本发明专利技术涉及生物制药领域。本发明专利技术提供的含有磷酸化酪氨酸的多肽，其具有如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列。所述多肽能够高效转导进入神经细胞，降低神经细胞内特异的PTK磷酸化，有效地防止缺血性的神经细胞损伤，从而对于缺血性脑卒中具有较好的抑制作用，而且其还具有高特异性且无毒副作用的特点。将其用于制备治疗缺血性脑卒中的药物中，能够发挥较好的作用。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物药物领域，特别涉及含有磷酸化酪氨酸的多肽、其应用及药物组合物。
技术介绍
脑卒中又名脑中风，是一种突然起病的脑血液循环障碍性疾病。临床上表现为一过性或永久性脑功能障碍的症状和体征。脑中风是严重危害人类健康和生命安全的常见的难治性疾病，是现今人类死亡率最高的三大疾病之一，也是三大疾病中发展最快、恢复最慢、死亡最多、致残最重的病种。脑卒中分为缺血性脑卒中和出血性脑卒中。缺血性脑卒中是指局部脑组织包括神经细胞、腔质细胞和血管由于血液供应缺乏而发生的坏死。引起缺血性脑卒中的根本原因是，供应脑部血液的颅外或颅内动脉中发生闭塞性病变而未能获得及时、充分的侧支循环，使周部脑组织的代谢需要与可能得到的血液供应之间发生供不应求所致。缺血性脑卒中的发病率高于出血性脑卒中，占脑卒中总数的60％～70％，提高缺血性脑卒中的治疗与预防水平是当务之急。目前针对缺血性脑卒中的药物主要有以下几种：(1)溶栓药溶栓药作用机制：溶解已形成的血栓，使闭塞动脉再通，也可降低血浆凝血因子I含量进而降低血黏度，增加缺血区域的血流量。主要药物有组织型纤溶酶原激活药(t-PA)、链激酶(strepto-kinase，SK)和尿激酶(urokinase，UK)等。(2)抗凝血药抗凝血药作用机制：阻止栓子的进一步扩大，并减少继发的进行性神经功能损害，预防卒中复发。主要药物有低分子肝素等。(3)抗血小板聚集药主要药物有阿司匹林、噻氰匹定(ticlopidine)、氯吡格雷(clopidogre1)、血小板糖蛋白Ⅱh/IIa受体拮抗药等。(4)氧自由基清除药氧自由基清除药作用机制：减少类脂膜过氧化损害及DNA损伤。主要药物有超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶、维生素E、谷胱甘肽、铁螯合药等。(5)神经保护药神经保护药作用机制：在细胞水平纠正失衡，尽可能减少细胞损伤、加强溶栓效果，或者改善脑血流。主要药物有钙通道阻滞药、谷氨酸拮抗药、谷氨酸释放抑制药、γ-氨基丁酸(GABA)受体激动药、NMDA受体拈抗药和氮氧化物相关毒性调节药等。(6)炎症反应抑制药炎症反应抑制药作用机制：减少中性粒细胞浸润，抑制细胞因子和黏附分子的表达，阻断相关受体。主要药物有阿司匹林、IL-1拮抗药、他汀类药物等。(7)中草药治疗虽然上述药物在治疗缺血性脑卒中时，具有局部改善症状的作用，但是，多数药物还存在药效差、安全性能差、副作用多等缺点。
技术实现思路
本专利技术提供一种含有磷酸化酪氨酸的多肽、其应用及药物组合物，所述多肽能够高效转导进入神经细胞，降低神经细胞内特异的PTK磷酸化，有效地防止缺血性的神经细胞损伤，具有高特异性且无毒副作用的特点。为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：本专利技术提供了一种含有磷酸化酪氨酸的多肽，其具有如SEQIDNO:1所示的氨基酸序列。本专利技术采用Fmoc固相合成法合成所述含有磷酸化酪氨酸的多肽，Fmoc固相合成法按照本领域技术人员熟知的操作步骤进行即可。本专利技术还提供一种药物组合物，包括上述技术方案所述的含有磷酸化酪氨酸的多肽。所述药物组合物中，所述含有磷酸化酪氨酸的多肽为粉末状原料药，优选的纯度大于98％。所述药物组合物通常溶于生理盐水后进行注射给药。本专利技术还提供了上述技术方案所述的含有磷酸化酪氨酸的多肽在制备降低神经细胞内特异性PTK磷酸化的药物中的应用。本专利技术还提供了上述技术方案所述的含有磷酸化酪氨酸的多肽在制备防止缺血性神经细胞损伤的药物中的应用。本专利技术还提供了上述技术方案所述的含有磷酸化酪氨酸的多肽在制备治疗缺血性脑卒中的药物中的应用。在本专利技术提供的一些实施例中，采用很小计量的所述含有磷酸化酪氨酸的多肽即可以在治疗缺血性脑卒中时发挥作用，在所述药物中，所述含有磷酸化酪氨酸的多肽的有效剂量为10～200mg/kg。与现有技术相比，本专利技术提供的含有磷酸化酪氨酸的多肽，其具有如SEQIDNO:1所示的氨基酸序列。所述多肽能够高效转导进入神经细胞，降低神经细胞内特异的PTK磷酸化，有效地防止缺血性的神经细胞损伤，从而对于缺血性脑卒中具有较好的抑制作用，而且其还具有高特异性且无毒副作用的特点。将其用于制备治疗缺血性脑卒中的药物中，能够发挥较好的作用。附图说明图1为PYP1～PYP12多肽作用于大鼠局灶性脑缺血再灌注模型脑切片的TTC染色图；图5中，a.正常组，b.假手术组，c.模型组，d.阳性药恩必普注射液组，e-p.PYP1-PYP12多肽预防药组，10mg/kg，造模后1h给药；图2为PYP1～PYP12多肽作用于大鼠局灶性脑缺血再灌注模型脑梗死体积数据统计柱形图；图3为PYP2多肽作用于大鼠局灶性脑缺血再灌注模型脑切片的TTC染色图；图1中，a.正常组，b.假手术组，c.模型组，d.阳性药恩必普注射液组，e.PYP2多肽治疗给药组，10mg/kg，造模1h后给药，f.PYP2多肽预防药组，10mg/kg，造模前30min给药；图4为PYP2多肽作用于大鼠局灶性脑缺血再灌注模型脑梗死体积数据统计柱形图；图5为PYP2多肽作用于大鼠局灶性脑缺血再灌注模型脑含水量数据统计柱形图；图6为PYP2多肽对MCAO大鼠脑部细胞凋亡的抑制作用效果图；图7为荧光标记的PYP2多肽与神经细胞共同孵育后的荧光显微图；图8为检测经PYP2多肽作用后的神经细胞表达pSrc和src的Westernblot电泳图；图9为利用pTyr抗体检测酪氨酸磷酸化的电泳图；图10为PYP2多肽对NMDA处理的神经元保护作用检测柱形图；图11为PI染色的细胞荧光显微图。具体实施方式本专利技术公开了一种含有磷酸化酪氨酸的多肽、其应用及药物组合物，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本专利技术。本专利技术的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本
技术实现思路
、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本专利技术技术。下面结合实施例，进一步阐述本专利技术：实施例1采用Fmoc方法进行合成，得到具有如SEQIDNO:1所示的氨基酸序列，记为PYP2多肽。比较例1设计合成11条多肽，如下：PYP1：具有如SEQIDNO:2所示的氨基酸序列；PYP3：具有如SEQIDNO:3所示的氨基酸序列；PYP4：具有如SEQIDNO:4所示的氨基酸序列；PYP5：具有如SEQIDNO:5所示的氨基酸序列；PYP6：具有如SEQIDNO:6所示的氨基酸序列；PYP7：具有如SEQIDNO:7所示的氨基酸序列；PYP8：具有如SEQIDNO:8所示的氨基酸序列；PYP9：具有如SEQIDNO:9所示的氨基酸序列；PYP10：具有如SEQIDNO:10所示的氨基酸序列；PYP11：具有如SEQIDNO:11所示的氨基酸序列；PYP12：具有如SEQIDNO:12所示的氨基酸序列。实施例2大鼠局灶性脑缺血再灌注模型的构建根据longa提出的可逆性大脑中动脉闭塞(MCAO)线栓法并根据大鼠脑解剖结构图加以改进制作局灶性脑缺血再灌注模型，以10％水合氯醛0.3ml/kg腹腔麻醉，颈正中切口，暴露颈总动脉(CCA)、颈本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种含有磷酸化酪氨酸的多肽，其特征在于，其具有如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列。
【技术特征摘要】
1.一种含有磷酸化酪氨酸的多肽，其特征在于，其具有如SEQIDNO:1所示的氨基酸序列。2.一种药物组合物，包括如权利要求1所述的含有磷酸化酪氨酸的多肽。3.权利要求1所述的含有磷酸化酪氨酸的多肽在制备降低神经细胞内特异性PTK磷酸化的药物中的应用。4.权利要求1所述的含有...
【专利技术属性】
技术研发人员：芦颖，韩化敏，李建彬，
申请(专利权)人：拜西欧斯北京生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。