡＧ　ＴＴＣ　ＡＡＧ　ＡＡＣ　ＡＡＧ　ＧＣＣ　ＡＣＡ　ＣＴＧ　ＡＣＴＳ　Ｎ　Ｇ　Ｒ　Ｉ　Ｙ　Ｙ　Ｎ　Ｅ　Ｋ　Ｆ　Ｋ　Ｎ　Ｋ　Ａ　Ｔ　Ｌ　Ｔ ＶＨ－ＣＤＲ２ＧＴＡ　ＧＡＣ　ＡＡＡ　ＴＣＣ　ＴＣＣ　ＡＡＣ　ＡＣＡ　ＧＣＣ　ＴＡＴ　ＡＴＧ　ＧＡＡ　ＣＴＣ　ＡＣＣ　ＡＧＣ　ＣＴＧ　ＡＣＡ　ＴＣＴ　ＧＡＧＶ　Ｄ　Ｋ　Ｓ　Ｓ　Ｎ　Ｔ　Ａ　Ｙ　Ｍ　Ｅ　Ｌ　Ｔ　Ｓ　Ｌ　Ｔ　Ｓ　Ｅ　 　ＧＡＣ　ＴＣＴ　ＧＣＧ　ＧＴＣ　ＴＡＴ　ＴＣＴ　ＴＧＴ　ＧＣＡ　ＡＧＡ　ＴＴＧ　ＧＴＧ　ＧＧＡ　ＣＣＣ　ＴＴＣ　ＴＣＴ　ＴＡＣ　ＴＧＧ　ＧＧＣＤ　Ｓ　Ａ　Ｖ　Ｙ　Ｓ　Ｃ　Ａ　Ｒ　Ｌ　Ｖ　Ｇ　Ｐ　Ｆ　Ｓ　Ｙ　Ｗ　ＧＶＨ－ＣＤＲ３ ＣＡＡ　ＧＧＣ　ＡＣＣ　ＣＴＧ　ＧＴＣ　ＡＣＣ　ＧＴＣ　ＴＣＣ　ＴＣＡ　ＧＡＧ　ＣＴＣ　ＧＧＴ　ＧＧＡ　ＧＧＣ　ＧＧＴ　ＴＣＡ　ＧＧＴ　ＧＧＡＱ　Ｇ　Ｔ　Ｌ　Ｖ　Ｔ　Ｖ　Ｓ　Ｓ　Ｅ　Ｌ　Ｇ　Ｇ　Ｇ　Ｇ　Ｓ　Ｇ　ＧＧＧＴ　ＧＧＣ　ＴＣ Ｔ　ＧＧＣ　ＧＧＴ　ＧＧＣ　ＧＧＡ　ＴＣＴ　ＧＧＡ　ＴＣＣ　ＡＧＡ　ＴＧＴ　ＧＡＧ　ＣＴＣ　ＧＴＧ　ＡＴＧ　ＡＣＣ　ＣＡＧＧ　Ｇ　Ｓ　Ｇ　Ｇ　Ｇ　Ｇ　Ｓ　Ｇ　Ｓ　Ｒ　Ｃ　Ｅ　Ｌ　Ｖ　Ｍ　Ｔ　ＱＬｉｎｋｅｒＡＣＴ　ＣＣＡ　ＣＴＣ　 ＴＣＣ　ＣＴＧ　ＣＣＴ　ＧＴＣ　ＡＧＴ　ＣＴＴ　ＧＧＡ　ＧＡＴ　ＣＡＡ　ＧＣＣ　ＴＣＣ　ＡＴＣ　ＴＣＴ　ＴＧＣ　ＡＧＡＴ　Ｐ...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：刘彦仿，
申请(专利权)人：中国人民解放军第四军医大学，
类型：发明
国别省市：87[中国|西安]