The invention discloses a high efficient detoxification of Siraitia grosvenorii tissue culture method, including: the explants were sterilized by sterile explants; the sterile explants were inoculated in MS induction medium were induced and cultured by sterile plantlets; the aseptic Plantlets on MS pre culture medium were pre incubated by pre culture plantlets; the pre cultured plantlets inoculated to MS virus-free culture of virus-free culture tube buds medium; selection of robust test tube shoots were inoculated in 1/2MS medium with root root root, the root plants with scouring seedling and transplanting; among them, King Kong the pyrrolidone MS induced medium containing at least 0.5 1.0mg/L, the MS of pre culture adamantanone based contains at least 0.5 1.0mg/L and 0.1 0.6mg/L silver nitrate. By the method of the present invention S.grosvenorii axillary bud growth coefficient reached 20 30 times, bud strong, inoculated into the rooting medium easily after rooting, the rooting rate was 95%, the survival rate of 95%.
【技术实现步骤摘要】
罗汉果高效脱毒的组织培养方法
本专利技术涉及罗汉果植物繁殖领域,特别是一种罗汉果高效脱毒的组织培养方法。技术背景罗汉果(Siraitiagrosvenorii)是我国传统出口创汇商品之一,味甘性凉,有润肺止咳、生津止渴的功效、适用于肺热或肺燥咳嗽、百日咳及暑热伤津口渴等,此外还有润肠通便的功效。是国家首批批准的药食两用材料之一,在广西民间以有300多年的药用历史,被誉为“东方神果”。长期以来,罗汉果在种植过程中主要采用压蔓方式进行繁殖,以致品种退化、病虫危害严重等问题,尤其是病毒病,严重地块其发病率高达100%,造成巨大泾济损失。近年来,罗汉果生产中主要采用组培苗繁殖,但实践表明,市场上销售的组培苗因为大多具有潜伏病毒病,以致大田种植中病毒病暴发,严重影响产量和品质(林纬等,广西罗汉果病毒病发生情况调查.植物保护,2003.29(4):27-30;唐学军与孙桂春,罗汉果病毒病综合治理.广西农学报,2006.21(5):43-44;梁惠凌,蒋水元与李虹,罗汉果组培苗病毒病流行因子的调查.特产研究,2008.30(2):50-52)。申请号为201510290985.0的专利技术专利公开了一种罗汉果组培苗繁育方法,其选取的是健康的罗汉果植株作为繁殖素材,并不是专门针对含有带有病毒的罗汉果植株,其公开的处理方法中只是对繁殖素材进行简单地杀菌处理,虽取得一定效果,但尚需改善提高,并且其利用的培养基成分比较普通,无法在培养中进一步杀毒,真正杜绝病毒病的爆发。因此,设计一种罗汉果高效脱毒的组织培养方法成为一个亟需解决的问题。
技术实现思路
本专利技术的一个目的是解决至 ...
【技术保护点】
一种罗汉果高效脱毒的组织培养方法,其特征在于,包括:将外植体进行消毒得到无菌外植体;将所得无菌外植体接种至MS诱导培养基中进行诱导培养得到无菌试管苗;将所得无菌试管苗于MS预培养基中进行预培养得到预培养试管苗;将所得的预培养试管苗接种至MS脱毒培养基中进行脱毒培养得到试管丛生芽;选取健壮的试管丛生芽接种至1/2MS生根培养基中进行生根培养得到带根植株,最后将所得的带根植株进行练苗和移栽;其中,所述MS诱导培养基至少包含0.5‑1.0mg/L的金刚烷酮,所述MS预培养基至少包含0.5‑1.0mg/L的金刚烷酮和0.1‑0.6mg/L的硝酸银。
【技术特征摘要】
1.一种罗汉果高效脱毒的组织培养方法,其特征在于,包括:将外植体进行消毒得到无菌外植体;将所得无菌外植体接种至MS诱导培养基中进行诱导培养得到无菌试管苗;将所得无菌试管苗于MS预培养基中进行预培养得到预培养试管苗;将所得的预培养试管苗接种至MS脱毒培养基中进行脱毒培养得到试管丛生芽;选取健壮的试管丛生芽接种至1/2MS生根培养基中进行生根培养得到带根植株,最后将所得的带根植株进行练苗和移栽;其中,所述MS诱导培养基至少包含0.5-1.0mg/L的金刚烷酮,所述MS预培养基至少包含0.5-1.0mg/L的金刚烷酮和0.1-0.6mg/L的硝酸银。2.如权利要求1所述的罗汉果高效脱毒的组织培养方法,其特征在于,选取带病毒的罗汉果植株新萌发的嫩芽作为外植体,然后将所得的外植体剥去叶后,依次用体积分数为1-3%的洗洁精水溶液浸泡5-6min、自来水冲洗15-20min、添加了2-3滴吐温-20的100毫升体积分数为0.1-0.2%的升汞消毒8-10min、无菌水冲洗3-5次,最后用消毒滤纸除去表面水分,得到所述无菌外植体。3.如权利要求1所述的罗汉果高效脱毒的组织培养方法,其特征在于,在接种至MS诱导培养基之前,先将无菌外植体切成带有一个腋芽的茎段。4.如权利要求1所述的罗汉果高效脱毒的组织培养方法,其特征在于,所述MS诱导培养基包含:0.3mg/L的6-BA、0.1mg/L的IAA、0.5-1.0mg/L的金刚烷酮、30g/L蔗糖和5g/L的琼脂,pH值为5.5-6。5.如权利要求4所述的罗汉果高效脱毒的组织培养方法,其特征在于,所述诱导培养的...
【专利技术属性】
技术研发人员:李刚,唐美琼,王晓峰,李竞才,李小勇,周琼,闫志刚,覃芳,
申请(专利权)人:广西壮族自治区药用植物园,
类型:发明
国别省市:广西,45
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