The invention discloses a method of culturing tissue of Paris, including: (1) the tip; (2): 1, the vaccination staff in the preparation of equipment preparation, the Miao, the sorting rooting seedlings inoculation, the subculture seedlings were inoculated and six markers, and training steps. The implementation of relevant measures in training through the source control, temperature control, humidity control, dust, bacteria control and monitoring systems, the implementation of relevant measures, more to improve the efficiency and effectiveness of Paris tissue culture, the product quality is stable and the. The invention can shorten the growth cycle is short and improve the reproduction rate and can effectively reduce the adverse effects of climate disasters of Paris growth through the cultivation of Paris organization.
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及植物的组织培养方法,具体涉及一种重楼组织培养的方法。
技术介绍
重楼是名贵中药材之一,全世界共有24种,我国拥有19种,其中又以西南地区各省的种类和资源尤为丰富,如云南、四川、贵州等地。重楼主要有效成分是甾体皂苷,其苷元主要为异螺甾烷醇类的薯蓣皂苷元和偏诺皂苷元,并含有氨基酸、甾酮、蜕皮激素、黄酮苷等化合物。现代药理研究表明,重楼具有抗肿瘤、止血、止咳平喘、抗菌、抗病毒等作用,其良好的疗效已被众多的制药工业用于药剂的使用,是云南白药、宫血宁、热毒清等重要中成药的主要成分。随着中医药产业的快速发展,重楼药材的需求正以每年20%的幅度递增,而其野生资源却逐年减少,导致重楼价格迅速上涨,严重制约了制药企业的产量和质量。当前,重楼主要靠采挖野生资源,由于长期过度采挖,并缺乏对其生态环境的保护,致使野生重楼资源遭到了毁灭性的破坏,现已濒临灭绝。当前重楼主要是靠种子和根茎进行繁殖,由于重楼种子存在种胚发育不完全,胚乳坚硬,胚轴后熟等明显“双重休眠”特性,因此重楼种子在播种后通常需要经历两个冬天才能萌发成苗,是典型的“二年生种子”,而且在自然状态下重楼种子出苗率很低、生长周期长,从出苗到成材需要8~10年的时间。
技术实现思路
本专利技术提供一种生长周期短,繁殖率高、能有效降低灾害性气候对植物生长的不利影响的重楼组织培养的方法。本专利技术的一种重楼组织培养的方法,包括以下步骤:步骤(1):顶芽处理利用手术刀摘取植株顶芽部分,用清水将顶芽冲洗干净,用配制好的1/1000的氯化汞溶液,浸泡顶芽18-22分钟,利用无菌流动水冲洗顶芽2-4分钟。步骤(2):接种①人 ...
【技术保护点】
一种重楼组织培养的方法,包括以下步骤:步骤(1):顶芽处理利用手术刀摘取植株顶芽部分,用清水将顶芽冲洗干净,用配制好的1/1000的氯化汞溶液,浸泡顶芽18‑22分钟,利用无菌流动水冲洗顶芽2‑4分钟;步骤(2):接种①人员准备:组培人员进入实验室前需更换拖鞋、风淋机去尘、更换无菌服、佩戴口罩、佩戴发套后方可进入组培室,操作前需洗手消毒,操作时严禁讲话;②设备准备:采用75%酒精溶液消毒组培台面;之后开启紫外杀菌灯8‑12分钟;开启高温消毒器对镊子和手术刀进行温消毒,开启工作台通风,准备长柄镊子、长柄手术刀各两套方便消毒和使用的轮替,打开无菌纸袋,将无菌牛皮纸平铺在工作台上;③苗簇分拣:右手持长柄镊,将苗簇从培养瓶中小心取出,放在无菌纸上;左手持手术刀,对取出的苗簇按生长程度进行分拣,已经发育出根系的幼苗称为生根苗,尚未发育根系的组织称为继代苗;④生根苗接种:拿取装有培养基的培养瓶,在工作台面上打开瓶盖,瓶身侧立,从无菌纸上夹区长短相似的生根苗,栽种到培养瓶中,栽种时注意将根部插入培养基,每株间距相对均匀,每瓶栽种20‑25棵;⑤继代苗接种:同样方法,拿取装有培养基的培养瓶,在工作台面 ...
【技术特征摘要】
1.一种重楼组织培养的方法,包括以下步骤:步骤(1):顶芽处理利用手术刀摘取植株顶芽部分,用清水将顶芽冲洗干净,用配制好的1/1000的氯化汞溶液,浸泡顶芽18-22分钟,利用无菌流动水冲洗顶芽2-4分钟;步骤(2):接种①人员准备:组培人员进入实验室前需更换拖鞋、风淋机去尘、更换无菌服、佩戴口罩、佩戴发套后方可进入组培室,操作前需洗手消毒,操作时严禁讲话;②设备准备:采用75%酒精溶液消毒组培台面;之后开启紫外杀菌灯8-12分钟;开启高温消毒器对镊子和手术刀进行温消毒,开启工作台通风,准备长柄镊子、长柄手术刀各两套方便消毒和使用的轮替,打开无菌纸袋,将无菌牛皮纸平铺在工作台上;③苗簇分拣:右手持长柄镊,将苗簇从培养瓶中小心取出,放在无菌纸上;左手持手术刀,对取出的苗簇按生长程度进行分拣,已经发育出根系的幼苗称为生根苗,尚未发育根系的组织称为继代苗;④生根苗接种:拿取装有培养基的培养瓶,在工作台面上打开瓶盖,瓶身侧立,从无菌纸上夹区长短相似的生根苗,栽种到培养瓶中,栽种时注意将根部插入培养基,每株间距相对均匀,每瓶栽种20-25棵;⑤继代苗接种:同样方法,拿取装有培养基的培养瓶,在工作台面上打开瓶盖,瓶身侧立,从无菌纸上夹起长势良好的继代苗,栽种到培养瓶中,栽种时注意底部触碰培养基;⑥标记:对栽种好的培养瓶进行信息标记,包含植物品种、代数、接苗日期、操作员;⑦培养:把接种好的培养瓶,按照内部植株类型和长势的不同,放入不同条件的培养室进行培养。2.根据权利要求1所述的重楼组织培养的方法,其特征在于:其中步骤(2)所述的培养基的配制包括以下步骤:①配制母液:将MgSO4·7H2O280mg、KH2PO4250mg、CaCl2430mg、(NH4)2·SO4850mg、KCL2000mg、H3BO33.0mg、MnSO4·4H2O22.3mg、ZnSO4·7H2O3.8mg、CuSO4·5H2O0.025mg、Na2-EDTA37.3mg、FeSO4·7H2O27.8mg、肌醇55.5mg、甘氨酸2.0mg、叶酸0.50mg、盐酸硫胺素0.25mg、盐酸吡哆醇1.25mg、琼脂8000mg、蔗糖30000mg、6-苄基氨嘌呤2.0mg、吲哚丁酸1.0mg...
【专利技术属性】
技术研发人员:黄麒参,胡旭,
申请(专利权)人:贵州中科绿谷生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:贵州;52
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