结合整联蛋白的肽衍生物制造技术

本发明专利技术涉及用作诊断成象剂或治疗剂的新肽基化合物，其中所述所述药物包含结合整联蛋白受体相关性受体的靶向载体。（*该技术在2021年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及新肽基化合物及其在治疗性有效治疗和诊断成象技术中的用途。更具体地说，本专利技术涉及所述肽基化合物用作结合血管发生相关性受体(特别是整联蛋白受体，例如αvβ3整联蛋白受体)的导向载体的用途。这些造影剂因此可用于诊断例如恶性肿瘤、心脏病、炎性相关疾病、类风湿性关节炎和卡波济氏肉瘤。而且，这些造影剂还可用于这些疾病的治疗性治疗。新血管可通过两种不同机制形成血管生成(vasculogenesis)或血管发生(angiogenesis)。血管发生是通过现有血管分支形成新血管。该过程的主要刺激因素可能是提供给组织细胞的营养物和氧(低氧)不足。细胞通过分泌血管生成因子作出反应，细胞中存在许多血管生成因子，经常提起的一个实例是血管内皮生长因子(VEGF)。这些血管生成因子启动降解基底膜蛋白的蛋白水解酶以及限制这些潜在有害酶作用的抑制剂分泌。血管生成因子的其它显著作用是引起内皮细胞迁移和分裂。附着于基底膜的内皮细胞不进行有丝分裂，其中基底膜在血管腔外侧周围形成连续层。血管内皮细胞不能附着和血管生成因子受体的信号的综合作用引起内皮细胞自身移动、增殖和重排，并最终在新血管周围合成基底膜。血管发生对组织生长和重建(包括伤口愈合和炎性过程)很重要。肿瘤在达到毫米大小时必须开始血管发生，以便保持其生长速率。血管发生通过内皮细胞及其环境的特征变化实现。这些细胞的表面为准备迁移而重建，隐蔽结构暴露出来，这时除了参与影响和控制蛋白水解的各种蛋白之外，基底膜也发生降解。在肿瘤情况下，产生的血管网络经常紊乱，形成尖结以及动静脉吻合。抑制血管发生也被认为是有前景的抗癌症治疗策略。血管发生伴发的转化对诊断也很有前景，一个明显实例是恶性肿瘤，但理论表明对炎性疾病和包括动脉硬化在内的各种炎性相关疾病也有巨大前景，早期动脉硬化病灶中的巨噬细胞是血管生成因子的潜在来源。这些血管生成因子还涉及心肌梗塞部分的血管重新形成，一旦在短时间内消除狭窄，血管就重新形成。下文阐明与新血管形成或血管发生(新血管发生或增殖)相关的有害疾病的其它实例。在这方面还参见WO 98/47541。与血管发生相关的疾病和病症例如为不同形式的癌症和转移，例如乳癌、皮肤癌、结肠直肠癌、胰腺癌、前列腺癌、肺癌或卵巢癌。其它疾病和病症为炎症(例如慢性炎症)、动脉硬化、类风湿性关节炎和齿龈炎。其它与血管生成相关的疾病和病症是动静脉邻近形成(alformation)、星形细胞瘤、绒膜癌、成胶质细胞瘤、神经胶质瘤、血管瘤(儿童，毛细血管瘤)、肝细胞瘤、子宫内膜增生、心肌局部缺血、卡波济氏肉瘤、黄斑变性、黑素瘤、成神经细胞瘤、阻塞性外周动脉疾病、骨关节炎、牛皮癣、视网膜病(糖尿病性、增殖性视网膜病)、硬皮病、精原细胞瘤和溃疡性结肠炎。血管发生涉及内皮细胞及周围组织特有的受体。这些标记包括VEGF之类的生长因子受体和整联蛋白受体家族。免疫组织化学研究表明，各种整联蛋白(最重要的可能是αv类)在血管顶表面表达，并可用于通过循环配体导向。α5β1也是一种重要的整联蛋白，促进纤连蛋白基质组装和促使细胞粘附纤连蛋白。α5β1还在细胞迁移以及肿瘤侵袭和转移中起关键作用。整联蛋白αvβ3是已知与血管发生有关的受体之一。受刺激的内皮细胞在血管发生过程的关键时期内似乎依赖该受体存活，因为αvβ3整联蛋白受体/配体相互作用的拮抗剂诱导凋亡并抑制血管生长。整联蛋白是异二聚体分子，其中α和β亚单位穿过细胞膜脂双层。α亚单位在其胞外链上具有4个Ca+结合域，而β亚单位具有无数胞外半胱氨酸富集结构域。许多涉及细胞粘附的配体(例如纤连蛋白)都含有三肽序列精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)。RGD序列似乎在存在该序列的配体和细胞表面受体之间起主要识别位点的作用。一般认为，配体和受体之间的次级相互作用增强所述相互作用的特异性。这些次级相互作用可能发生在配体部分和受体之间，这种作用紧邻RGD序列或处于离RGD序列较远的部位。已知RGD肽结合一系列整联蛋白受体，并具有调节众多在临床中具有应用意义的细胞事件的潜能。(Ruoslahti，J Clin.Invest.，871-5(1991))。最广泛研究的RGD肽及其类似物作用可能涉及其作为抗血栓形成剂的用途，其中它们靶向血小板整联蛋白GpIIbIIIa。例如WO 97/06791和WO 95/25543描述了使用抗体或含RGD肽通过给予αvβ3或αvβ5拮抗剂抑制组织血管发生。EP 578083描述了一系列单环含RGD的肽，而WO 90/14103要求保护RGD抗体。Haubner等在J Nucl.Med.(1999)；401061-1071中描述了基于单环含RGD肽的用于肿瘤导向的新型追踪物。但是，使用全身放射自显影成象进行的生物分布研究揭示，125I标记肽的血液清除速率非常快，并且主要为产生高背景的肝胆分泌途径。WO 98/54347和WO 95/14714还描述了含多个桥的环形RGD肽。体内生物淘选(WO 97/10507)获得的肽已用于各种靶向用途。具有未鉴定桥位的序列CDCRGDCFC(RGD-4C)已用作细胞靶向药物，例如阿霉素(WO 98/10795)、核酸和腺病毒靶向细胞(参见WO99/40214、WO 99/39734、WO 98/54347、WO 98/54346、US 5846782)。但是，含多个半胱氨酸残基的肽可能有多个二硫键异构体存在的不利情况。RGD-4C之类的具有4个半胱氨酸残基的肽可能形成3个不同的二硫键折叠形式。这些异构体对整联蛋白受体的亲和性不同，因为RGD药效基团被迫有三种不同构象。因此，与体内血管发生有关的整联蛋白受体的有效靶向和成象需要一种基于选择性高亲和RGD的载体，该载体是化学稳固和稳定的。而且，为了减少背景问题，在设计显象剂时分泌途径是重要因素。本专利技术描述的双环结构满足了这些严格条件。从一方面看，本专利技术提供式I定义的新肽基化合物。这些化合物用作具有整联蛋白受体亲和性(例如亲和整联蛋白αvβ3)的载体。式I化合物包含至少两个桥，其中一个桥形成二硫键，而第二个桥包含硫醚(硫化物)键，其中所述桥将载体部分折叠成‘嵌套’构型。因此，本专利技术化合物每个载体部分最多具有一个二硫键。本专利技术定义的化合物在体内和标记(例如用锝标记)过程使用的条件下令人惊奇地稳定。这些新化合物可用于治疗性有效治疗以及成象目的。根据R1和X1-8的定义，式I包括含(V)k部分以及可选的L和/或R部分的化合物，其中V是双环载体，L是连接部分，R是可检测部分(信息基团)，例如用成象方法可检测的部分，例如以(V)kLR结构用作例如人和血管化非人动物体(例如哺乳动物、鸟类或爬虫类动物体)体内成象的造影剂或用作治疗剂。本专利技术提供的新肽基化合物及其药学上可接受的任何盐由式I定义 其中，G代表甘氨酸，D代表精氨酸，R1代表-(CH2)n-或-(CH2)n-C6H4-，优选R1代表-(CH2)-，n代表正整数1、2、3、4、5、6、7、8、9或10，h代表正整数1或2，X1代表一个键或1、2、3、4或5个氨基酸残基，优选为1或2个氨基酸残基，其中每个氨基酸残基都独立可选地用适于改进所述造影剂的药代动力学或血液清除速率的功能侧链(例如糖部分)衍化，所述侧链优选含本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种对整联蛋白受体具有亲和力的通式（Ⅰ）的化合物及其药学上可接受的盐， ＊＊＊ （Ⅰ） 其中Ｇ代表甘氨酸， Ｄ代表精氨酸， Ｒ↓［１］代表－（ＣＨ↓［２］）↓［ｎ］－或－（ＣＨ↓［２］）↓［ｎ］－Ｃ↓［６］Ｈ↓［４］－，其中 ｎ代表正整数１－１０， ｈ代表正整数１或２， Ｘ↓［１］代表一个键或１－５个氨基酸残基，其中每个氨基酸残基都独立可选地用适于改进所述药物的药代动力学或血液清除速率的功能侧链衍化，并且其中每个氨基酸残基都独立可选地通过ｉ）接头（Ｌ）部分或ｉｉ）螯合剂或ｉｉｉ）与螯合剂连接的接头（Ｌ）部分结合适于体内成象的信息基团（Ｒ）部分， Ｘ↓［２］和Ｘ↓［４］独立代表能够形成二硫键的氨基酸残基， Ｘ↓［３］代表精氨酸、Ｎ－甲基精氨酸或精氨酸模拟物， Ｘ↓［５］代表疏水氨基酸或其衍生物， Ｘ↓［６］代表含巯基的氨基酸残基， ｋ代表正整数１－１０， Ｘ↓［７］代表接头（Ｌ）部分或１－１０个氨基酸残基，可选地为接头（Ｌ）部分的一部分，其中每个氨基酸残基都独立可选地用适于改进所述药物的药物动力学或血液清除速率的功能侧链衍化，并且其中每个氨基酸残基都可选地通过ｉ）接头（Ｌ）部分或ｉｉ）螯合剂或ｉｉｉ）与螯合剂连接的接头（Ｌ）部分结合适于体内成象的信息基团（Ｒ）部分， 或者Ｘ↓［７］不存在， Ｘ↓［８］代表信息基团（Ｒ）部分，或者为－ＮＨ↓［２］，或者不存在。...

【技术特征摘要】
...

【专利技术属性】
技术研发人员：A库斯伯特森，B因德雷沃尔，
申请(专利权)人：安盛药业有限公司，
类型：发明
国别省市：NO[挪威]