本发明专利技术公开了一种检测缺血性脑卒中的生物标志物，所述生物标志物包括KRT9蛋白或其活性片段；编码所述KRT9蛋白的mRNA；编码所述KRT9蛋白的基因。本发明专利技术公开了一种与脑卒中相关的蛋白KRT9，并进一步证实该KRT9蛋白或其活性片段在脑卒中组织中表达上调。利用该蛋白检测缺血性脑卒中不仅能够快速有效的做到早期检测，而且为基因治疗、药物治疗等临床应用提供了治疗靶点和重要依据。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物医药领域，具体涉及一种检测缺血性脑卒中的生物标志物及其应用。
技术介绍
脑卒中又称“中风”、“脑血管意外”(cerebralvascular accident，CVA)。是一种急性脑血管疾病，是由于脑部血管突然破裂或因血管阻塞导致血液不能流入大脑而引起脑组织损伤的一组疾病，包括缺血性和出血性卒中。缺血性脑卒中又称脑梗死，中医称之为中风。本病系由各种原因所致的局部脑组织区域血液供应障碍，导致脑组织缺血缺氧性病变坏死，进而产生临床上对应的神经功能缺失表现。缺血性脑卒中依据发病机制的不同分为脑血栓形成、脑栓塞和腔隙性脑梗死等主要类型。其中脑血栓形成是脑梗死最常见的类型，约占全部脑梗死的60％，因而通常所说的‘脑梗死’实际上指的是脑血栓形成。缺血性脑卒中病因：由于缺血性脑卒中的主要分类——脑血栓形成的病因基础主要为动脉粥样硬化，因而产生动脉粥样硬化的因素是发生脑梗死最常见的病因。由于动脉粥样硬化好发于大血管的分叉处和弯曲处，故脑血栓形成的好发部位为颈动脉的起始部和虹吸部、大脑中动脉起始部、椎动脉及基底动脉中下段等。当这些部位的血管内膜上的斑块破裂后，血小板和纤维素等血液中有形成分随后黏附、聚集、沉积形成血栓，而血栓脱落形成栓子可阻塞远端动脉导致缺血性脑卒中。近期在全球范围内进行的INTERSTROKE研究结果显示：脑梗死风险中的90％可归咎于10个简单的危险因素，它们依次是高血压病、吸烟、腰臀比过大、饮食不当、缺乏体育锻炼、糖尿病、过量饮酒、过度的精神压力及抑郁、有基础心脏疾病和高脂血症。脑卒中是我国继心血管疾病、恶性肿瘤疾病之后的第三大致死性疾病，每年发病率为150/10万，死亡率为120/10万。脑卒中分为缺血卒中和出血性卒中。其中，临床上缺血性卒中更为常见，约占全部脑卒中的70％。约有50％～75％的脑卒中与高血压有关，高血压史使脑卒中的风险增加2.5倍以上。如果应用更严格的高血压定义——血压＞160/90mm Hg，这种风险因素的相关性会增加。缺血性脑卒中的病死率约为10％，致残率可达50％以上。存活者的复发率高达40％，缺血性脑卒中复发可严重削弱患者的日常生活和社会功能，而且可明显增加死亡率。目前，识别引起脑卒中的原因是主要根据头颅CT扫描，核磁共振成像技术和动脉造影。但CT、MRI扫描并不是完全可信的方法，因为在诊断早期CT对缺血性脑卒中只有16％的灵敏度，而对于出血性脑卒中却有89％的灵敏度。20％缺血性脑卒中并不能够被MRI扫描技术探测到。且影像诊断技术并不存在于所有诊疗中心中，这些都阻碍了脑卒中的快速诊断和药物的及时应用。生物标志物是药物研发过程中的有效工具，它提供了药物性能及疾病进程的相关信息，反映了具体的药物治疗效果。糖尿病及免疫性疾病等多种疾病都已经根据生物标志物进行治疗。然而，在脑血管病中生物标志物仍相对缺乏。因此，探索缺血性脑卒中的生物标志物有着重要的意义。由于传统诊断不足，找到诊断脑卒中的新颖的生物标志成为了一种迫切的需求。针对辨认生物学标志物用iTRAQ和高分辨率的质谱来进行相对定量是一项很有前途的技术。识别体液中的缺血性脑卒中生物学标志物对于影像学诊断具有辅助性作用。
技术实现思路
为了实现脑卒中的早期发现，早期干预，本专利技术的目的在于提供一种角蛋白，I型细胞骨架蛋白9(Keratin，type I cytoskeletal 9(KRT9))蛋白在作为缺血性脑卒中生物标志物中的应用。为实现上述目的，本专利技术首先提供了一种检测缺血性脑卒中的生物标志物，所述生物标志物包括KRT9蛋白或其活性片段；编码所述KRT9蛋白的mRNA；编码所述KRT9蛋白的基因。本专利技术的第二方面提供了所述生物标志物在诊断缺血性脑卒中和/或评估罹患缺血性脑卒中风险的产品中的应用。本专利技术的第三方面提供了所述生物标志物在评估脑卒中的治疗效果或者判断脑卒中的预后产品中的应用。优选的，所述产品包括芯片或试剂盒。优选的，所述KRT9蛋白在缺血性脑卒中生物样品中表达上调。优选的，所述检测包括基因水平的检测和蛋白水平的检测。如，所述基因水平的检测包括real-time PCR法、Northern blot、Southern blot、基因芯片、原位杂交或RNA酶保护实验等。所述蛋白水平的检测包括免疫检测、Western blot或蛋白芯片等。为了简化实验程序，所述蛋白水平的检测还包括蛋白检测试剂盒，如ELISA检测试剂盒、胶体金检测试剂盒、免疫共沉淀试剂盒、化学发光试剂盒、免疫荧光试剂盒等。所述试剂盒中一般配备有相应的使用说明书，说明书一般包括公司标志及名称、试剂盒名称、试剂盒组成、保质期、使用领域、使用方法等项目，用户按照说明书不需或只需少量的优化即可得到满意的结果。优选的，所述免疫方法为ELISA法检测和/或胶体金检测。所述ELISA法为使用ELISA检测试剂盒，所述的试剂盒包括：包被KRT9单克隆抗体的固相载体，酶标抗体，酶的底物，蛋白标准品，阴性对照品，稀释液，洗涤液，酶反应终止液等。本专利技术的第四方面提供了所述生物标志物在筛选预防或治疗脑卒中的药物的应用。优选的，所述KRT9蛋白在缺血性脑卒中生物样品中表达上调。优选的，所述的样品为血液，如血清、血浆或全血。本专利技术的第五方面提供了能够抑制血液中KRT9蛋白表达的物质在制备预防或治疗脑卒中药物中的应用。本专利技术的第六方面提供了用于检测脑卒中发生的系统，该系统包括检测KRT9蛋白或其活性片段的物质。优选的，所述系统包括数据处理装置，所述数据处理装置内设采集比较模块a和处理模块b，所述采集比较模块a的功能为：采集并比较待测者与对照者的组织样本中所述KRT9蛋白或其活性片段的表达量；所述处理模块b的功能为根据比较的结果按照如下方法确定待测者是否为脑卒中患者：若所述待测者的组织样本中所述KRT9蛋白或其活性片段的表达量显著高于所述对照组的组织样本中所述KRT9蛋白或其活性片段的表达量，则所述待测者为或候选为脑卒中患者；反之，则所述待测者不为或候选不为脑卒中患者；所述对照者为健康人。优选地，处理模块b中判断上调的标准是待测者的组织样本中所述KRT9蛋白或其活性片段的表达量比对照者至少提高30％。优选地，处理模块b中判断上调的标准是待测者的组织样本中所述KRT9蛋白或其活性片段的表达量比对照者至少提高60％。优选地，处理模块b中判断上调的标准是待测者的组织样本中所述KRT9蛋白或其活性片段的表达量比对照者至少提高90％。本专利技术的有益效果如下：本专利技术公开了一种与脑卒中相关的蛋白KRT9，并进一步证实该KRT9蛋白或其活性片段在脑卒中组织中表达上调。利用该蛋白检测脑卒中不仅能够快速有效的做到早期检测，而且为基因治疗、药物治疗等临床应用提供了治疗靶点和重要依据。附图说明图1本专利技术实施例2中的色谱图；图2本专利技术实施例3中的KRT9表达量标准曲线。具体实施方式以下实施例用于说明本专利技术，但不用来限制本专利技术的范围。若未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段，所用的试剂可以商业购买得到。实施例中未注明具体条件的实验方法，通常为本领域常规方法。本专利技术的专利技术人对6例脑卒中样本及6例对照样本进行高通量测序，结合生物信息学方法进行筛选，挑选出候本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种检测缺血性脑卒中的生物标志物，其特征在于，所述生物标志物包括KRT9蛋白或其活性片段；编码所述KRT9蛋白的mRNA；编码所述KRT9蛋白的基因。
【技术特征摘要】
1.一种检测缺血性脑卒中的生物标志物，其特征在于，所述生物标志物包括KRT9蛋白或其活性片段；编码所述KRT9蛋白的mRNA；编码所述KRT9蛋白的基因。2.如权利要求1所述的生物标志物在诊断缺血性脑卒中和/或评估罹患缺血性脑卒中风险的产品中的应用。3.如权利要求1所述的生物标志物在评估脑卒中的治疗效果或者判断脑卒中的预后产品中的应用。4.如权利要求2或3所述的应用，其特征在于，所述产品包括芯片或试剂盒。5.如权利要求2或3所述的应用，其特征在于，所述KRT9蛋白在缺血性脑卒中生物样品中表达上调。6.如权利要求1所述的生物标志物在筛选预防或治疗脑卒中的药物的应用。7.如权利要求6所述的应用，其特征在于，所述KRT9蛋白在缺血性脑卒中生物样品中表达上调。8.如权利要求7的...
【专利技术属性】
技术研发人员：李永旺，麻莉，康艳娜，马玉恒，张树峰，韩月鹏，
申请(专利权)人：李永旺，
类型：发明
国别省市：北京;11
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