胡黄连苷II治疗缺血性脑卒中的应用制造技术

本发明专利技术属于药物领域，具体涉及胡黄连苷II在治疗缺血性脑卒中所致脑损伤中的应用，利用大脑中动脉缺血大鼠模型，应用胡黄连苷II干预治疗，对缩小脑梗死体积、改善缺血区脑组织形态结构和大鼠神经行为功能障碍效果明显，且胡黄连苷II的显著抗氧化、保护脑组织和血脑屏障的作用与夹竹桃麻素相当，对神经行为学功能的改善程度亦与夹竹桃麻素相当。本发明专利技术提供的胡黄连苷II应用，对脑缺血再灌注损伤具有神经保护作用，且通过调控Rac1/Nox2/ROS/ROCK/Claudin5信号通路来改善脑缺血再灌注损伤导致的脑损伤和神经功能障碍，表明胡黄连苷II有望开发成为治疗脑缺血再灌注损伤的新型药物。

The application of II in the treatment of ischemic stroke

The invention belongs to the field of medicine, in particular to the application of Picroside II in ischemic cerebral stroke induced brain injury treatment, using the model of middle cerebral artery ischemia rats treated by Picroside II intervention, to reduce the volume of cerebral infarction and improve the effect of nerve dysfunction behavior histology and morphology of cerebral ischemic rats and obviously, and apocynin and significant antioxidant, Picroside II protect the brain tissue and blood brain barrier in quite, the degree of improvement of neurological function and apocynin rather. The present invention provides kutkoside II application on cerebral ischemia reperfusion injury has a neuroprotective effect, and through the Rac1/Nox2/ROS/ROCK/Claudin5 signaling pathway to improve cerebral ischemia reperfusion brain injury and neurological dysfunction caused by that Picroside II development is expected to become a new drug for the treatment of cerebral ischemia reperfusion injury.

【技术实现步骤摘要】
胡黄连苷II治疗缺血性脑卒中的应用
:本专利技术属于药物研究开发领域，具体涉及胡黄连苷II治疗缺血性脑卒中的应用。
技术介绍
:脑卒中(cerebralstroke)是一种常见的脑血管突发事件，包括缺血性和出血性卒中。我国每年新增脑卒中患者150万-180万，脑血管病已居三大死因之首，具有发病率高、死亡率高、致残率高、复发率高的特点。脑卒中是指因各种诱发因素引起脑内动脉狭窄，闭塞或破裂，而造成急性脑血液循环障碍，临床上表现为一过性或永久性脑功能障碍的症状和体征，急性缺血性脑卒中是最常见的脑卒中类型，约占全部脑卒中的60％-80％。缺血性脑卒中系动脉供血突然中断，导致脑组织缺血缺氧、进而坏死、软化，多数情况下，血栓形成是缺血性卒中发生的主要原因，迅速溶栓复流是脑缺血急性期治疗成功的前提和基础。但溶栓治疗血流恢复的同时，脑血流再灌注激发产生了了过剩的活性氧(ROS)，ROS导致蛋白质、脂质和DNA的过氧化，诱导细胞生长增殖停滞，细胞凋亡和坏死，从而形成脑出血和脑水肿，增加死亡率和致残率。因此，开发一种能够抵抗再灌注产生的ROS、减轻溶栓治疗后引起的脑组织损伤的药物或功能制品具有重要意义。目前治疗脑缺血性卒中所致的脑损伤药物，根据《中国急性缺血性脑卒中诊治指南》推荐，且国内使用具有较好疗效的药物仅有依达拉奉一种，但其临床有效率仅有55％，比安慰剂高出约21.8％。因而，研发一种新型高效的针对脑缺血再灌注致脑损伤的药物具有重要的经济和社会效益。胡黄连苷II(PicrosideII)是从我国传统中药胡黄连的根茎中提取出来的一种环烯醚萜苷，分子量为512，能够通过血脑屏障，其结构中含有邻苯二酚基结构，类似抗坏血酸，可通过还原反应直接清除氧自由基，主要通过抗氧化、抗炎、抗凋亡发挥神经保护作用。现阶段，国内外学者已经报道了一些关于胡黄连苷II在防治过敏性炎性疾病应用方面的专利(CN012125544.X)，以及胡黄连苷II在治疗乙型肝炎方面的专利(CN200410098646.4)，但是目前还没有关于胡黄连苷II在治疗缺血性脑卒中所致脑损伤中的专利报道。因此，涉及一类胡黄连苷II治疗缺血性脑卒中的应用，对缺血性脑卒中导致的脑损伤具有神经保护作用和较好的治疗作用。
技术实现思路
：本专利技术的目的在于克服现有技术存在的缺点，针对现有技术中还未有针对缺血性脑卒中致神经功能障碍的有效药物，寻求设计胡黄连苷II治疗缺血性脑卒中的应用，所述胡黄连苷II对缺血性脑卒中导致的脑损伤具有神经保护作用，且能够通过有效抑制Rac1(retrovirus-associatedDNAsequences，逆转录病毒相关DNA序列)/Nox2(Non-phagocyticcelloxidase2，非吞噬细胞氧化酶)/ROS(reactiveoxygenspecies，反应性氧或活性氧)/ROCK(Rho-associatedcoiled-coilformingproteinsetine/threoninekinase，Rho激酶)/Claudin5(闭合蛋白5)信号通路来改善缺血性脑卒中导致的神经功能障碍。为实现上述专利技术目的，本专利技术采用下述技术方案予以实现：选用Wistar大鼠为实验对象，其体重230-250g，为SPF(无特定病原体)级，选用市售胡黄连苷II产品，应用线栓法经左侧颈外-颈内动脉插线建立大脑中动脉栓塞(MCAO)模型，将实验用大鼠分为假手术组、模型组、胡黄连苷II组、夹竹桃麻素组和胡黄连苷II+夹竹桃麻素组，应用改良神经功能缺损评分(mNSS)评价胡黄连苷II对脑缺血再灌注大鼠神经行为功能的影响，mNSS包括动力学测试、感官测试和反射测试，总分18分，评分数越高，表示神经功能缺损越严重。各组大鼠均在手术前后、治疗前后进行评分，证明胡黄连苷II对脑缺血再灌注大鼠的神经功能均有保护作用。进一步地，选用市售胡黄连苷II产品，以体重为230-250g的SPF级Wistar大鼠为实验对象，建立大鼠MCAO模型，将实验用大鼠分为正常组、模型组、胡黄连苷II组、夹竹桃麻素组和胡黄连苷II+夹竹桃麻素组，应用TTC(2,3,5-氯化三苯基四氮唑)染色实验观察胡黄连苷II对MCAO大鼠脑梗死体积的影响，证明胡黄连苷II能够减小MCAO大鼠的脑梗死体积。进一步地，选用市售胡黄连苷II产品，以体重为230-250g的SPF级Wistar大鼠为实验对象，将实验用大鼠分为正常组、模型组、胡黄连苷II组、夹竹桃麻素组和胡黄连苷II+夹竹桃麻素组，研究胡黄连苷II对脑缺血再灌注大鼠血脑屏障的影响，证明胡黄连苷II能够减轻脑水肿，减少EB渗漏，能减轻血脑屏障的开放程度和通透性。进一步地，选用市售胡黄连苷II产品，以体重为230-250g的SPF级Wistar大鼠为实验对象，建立大鼠MCAO模型，检测胡黄连苷II对脑缺血再灌注大鼠脑组织形态及超微结构的影响，证明胡黄连苷II能够显著减轻脑缺血再灌注引起的大脑皮质神经元结构损伤。进一步地，选用市售胡黄连苷II产品，以体重为230-250g的SPF级Wistar大鼠为实验对象，建立MCAO动物模型，检测胡黄连苷II对脑缺血再灌注大鼠神经细胞Rac1/Nox2/ROS/ROCK/Claudin5信号通路活化水平的影响，证明胡黄连苷II具有显著的抗氧化、保护血脑屏障作用，且能够通过调控Rac1/Nox2/ROS/ROCK/Claudin5信号通路而减小脑梗死体积，改善神经元的形态结构和动物的神经行为功能，显示胡黄连苷II对缺血性脑卒中所致脑损伤具有较好的治疗作用。本专利技术与现有技术相比，利用MCAO大鼠模型，选取胡黄连苷II为研究对象，在体内水平上揭示其抑制缺血性脑卒中导致的大脑皮层神经元损伤，改善神经行为功能障碍的作用，证实了胡黄连苷II对脑缺血再灌注大鼠的神经功能有保护作用，能够减小MCAO大鼠的脑梗死体积，减轻脑水肿，减少EB渗漏，能减轻血脑屏障的开放程度和通透性，能够显著减轻脑缺血再灌注引起的大脑皮质神经元结构损伤，具有显著的抗氧化作用，对缺血性脑卒中导致脑损伤具有保护作用，且可通过调控Rac1/Nox2/ROS/ROCK/Claudin5信号通路，改善脑缺血再灌注损伤的神经功能障碍，减轻血脑屏障的损伤，该试剂应用环境良好，治疗效果极佳，具有开发成为治疗缺血性脑卒中新型药物的广阔前景。附图说明：图1为本专利技术涉及的实验中脑缺血再灌注大鼠大脑切片TTC染色结果图。图2为本专利技术涉及的实验中脑缺血再灌注大鼠大脑整体和切片EB渗漏结果图。图3为本专利技术涉及的实验中脑缺血再灌注大鼠大脑皮质区血管的血脑屏障对于硝酸镧的渗透程度(10000×)图。图4为本专利技术涉及的实验中脑缺血再灌注大鼠大脑皮质HE染色结果(400×)图。图5为本专利技术涉及的实中脑缺血再灌注大鼠大脑皮质区神经元形态结构图(5000×；20000×)。图6和图7为本专利技术涉及的实验中脑缺血再灌注大鼠大脑皮质区Rac1/Nox2/ROS/ROCK/Claudin5信号通路各蛋白的表达情况图。具体实施方式：下面结合附图并通过实施例对本专利技术作进一步详细说明。下述实施例选用市售胡黄连苷II产品，以体重为230-250g的SPF级Wistar大鼠为实验对象，通过国际公认的方法来对本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种胡黄连苷II的医疗应用，其特征在于治疗缺血性脑卒中所致脑损伤中的应用。

【技术特征摘要】
1.一种胡黄连苷II的医疗应用，其特征在于治疗缺血性脑卒中所致脑损伤中的应用。2.根据权利要求1所述的胡黄连苷II的医疗应用，其特征在于所述脑损伤包括神经行为学障碍、脑组织梗死、血脑屏障开放程度和通透性增加。3.根据权利要求2所述的胡黄连苷II的医疗应用，其特征在于所述胡黄连苷II能够应用于促进大鼠神经功能恢复。4.根据权利要求3所述的胡黄连苷II的医疗应用，其特征在于所述胡黄连苷II能够应用于缩小大鼠脑梗死体积。5.根据权...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭云良，翟丽，王婷婷，季亚清，张红艳，李珊，赵丽，徐颖婕，郝翠，张丽娟，
申请(专利权)人：青岛大学附属医院，
类型：发明
国别省市：山东,37