亚氨基糖和氨基糖的纯化制造技术

本发明专利技术涉及纯化例如Ｄ－１－脱氧半乳糖野尻霉素（ＤＧＪ）的亚氨基或氨基糖的新方法。特别是，描述了用盐酸纯化数千克规模的糖的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及纯化例如D-1-脱氧半乳糖野尻霉素盐酸盐(DGJ.HC1)的亚 氨基或氨基糖的方法。该方法可用于制备数千克量的上述含氮糖。
技术介绍
因为在多种生物过程中已经发现，糖在选择性抑制多种酶功能中起主 要作用，所以它们在药理学中是有价值的。 一类重要的糖为糖苷酶抑制剂， 糖苷酶抑制剂可用于治疗代谢性疾病。半乳糖苦酶催化糖苷键的水解，它 在复合糖的代谢中是重要的。如D-1-脱氧半乳糖野尻霉素(DGJ)的半乳糖 苷酶抑制剂可以用于治疗许多疾病和病症，包括糖尿病(例如U.S.专利 4634765)、癌症(例如U.S.专利5250545)、疱瘆(例如U.S.专利4957926)、 HIV和法布里(Fabry)病(Fan等人，自然医学(Nat. Med.) 1999 5:1， 112-5)。通常，通过色谱分离纯化糖。对于实验室规模的合成而言，这种方法 是快捷而有效的，但是，当纯化更大量的糖时，柱色谱法和类似的分离技 术变得不大有价值。柱子的大小、所需的溶剂和固定相(例如硅胶)的量和 分离所需的时间各自都随所纯化的产物的量而增加，这使在数千克规模合 成中用柱色谱法纯化不现实。另一种糖的常规纯化技术为离子交换树脂。该技术可能是烦瑣的，需 要对离子交换树脂进行烦瑣的预处理。可用的离子交换树脂也不一定能够 将糖与盐(例如NaCl)分离。酸性树脂容易将粗产物中存在的金属离子和氨 基糖或亚氨基糖都从溶液中除掉，因此是不可用的。寻找能够选择除去金属阳离子而使氨14t或亚氨14t留存在溶液中是不易的。此外，在用离子 交换树脂纯化糖之后，需要额外的浓缩稀释的水溶液的步骤。该步骤可能 导致糖分解，从而产生污染物并降低收率。U.S.专利6740780、 6683185、 6653482、 6653480、 6649766、 6605724、 65卯121和6462197描述了制备亚氨基糖的方法。这些化合物通常由羟基 保护的肟中间体通过形成可还原为己糖醇的内酰胺而制备。然而，就安全、 扩大规模、处理和合成复杂性而言，该方法在数千克规模生产中有一些缺 点。例如，几种公开的合成中用快速色镨纯化或离子交换树脂处理，上述 方法不适于在大规模中应用。一种特别有用的亚氨基糖为DGJ。文献中公开了几种DGJ的制备方 法，其中多数不适于在工业实验室中的制^^见模(例如>100 8)。 一种此类合 成包括从D-半乳糖开始的合成(Santoyo-Gonzalez等人，合成快报(Synlett) 1999 593-595;合成(synthesis) 1998 1787-1792)，其中为了纯化DGJ和DGJ 中间体使用了色语法。还已公开了为纯化DGJ可使用离子交换树脂，但是 没有任何迹象表明树脂可用于在制备规模上纯化DGJ。制备DGJ的公开 的最大规模是13 g(参见Fred-Robert Heiker, Alfred Matthias Schueller， 糖研究(Carbohydrate Research), 1986,119-129)。在该公开书中，通过与离 子交换树脂Lewatit MP 400 (OH)搅拌分离DGJ并从乙醇中结晶。然而， 该方法也不能容易地用于数千克量的规一莫。类似地，其它工业和药学上有用的糖通常用色谱法和离子交换树脂纯 化，这些纯化方法不易于使纯化规模扩大至数千克量。因此，需要一种纯化含氮糖、优选氨基或亚氨基己糖的方法，该方法 是简单并对于大规模合成而言为有成本效益的。
技术实现思路
现已发现，用浓盐酸处理粗制的氨基或亚氨基糖，可以有效地以大规 模方法提供含氮糖，即氨基或亚氨基糖。不需要例如用离子交换树脂纯化 时所需的预处理或稀释。含氮糖可溶于浓HC1中，并且在浓HC1中足够稳定。因此，可以用简单、快速和有效的方法，使用HC1将糖从不可溶的碱 或碱土金属氯化物(例如氯化钠)中分离。这些碱或碱土金属氯化物由其它含有碱或碱土金属的组分形成，所述 含有碱或碱土金属的组分是为了各种目的，例如脱除保护基，在氨基或亚 氨基糖合成步骤之一中使用的组分。所述HC1处理可以用于除去在盐酸中 不溶的其它杂质。在氨基或亚氨基糖的合成中，必须在所需的氨基或亚氨 基糖的最终纯化中将含有碱或碱土金属的组分除去。使用含有碱或碱土金 属的化合物的 一个实例为在氨基或亚氨基糖合成期间使用碱脱除酰基保护 基。例如，在DGJ合成的最后一步中使用溶于甲醇的曱醇钠作为转酯反应 中的催化剂，以除去新戊酰保护基。根据下面的描述、附随的数据以及所附的权利要求，本专利技术的其它特 征、优点和实施方案对本领域中的技术人员来说将是显而易见的。附图说明下面的图是本说明书的一部分，并用于对本专利技术的某些方面进一步说明。通过参照一个或多个下述图并结合文中提到的具体实施方案的详细说明可以更好地理解本专利技术。图1.结晶后的纯化的DGJ的HPLC图。DGJ纯度超过99.5%。 图2A. DGJ(HC1萃取和结晶后)的，H NMR, 0-15 ppm,在DMSO中。 图2B. DGJ(HC1萃取和结晶后)的^ NMR， 0-5 ppm,在DMSO中。 图3A.纯化的DGJ(重结晶后)的1HNMR， 0-15 ppm，在020中。注意OH基团已经与OD进行了交换。图3B.纯化的DGJ(重结晶后)的iHNMR， 0-4 ppm，在020中。注意OH基团已经与OD进行了交换。图4.纯化的DGJ(重结晶后)的"CNMR, 45-76 ppm。术语"烷基"指直链或支链的仅由碳和氢原子构成的且不含不饱和现 象的C1-C20烃基团，其通过单键连接到分子的其余部分，例如曱基、乙基、正丙基、l-甲基乙基(异丙基)、正丁基、正戊基、l，l-二甲基乙基(叔丁基)。文中所用的烷基优选为Cl-C8烷基。术语"烯基"指含有至少一个碳-碳双键的C2-C20脂肪烃基团，其可 为直链或支链的，例如乙烯基、l-丙烯基、2-丙烯基(烯丙基)、异丙烯基、 2-甲基-l-丙烯基、l-丁烯基、2-丁烯基。术语"环烷基"指不饱和的非芳香性的单环或多环烃环体系，如环丙 基、环丁基、环戊基、环己基。多环环烷基基团的示例包括桥环基团(全氢 萘基、金刚烷基和降莰烷基)或螺环基团(例如，螺(4，4)-壬-2-基)。术语"环烷基烷基"指如上定义的环烷基直接连接到如上定义的烷基， 这致使产生了稳定的结构，例如环丙基甲基、环丁基乙基、环戊基乙基。术语"烷基醚"指含有至少一个掺入到烷基链的氧原子的如上定义的 烷基基团或环烷基基团，例如甲基乙基醚、乙醚、四氢呋喃。术语"烷基胺"指含有至少一个氮原子的如上定义的烷基基团或环烷 基基团，例如正丁胺和四氢巧恶溱。术语"芳基，，指约有6-14个碳原子的芳香基，如苯基、萘基、四氢萘 基、茚满基、联苯基。术语"芳基烷基"指如上定义的芳基基团直接键合至如上定义的烷基 基团，例如-CH2C6Hs和-<:2114<:6115。术语"杂环基"指稳定的3至15元环基，其包含碳原子和选自氮、磷、 氧和硫原子的一个至五个杂原子。对于本专利技术的目的而言，杂环基可以为 单环、双环或三环体系，其可以包括稠环、桥环或螺环体系，并且在杂环 基中的氮、磷、碳、氧或硫原子可以任选被氧化为各种氧化状态。此外， 氮原子可以任选被本文档来自技高网...

【技术保护点】
纯化被含碱或碱土金属的化合物污染的含氮糖粗品的方法，该方法包括：　　　　（ａ）将下式含氮糖或其ＨＣｌ盐与浓盐酸混合或与氯化氢气体混合至饱和，　　　　＊＊＊　　　　其中Ｘ为ＮＨ、Ｏ、ＮＨＲ↑［３］或Ｎ（Ｒ↑［３］）↓［２］；　　　　每个Ｒ独立地为ＯＨ或ＮＨ↓［２］或ＮＨＲ↑［３］或Ｎ（Ｒ↑［３］）↓［２］；　　　　Ｒ↑［１］为Ｈ、ＯＨ或－Ｏ－糖；　　　　Ｒ↑［２］为Ｈ、ＣＨ↓［３］、ＣＨ↓［２］ＯＨ或－ＣＨ↓［２］－Ｏ－糖；　　　　每个Ｒ↑［３］独立地为Ｈ或取代或未取代的Ｃ↓［１］－Ｃ↓［１２］烷基、Ｃ↓［２］－Ｃ↓［１２］烯基、Ｃ↓［２］－Ｃ↓［１２］炔基、Ｃ↓［５］－Ｃ↓［６］环烷基、Ｃ↓［５］－Ｃ↓［１２］环烯基、Ｃ↓［５］－Ｃ↓［１２］芳基、Ｃ↓［４］－Ｃ↓［１２］杂芳基、Ｃ↓［６］－Ｃ↓［１２］芳烷基、Ｃ↓［４］－Ｃ↓［１２］杂环基、Ｃ↓［６］－Ｃ↓［１２］杂环烷基、Ｃ↓［５］－Ｃ↓［１２］杂芳基烷基或Ｃ↓［２］－Ｃ↓［１２］酰基；且　　　　ｎ为０、１或２；　　　　条件是如果Ｘ为Ｏ，则至少一个Ｒ必须为ＮＨ↓［２］或ＮＨＲ↑［３］或Ｎ（Ｒ↑［３］）↓［２］；　　　　（ｂ）除去碱或碱土金属化合物的氯化物，其中氯化物为固体；和　　　　（ｃ）通过加入与盐酸混溶的溶剂使糖结晶。...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

【专利技术属性】
技术研发人员：M梅杰，R彼得森，S科辛斯基，
申请(专利权)人：阿米库斯治疗学公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]